EDTA依赖性假性血小板减少症分析

发表时间：2013-04-08T09:33:26.577Z 来源：《医药前沿》2013年第4期供稿 作者： 贺想平 谢海 苏嘉恋[导读] 加强血小板减少现象原因的综合分析可纠正EDTA抗凝剂诱发的血小板聚集引起血小板假性减少。

贺想平 谢海 苏嘉恋 （泉州医学高等专科学校附属人民医院 福建泉州 362000）

【摘要】目的 为避免EDTA抗凝剂诱发血小板聚集引起假性血小板减少的错误结果报告。方法 采用仪器法和手工法进行血小板计数和血涂片瑞-姬氏染色法观察血小板形态。结果 改用枸橼酸钠抗凝剂后仪器检测血小板计数不受干扰。结论 加强血小板减少现象原因的综合分析可纠正EDTA抗凝剂诱发的血小板聚集引起血小板假性减少。

【关键词】EDTA抗凝剂 假性血小板减少症 血液分析仪 血小板计数

【中图分类号】R558+.2 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2013）04-0058-03

由于EDTA盐对各种血细胞的影响极小，因此国际血液学标准化委员会（ICSH）推荐使用EDTA-K2为血细胞计数的抗凝剂，并已在世界范围广泛应用，一般不会对检测结果造成影响。但有时EDTA可以诱发血小板发生聚集,引起EDTA依赖性假性血小板减少症(EDTA-dependent pseudo thrombocytopenia, PTCT),会导致临床增加不必要的辅助检查，备受国内外广泛关注。现将我院1例EDTA依赖性血小板凝集致血小板假性少症报道如下。 1 材料与方法

1.1 病例摘要：患者×××，女，25岁，我院健康产前检查孕妇，PT、TT、APTT和Fib (枸橼酸钠抗凝) 均在参考区间内，皮肤、牙龈、胃肠道等处无紫癜、出血等现象。

1.2 仪器：MAXM型全自动五分类血细胞分析仪，美国库尔特公司产品。 1.3 试剂：

1.3.1 仪器试剂：EDTA-K2抗凝剂及仪器原装配套试剂盒。

1.3.2 手工试剂：血小板稀释液、瑞-姬氏染色，按《全国临床检验操作规程》配制[1]。 2 结果与讨论

2.1 EDTA-K2抗凝血标本检测结果

2.1.1 EDTA-K2抗凝血仪器法5次检测结果见表1。 表1 EDTA-K2抗凝血仪器法检测结果（x-）

结果仪器三维图WBC、RBC、PLT均有“Ab normal Pop”和PLT值旁有“RL”、WBC值旁有“*R”的警示信号，且PLT计数结果随时间延长而下降明显，见见图1～图2。

三维图显示WBC阀值线下方有某种细胞群存在；PLT直方图中似合曲线消失，且有拖尾现象，时间久后呈不规则曲线。

2.1.2 EDTA—K2抗凝血涂片瑞-姬氏染色，显微镜观察结果：显示血小板互相聚集、堆积,见图3～图5，未见卫星现象（图6），此恐与制片时已至卫星现象动态过程的聚集与离开多核细胞阶段有关。

图6 血小板卫星凝集图（资料）

2.2 末梢血手工法检测结果

2.2.1 末梢血手工稀释法PLT 3次计数结果均值为236×109/L。

2.2.2 末梢血涂片瑞一姬氏染色，显微镜观察结果：未发现血小板发生聚集现象，见图8。

2.3 枸橼酸钠抗凝血标本仪器3计数结果见表2。 表2 枸橼酸钠抗凝血仪器法检测结果（x-）

结果WBC、RBC、PLT 结果稳定，PLT直方图中似合曲线恢复正常，PLT值旁亦无警示信号，见图7。

2.4 讨论

PTCT是由于用EDTA盐作为抗凝剂的抗凝血在全自动血细胞计数仪上检测时，发生假性血小板计数减少的现象。于1973年被Ghreiner正式命名，我国从1980年才开始报道EDTA可引起血小板聚集。其产生机制，有3种观点：（1）自身免疫性疾病；（2）其他疾病发生的伴随现象；（3）温度依赖性抗体[2]。多数学者倾向于主要是由于EDTA作为抗凝剂诱导抗凝血中血小板自身抗体直接作用于血小板膜糖蛋白Ⅱb/Ⅲa上，同时，这种与血小板结合的自身抗体Fc端可与单核细胞或淋巴细胞膜上Fc受体结合，出现血小板互相聚集、堆积和发生卫星现象[3]。这种凝集物不被溶血素破坏，至今未发现该现象有何病理、生理意义，也与特殊药物的作用无关[4]。

PTCT临床发生率约为0.07～0.1%[5]，多出现在实体瘤、髓系或淋巴系增殖性疾病、自身免疫性疾病、心脏疾病、干燥综合症、脓毒血症、肝硬化以及一些不明原因疾病的患者[6]，然多数报道并无临床征兆[7～8]。因其临床发生率很低，不为大多数检验工作者和临床医师所熟悉，以致造成漏诊、误诊而无故增加其它不必要的辅助检查，加重患者的精神、心理及经济负担，延误病情，耽误治疗，甚至危及患者生命，引发医疗事故的发生。近年来，北京、上海等地已经陆续有假性血小板减少的健康者对医院提起诉讼。

值得提及的是：PTCT发生时，血细胞分析仪会把凝集块当作白细胞来计数，造成血小板值减少，同时白细胞值增加的假象。图1显示三维图像下方的细胞群疑似存在含有血小板凝集的微颗粒群，血小板直方图曲线无法探底。结果不仅使EDTA—K2抗凝血样本的血小板值显著低于枸橼酸钠抗凝血样本的血小板值。而且前者的白细胞值高于后者的白细胞值。此严重影响白细胞测定结果准确性的问题，应引起我们高度重视.同时对红细胞计数的影响似乎甚微，然亦不容忽视。

检验人员必须清醒地认识到：任何现代先进仪器都无法替代手工法操作，要注意观察检测仪器的结果信息，加强血小板减少现象原因的综合分析[9]。实验室对于PTCT的处理办法一般先采集指血，用手工稀释法进行测定，执行血涂片复检规则或用枸橼酸钠抗凝管重新采集静脉血作仪器测试。通过观察血片可发现血小板大量聚集的信息[10～11]，然后改用枸橼酸盐作为抗凝剂或末梢采血，采用血液分析仪或手工法计数测定均能得到准确的血小板计数结果。因此，对于不明原因的血小板计数过低，与临床病情不符者，即使仪器末报警，也应末梢采血进行手工血小板计数[12～13]，或改用枸橼酸盐抗凝剂后在血液分析仪上复查血小板，同时观察血片中血小板分布情况，以免误诊。 参考文献

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