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油茶籽中角鲨烯的提取与分析研究

来源:六九路网
《药物分离纯化技术》作业 2015.4.14

学号:201207005105 姓名:王胜盛 班级:制药1201

油茶籽中角鲨烯的提取工艺研究

一、 研究目的

1、 探究超声辅助提取油茶籽中角鲨烯溶剂的选择。 二、研究方法和内容 1、前言

油茶(Camellia oleiferaAbel.)为山茶科(Theaceae)山茶属常绿小乔木,是中国特有的木本油料作物,油茶在我国的种植范围非常广,我国是油茶产量最多的国家,我国的油茶籽产量占世界的 90 %以上。东南亚其他国家也有少量栽培。

角鲨烯具有较强的生理药理活性,具有类似红细胞摄取氧的功能,生成活化的氧化角鲨烯,在血液循环中输送到机体末端细胞后释放氧,从而增加机体组织对氧的利用能力,促进胆汁分泌,强化肝功能,达到增进食欲,加速消除因缺氧所致的各种疾病的目的,可提高机体免疫、抗紫外线、抗衰老、抗疲劳、抗心脑血管疾病等。

角鲨烯的早期研究与开发主要使用鲨鱼肝油为原料,随着人们对物种保护和生态意识的提高,寻找能替代鲨鱼肝油的、安全且可持续利用的新资源显得越来越重要。可以选择的替代途径包括化学合成、微生物合成和植物提取等。化学合成得到的角鲨为具有一系列顺、反式结构的异构体,微生物合成尚处在探索研究阶段,无论从经济合理性结构单一性,还是人体安全性等角度考虑,植物提取角鲨烯为首选方法。 2、 实验材料与设备

角鲨烯:来自上海亨代劳商贸有限公司进口分装,99 %;

油茶籽来自广西田林县、环江县、东兰县、那坡县、湖南株洲等地; 甲醇:南京化学试剂有限公司,色谱纯;

KQ-200VDB 型三频数控超声清洗器:昆山市超声仪器有限公司; LC-20AT 型岛津高效液相色谱仪:日本岛津公司; 3、 提取详细过程

3.1 高效液相色谱定量分析条件

色谱柱:C18 反相色谱柱(150 mm×4.6 mm,5 μm),进样量 10 μL,检测器:PDA检测器,检测波长 210 nm。流动相:甲醇;洗脱方法,流速 1.0 mL/min,柱温为 40 ℃。在此条件下角鲨烯的保留时间为 5.6 min。

精确称取 103.8 mg 角鲨烯标准样品,加入 25 mL 的正己烷,配成 4.125 g/L 的角鲨烯的正己烷贮备液,取 1 mL 贮备液稀释至 50 mL 分别进样 2 μL、4 μL、6 μL、8 μL、10μL、12 μL、14 μL。在上述色谱条件下分析,得到角鲨烯的进样量与响应的色谱峰面积之间的关系曲线,绘制标准曲线。 3.2油茶果中角鲨烯的超声辅助提取

角鲨烯是一种极性较低的油溶性物质,可溶于正己烷、石油醚、乙醚、丙酮和四氯化碳,不溶于水,为了分离分析油茶中的角鲨烯,应选择极性较小的溶剂进行提取,将油茶籽去壳,油茶仁和油茶籽壳分别粉碎,用正己烷浸提,40 g 油茶仁加入 100 mL 正己烷。超声处理来提高其提取速率,超声频率 100 kHz,超声功率为 200 W,超声时间为 15 min,以上条件超声处理两次,两次超声处理时间相隔 1 h,超声过程中提取液的温度变化不另加控制。然后抽滤,弃掉滤渣,提取液中加入干燥剂干燥 12 h 后,除去干燥剂,将滤液抽滤,旋蒸除去溶剂,得到茶油。取 0.5 g 茶油,加入 1.5 mL 正己烷溶解,进行 HPLC 检测,每个样品平行进样三次,代入标准曲线计算角鲨烯含量。然后分别用石油醚、乙醚、丙酮和四氯化碳按照上述操作完成。比较哪种溶剂提取所得角鲨烯的含量高低。

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