3.735 g 1.3 g
加入适量的ddH2O充分溶解,定容至500ml,0.22µm滤膜过滤除菌,4℃
8.1 原代培养
(1) 断颈处死小鼠,碘酒消毒并解剖。
(2) 肉眼观察小鼠观察各个脏器,看到转移灶后切下转移瘤,若肺、肝上无肉眼
可见的转移灶,则取部分肺、肝组织培养。
(3) 利用手术刀尽量将组织切碎,用培养基悬浮碎块至离心管中,1200 rpm离心
5 min。
(4) 弃上清,加入10 ml 红细胞裂解液,重悬细胞,裂解红细胞10 min。 (5) 1200 rpm离心5 min,用含双抗的PBS 洗 2 次。
(6) 培养基重悬沉淀后将其转移至10 cm培养皿中,置37℃ 5% CO2培养箱中培
养。
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