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现代生化仪器分析试题及答案

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现代⽣化仪器分析试题及答案

⼀、选择题

1. 在⽓-液⾊谱分析中,当两组分的保留值很接近,且峰很窄,但只能部分分离,其原因是( D )A. 柱效能太低B. 容量因⼦太⼤C. 柱⼦太长D. 固定相选择性不好

2. 在GC和LC中,影响柱的选择性不同的因素是(A)A. 固定相的种类B. 柱温

C. 流动相的种类D. 分配⽐

3. 适合于植物中挥发油成分分析的⽅法是(D )A. 原⼦吸收光谱B. 原⼦发射光谱C. 离⼦交换⾊谱D. ⽓相⾊谱

4. 原⼦发射光谱的产⽣是由(B)A. 原⼦次外层电⼦在不同能态间的跃迁B. 原⼦外层电⼦在不同能态间的跃C. 原⼦外层电⼦的振动和转动D. 原⼦核的振动

5. 在AES分析中,把⼀些激发电位低、跃迁⼏率⼤的谱线称为(B)A. 共振线B. 灵敏线C. 最后线D. 次灵敏线

6. 为了同时测定废⽔中ppm级的Fe、Mn、Al、Ni、Co、Cr,最好应采⽤的分析⽅法为(A)A. ICP-AESB. AAS

C. 原⼦荧光光谱(AFS)D. 紫外可见吸收光谱(UV-VIS)

7. 某物质能吸收红外光波,产⽣红外吸收光谱图,那么其分⼦结构中必定(C)A. 含有不饱和键B. 含有共轭体系

C. 发⽣偶极矩的净变化D. 具有对称性

8. C)光谱仪A. AESB. AASC. UV-VISD. IR

9. ⼀般⽓相⾊谱法适⽤于(C)A. 任何⽓体的测定

B. 任何有机和⽆机化合物的分离测定

C. ⽆腐蚀性⽓体与在⽓化温度下可以⽓化的液体的分离与测定D. ⽆腐蚀性⽓体与易挥发的液体和固体的分离与测定10. 吸光度读数在(B)范围内,测量较准确A. 0~1B. ~C. 0~D. ~

11. 分光光度计产⽣单⾊光的元件是(A )A. 光栅+狭缝B. 光栅C. 狭缝D. 棱镜

12. 分光光度计测量吸光度的元件是(B )A. 棱镜B. 光电管C. 钨灯D. ⽐⾊⽫

13. ⽤分光光度法测铁所⽤的⽐⾊⽫的材料为(D)A. ⽯英B. 塑料C. 硬质塑料

D. 玻璃

14. ⽤邻⼆氮杂菲测铁时所⽤的波长属于(B)A. 紫外光B. 可见光C. 紫外-可见光D. 红外光

15. 摩尔吸光系数与吸光系数的转换关系(B)A. a=M·εB. ε=M·aC. a=M/εD. A=M·ε

16. ⼀般分析仪器应预热(B)A. 5分钟B. 10~20分钟C. 1⼩时D. 不需预热

17. 若配制浓度为20µg/mL的铁⼯作液,应(A)

A. 准确移取200µg/mL的Fe3+贮备液10mL于100mL容量瓶中,⽤纯⽔稀⾄刻度B. 准确移取100µg/mL的Fe3+贮备液10mL于100mL容量瓶中,⽤纯⽔稀⾄刻度C. 准确移取200µg/mL的Fe3+贮备液20mL于100mL容量瓶中,⽤纯⽔稀⾄刻度D. 准确移取200µg/mL的Fe3+贮备液5mL于100mL容量瓶中,⽤纯⽔稀⾄刻度18. 测铁⼯作曲线时,要使⼯作曲线通过原点,参⽐溶液应选(A)A. 试剂空⽩B. 纯⽔C. 溶剂D. ⽔样

19. 测量⼀组⼯作溶液并绘制标准曲线,要使标准曲线通过坐标原点,应该(D)A. 以纯⽔作参⽐,吸光度扣除试剂空⽩B. 以纯⽔作参⽐,吸光度扣除缸差C. 以试剂空⽩作参⽐

D. 以试剂空⽩作参⽐,吸光度扣除缸差

20. 下述情况所引起的误差中,属于系统误差的是(C)A. 没有⽤参⽐液进⾏调零调满B. ⽐⾊⽫外壁透光⾯上有指印C. 缸差

D. ⽐⾊⽫中的溶液太少

21. 邻⼆氮杂菲分光光度法测铁实验的显⾊过程中,按先后次序依次加⼊(B)A. 邻⼆氮杂菲、NaAc、盐酸羟胺B. 盐酸羟胺、NaAc、邻⼆氮杂菲C. 盐酸羟胺、邻⼆氮杂菲、NaAcD. NaAc、盐酸羟胺、邻⼆氮杂菲

22. 下列⽅法中,那个不是⽓相⾊谱定量分析⽅法(D)A. 峰⾯积测量B. 峰⾼测量C. 标准曲线法D. 相对保留值测量

23. ⽓相⾊谱仪分离效率的好坏主要取决于何种部件(B)A. 进样系统B. 分离柱C. 热导池D. 检测系统

24. 原⼦吸收光谱分析仪的光源是(D)A. 氢灯B. 氘灯C. 钨灯D. 空⼼阴极灯

25. 下列哪种⽅法不是原⼦吸收光谱分析法的定量⽅法(B)A. 浓度直读B. 保留时间C. ⼯作曲线法D. 标准加⼊法

26. 准确度和精密度的正确关系是(B)A. 准确度不⾼,精密度⼀定不会⾼B. 准确度⾼,要求精密度也⾼C. 精密度⾼,准确度⼀定⾼D. 两者没有关系

27. 下列情况所引起的误差中,不属于系统误差的是(A)A. 移液管转移溶液后残留量稍有不同B. 称量时使⽤的砝码锈蚀C. 天平的两臂不等长

D. 试剂⾥含有微量的被测组分

28. 若试剂中含有微量被测组分,对测定结果将产⽣(A)A. 过失误差B. 系统误差C. 仪器误差D. 偶然误差

29. 滴定终点与化学计量点不⼀致,会产⽣(A)A. 系统误差B. 试剂误差C. 仪器误差D. 偶然误差

30. ⽐⾊⽫中溶液的⾼度应为缸的(B)A. 1/3B. 2/3C. ⽆要求D. 装满

31. 重量法中,⽤三⾓漏⽃过滤晶形沉淀时,溶液应控制在(D)A. 漏⽃的1/3⾼度B. 漏⽃的2/3⾼度C. 滤纸的1/3⾼度D. 滤纸的2/3⾼度

32. ⽤分光光度法测⽔中铁的含量时,所⽤的显⾊剂是(B)A. 醋酸钠B. 氮杂菲C. 盐酸羟胺D. 刚果红试纸

33. ⽤分光光度法测⽔中铁含量时,绘制⼯作曲线的步骤是(D)A. ⽤200ppb溶液在510nm处,每5min测⼀次吸光度

B. ⽤200ppb溶液在510nm处,加⼊不等量显⾊剂分别测吸光度C. ⽤200ppb溶液在光路中,分别测不同波长下吸光度D. ⽤100~500ppb系列溶液在510nm处,分别测吸光度34. 原⼦吸收光谱分析中,⼄炔是(C)A. 燃⽓-助燃⽓B. 载⽓C. 燃⽓

D. 助燃⽓

35. 原⼦吸收光谱测铜的步骤是(A)

A. 开机预热-设置分析程序-开助燃⽓、燃⽓-点⽕-进样-读数B. 开机预热-开助燃⽓、燃⽓-设置分析程序-点⽕-进样-读数C. 开机预热-进样-设置分析程序-开助燃⽓、燃⽓-点⽕-读数D. 开机预热-进样-开助燃⽓、燃⽓-设置分析程序-点⽕-读数36. 原⼦吸收光谱光源发出的是(A)A. 单⾊光B. 复合光C. ⽩光D. 可见光

37. 分光光度法测铁实验中,绘制⼯作曲线标准系列⾄少要⼏个点(D)A. 2个B. 3个C. 4个D. 5个

38. 分光光度法测铁中,标准曲线的纵坐标是(A)A. 吸光度AB. 透光度T%C. 浓度CD. 浓度mg/L

39. 在液相⾊谱法中,按分离原理分类,液固⾊谱法属于(D )A. 分配⾊谱法B. 排阻⾊谱法C. 离⼦交换⾊谱法D. 吸附⾊谱法

40. 在⾼效液相⾊谱流程中,试样混合物在(C )中被分离A. 检测器B. 记录器C. ⾊谱柱D. 进样器

41. 在液相⾊谱中,为了改变⾊谱柱的选择性,可以进⾏如下哪些操作(C)A. 改变流动相的种类或柱⼦B. 改变固定相的种类或柱长

C. 改变固定相的种类和流动相的种类

D. 改变填料的粒度和柱长

42. 在液相⾊谱中,某组分的保留值⼤⼩实际反映了哪些部分的分⼦间作⽤⼒(C)A. 组分与流动相B. 组分与固定相

C. 组分与流动相和固定相D. 组分与组分

43. 在液相⾊谱中,不会显着影响分离效果的是(B )A. 改变固定相种类B. 改变流动相流速C. 改变流动相配⽐D. 改变流动相种类

44. 不是⾼液相⾊谱仪中的检测器是(B)A. 紫外吸收检测器B. 红外检测器C. 差⽰折光检测D. 电导检测器

45. 在⾼效液相⾊谱仪中保证流动相以稳定的速度流过⾊谱柱的部件是(B)A. 贮液器B. 输液泵C. 检测器D. 温控装置

46. ⾼效液相⾊谱、原⼦吸收分析⽤标准溶液的配制⼀般使⽤(A)⽔A. 国标规定的⼀级、⼆级去离⼦⽔B. 国标规定的三级⽔C. 不含有机物的蒸馏⽔D. ⽆铅(⽆重⾦属)⽔

47. ⾼效液相⾊谱仪与普通紫外-可见分光光度计完全不同的部件是(A)A. 流通池B. 光源C. 分光系统D. 检测系统

48. 符合吸收定律的溶液稀释时,其最⼤吸收峰波长位置(D)A. 向长波移动B. 向短波移动C. 不移动

D. 不移动,吸收峰值降低

49. 光学分析法中,使⽤到电磁波谱,其中可见光的波长范围为(B)A. 10~400nm;B. 400~750nm;C. ~2.5mm;D. ~100cm

50. 棱镜或光栅可作为(C)A. 滤光元件B. 聚焦元件C. 分光元件D. 感光元件.

51. 红外光谱法中的红外吸收带的波长位置与吸收谱带的强度,可以⽤来(A)A. 鉴定未知物的结构组成或确定其化学基团及进⾏定量分析与纯度鉴定;B. 确定配位数;C. 研究化学位移;D. 研究溶剂效应.

52. 某种化合物,其红外光谱上3000-2800cm-1,1460 cm-1,1375 cm-1和720 cm-1等处有主要吸收带,该化合物可能是(A)A. 烷烃B. 烯烃C. 炔烃D. 芳烃E. 羟基化合物

53. 电磁辐射的微粒性表现在哪种性质上(B)A. 能量B. 频率C. 波长D. 波数

. 测定⼤⽓中的微量有机化合物(M⼤于400)⾸选的仪器分析⽅法是(A)A. GCB. ISEC. AASD. UV

55. 测定试样中的微量⾦属元素⾸选的仪器分析⽅法是(C)A. GCB. ISE

C. AASD. UV

56. 直接测定鱼肝油中的维⽣素A⾸选的仪器分析⽅法是(D)A. GCB. ISEC. AASD. UV

57. 近紫外区的波长是(B)A. 5~140pmB. 200~400nmC. ~50umD. ~100mm

58. 原⼦吸收分光光度计不需要的部件是(A)A. ⽐⾊⽫B. 光栅C. 光电倍增管D. 光源

59. 测定张家界树⽊叶⽚中的微量⾦属元素,⾸选的仪器分析⽅法是(C)A. GCB. ISEC. AASD. UV

60. 下列分析⽅法中,可以⽤来分离有机混合物的是(B)A. 原⼦吸收光谱法B. ⽓相⾊谱法C. 紫外吸收光谱法D. 电位分析法

61. ⼈眼能感觉到的光称为可见光,其波长范围是(C)A. 200—780nmB. 200—400nmC. 400—780nmD. 200—600nm

62. 在光度测定中,使⽤参⽐溶液的作⽤是(C)A. 调节仪器透光度的零点B. 调节⼊射光的光强度

C. 消除溶剂和试剂等⾮测定物质对⼊射光吸收的影响D. 吸收⼊射光中测定所不需要的光波63. 摩尔吸收系数k的物理意义是(C)A. 1mol有⾊物质的吸光度B. 某有⾊物质溶液的吸光度C. 某有⾊物质在1cm光程时的吸光度D. 2 某有⾊物质在1cm光程时的吸光度

. 紫外光度计的种类和型号繁多,但其基本组成的部件中没有(C)A. 光源B. 吸收池C. ⼄炔钢瓶D. 检测器

65. 原⼦吸收分析中光源的作⽤是(C)A. 提供试样蒸发和激发所需要的能量B. 产⽣紫外光

C. 发射待测元素的特征谱线D. 产⽣具有⾜够浓度的散射光

66. 原⼦吸收分析中,吸光度最佳的测量范围是(A)A. 0.1~B. ~ 0.05C. ~D. ⼤于

67. 在原⼦吸收分光光度计中所⽤的检测器是(C)A. 吸光电池B. 光敏电池C. 光电管倍增管D. 光电管

68. ⽓液⾊谱系统中,被分离组分的k值越⼤,则其保留值(A)A. 越⼤B. 越⼩C. 不受影响D. 与载⽓流量成反⽐

69. ⽓液⾊谱系统中,被分离组分与固定液分⼦的类型越相似,它们之间(C)A. 作⽤⼒越⼩,保留值越⼩B. 作⽤⼒越⼩,保留值越⼤

C. 作⽤⼒越⼤,保留值越⼤D. 作⽤⼒越⼤,保留值越⼩70. 固定相⽼化的⽬的是(C)A. 除去表⾯吸附的⽔分B. 除去固定相中的粉状态物质

C. 除去固定相中残余的溶剂和其它挥发性物质D. 提⾼分离效能⼆、填空题

1. 琼脂糖电泳⽤的缓冲液有TAE、TBE、TPE。

2. 折射率是指光线在电⼦相对于原⼦核的运动速度与在原⼦在平衡位置的振动速度的⽐值。3. 核酸电泳的染⾊剂是EB。

4. PCR中应注意的事项有防⽌污染和设⽴对照。

5. 在有机化合物中,常常因取代基的变更或溶剂的改变,使其吸收带的最⼤吸收波长发⽣移动,向长波⽅向移动称为红移,向短波⽅向移动称为蓝移。

6. 在朗伯—⽐尔定律I/I o= 10-abc中,I o是⼊射光的强度,I是透射光的强度,a是吸光系数,b是光通过透明物的距离,即吸收池的厚度,c是被测物的浓度,则透射⽐T = I/I o,百分透过率T% = I/I o×100%_,吸光度A与透射⽐T的关系为-logT_。7. PCR的基本原理是DNA体外的快速扩增。

8. 对于紫外及可见分光光度计,在可见光区可以⽤玻璃吸收池,⽽紫外光区则⽤⽯英吸收池进⾏测量。

9. 红外光谱是由于分⼦振动能级的跃迁⽽产⽣,当⽤红外光照射分⼦时,要使分⼦产⽣红外吸收,则要满⾜两个条件:(1)辐射光⼦具有的能量与发⽣振动跃迁所需的跃迁能量相等,(2)辐射与物质之间有耦合作⽤。10. 把⽆⾊的待测物质转变成为有⾊物质所发⽣的化学反应称为显⾊反应所⽤试剂为显⾊剂。

11. 保留值表⽰试样中各组分在⾊谱柱中的滞留时间。12. ⽕焰原⼦吸收常⽤⼄炔作燃⽓,⽤空⽓或笑⽓作助燃⽓。

13. ⽓相⾊谱仪⼀般由五部分组成,它们是⽓路系统、进样系统、分离系统、检测系统、记录系统.。

14. 在AAS法中,使试样原⼦化的⽅法有⽕焰原⼦化、⽯墨炉原⼦化法,这两种⽅法的主要区别在于:⽕焰原⼦化靠⽕焰加热、⽯墨炉原⼦化靠电加热。

15. ICP的中⽂名称为电感耦合等离⼦体。16. ⽓相⾊谱法的英⽂缩写为_ GC。17. 原⼦吸收法的英⽂缩写为_ AAS。

18. 原⼦吸收光谱法中采⽤的光源是锐线光源,它的作⽤是发射待测元素的特征谱线.。19. 你认为在⽓相⾊谱分析中,两混合组分R=才算达到完全分离。

20. 实验室常⽤的⽣物样品的破碎⽅法有机械法、物理法和化学及⽣物化学法21. ⽣物样品有植物样品、动物样品和各种微⽣物样品三种类型。22. 旋转浓缩仪的组成有收集瓶、电机、浓缩瓶23. 分光光度计有单光束、双光束和双波长三种类型。

24. 蛋⽩质和核酸都具有很强的紫外吸收,通常情况下⼀般蛋⽩质在紫外区的最⼤峰在280nm左右,核酸在260nm左右。

25. 滴定分析可分为四类:酸碱滴定、配位滴定、氧化还原滴定、沉淀滴定三、名词解释

1. 基线:没有组分流出,仅有流动相通过检测器时,检测器产⽣的响应值;稳定的基线是⼀条直线,若基线下斜或上斜,称为漂移,基线的上下波动,称为噪⾳。

2. 分析线:元素发射的特征谱线中⽤来进⾏定性或定量分析的特征谱线。

3. 共振线:在原⼦谱线中,凡是由基态与激发态之间的跃迁所产⽣的原⼦光谱线。

4. 最后线:如果把含有某种元素的溶液稀释,原⼦光谱线的数⽬就不断减少,当元素含量少到最低限度时,仍能坚持到最后出现的谱线,称为最后线或是灵敏线.

5. 液-固吸附⾊谱:流动相为液体,固定相为固体吸附剂,根据物质吸附作⽤的不同来分离物质的⾊谱6. 正相HPLC(normal phase HPLC):是由极性固定相和⾮极性(或弱极性)流动相所组成的HPLC体系7. 基态:通常情况下,物质的原⼦处于能量最低的基态(ground state)。8. 激发:原⼦由基态跃迁到激发态的过程叫做激发。

9. 激发态:原⼦的基态是可以被破坏的,当获取⾜够的能量后,原⼦的⼀个或者⼏个电⼦就可能跃迁到较⾼的能级上去,原⼦便成为激发态。

10. 光学分析法:根据物质发射的电磁辐射或电磁辐射与物质相互作⽤建⽴起来的⼀类分析⽅法,称为光学分析法11. 峰⾼(peak height;h):组分在柱后出现浓度极⼤时的检测信号,即⾊谱峰顶⾄基线的距离。12. 峰⾯积(peak area;A):⾊谱曲线与基线间包围的⾯积13. 滴定:就是指将标准溶液通过滴定管滴加到待测溶液中的操作过程

14. 终点误差:滴定分析法允许的由滴定终点和化学计量点不⼀致所引起的误差称为终点误差四、问答题(每题4分,共20分,答在空⽩处)1. 举例说明⽣⾊团和助⾊团,并解释红移和紫移。

答:⼴义地说,⽣⾊团是指分⼦中可以吸收光⼦⽽产⽣电⼦跃迁的原⼦基团;严格地说,那些不饱和吸收中⼼才是真正的⽣⾊团,如苯环等。

助⾊团:带有⾮键电⼦对的基团(如-OH、-OR、-NHR、-SH、-Cl、-Br、-I等),它们本⾝不能吸收⼤于200 nm的光,但是当它们与⽣⾊团相连时,会使其吸收带的最⼤吸收波长λmax发⽣移动,并增加其吸收强度。在有机化合物中,常常因取代基的变更或溶剂的改变,使其吸收带的最⼤吸收波长λmax发⽣移动向长波⽅向移动称为红移向短波⽅向移动称为紫移(蓝移)2. 原⼦吸收光谱法的特点有哪些

1)灵敏度⾼(⽕焰法:1 ng/ml,⽯墨炉pg)2)准确度好(⽕焰法:RSD <1%,⽯墨炉3-5%)

3)选择性⾼(可测元素达70个,相互⼲扰很⼩;⼀般不需要分离共存元素)4)分析速度快5)应⽤范围⼴

缺点:不能多元素同时分析,分析不同元素必须使⽤不同元素灯3. 为什么作为⾼效液相⾊谱仪的流动相在使⽤前必须过滤、脱⽓

答:⾼效液相⾊谱仪所⽤溶剂在放⼊贮液罐之前必须经过µm滤膜过滤,除去溶剂中的机械杂质,以防输液管道或进样阀产⽣阻塞现象。所有溶剂在上机使⽤前必须脱⽓;因为⾊谱住是带压⼒操作的,检测器是在常压下⼯作。若流动相中所含有的空⽓不除去,则流动相通过柱⼦时其中的⽓泡受到压⼒⽽压缩,流出柱⼦进⼊检测器时因常压⽽将⽓泡释放出来,造成检测器噪声增⼤,使基

线不稳,仪器不能正常⼯作,这在梯度洗脱时尤其突出。4. 什么是复合光和单⾊光光谱分析中如何获得单⾊光

答:物质发出的包含多种频率成分的光,称取复合光。只包含⼀种频率成分的光叫单⾊光,光谱分析中利⽤⾊散原理来获得单⾊光。

5. 简述⽓相⾊谱仪的分离原理,⽓相⾊谱仪⼀般由哪⼏部分组成及其作⽤

答:⽓相⾊谱仪的分离原理:当混合物随流动相流经⾊谱柱时,与柱中的固定相发⽣作⽤(溶解、吸附等),由于混合物中各组分理化性质和结构上的差异,与固定相发⽣作⽤的⼤⼩、强弱不同,在同⼀推动⼒作⽤下,各组分在固定相中的滞留时间不同,从⽽使混合物中各组分按⼀定顺序从柱中流出。

⽓相⾊谱仪⼀般由⽓路系统、进样系统、分离系统、检测系统和记录与数据处理系统组成。1)路系统的作⽤:为⾊谱分析提供纯净、连续的⽓流。

2)进样系统的作⽤:进样并将分析样品瞬间汽化为蒸⽓⽽被载⽓带⼊⾊谱柱. 3)分离系统的作⽤:使样品分离开。4)检测系统的作⽤:把从⾊谱柱流出的各个组分的浓度(或质量)信号转换为电信号。

5)记录与数据处理系统的作⽤:把由检测器检测的信号经放⼤器放⼤后由记录仪记录和进⾏数据处理。6. 原⼦吸收光谱仪主要由哪⼏部分组成各有何作⽤

答:原⼦吸收光谱仪主要由光源、原⼦化器、分光系统、检测系统四⼤部分组成。1)源的作⽤:发射待测元素的特征谱线。

2)原⼦化器的作⽤:将试样中的待测元素转化为⽓态的能吸收特征光的基态原⼦。3)分光系统的作⽤:把待测元素的分析线与⼲扰线分开,使检测系统只能接收分析线。

4)检测系统的作⽤:把单⾊器分出的光信号转换为电信号,经放⼤器放⼤后以透射⽐或吸光度的形式显⽰出来。7. PCR技术有哪些特点

1)⾼度的特异性:引物的限定,⾼温扩增。

2)⾼度的敏感性:微量样品(单拷贝基因、单个细胞、⼀根头发等),⾼效性(×106)。3)操作简便快速,易于⾃动化、程序化,⽅法稳定。

4)对标本的纯度要求底:纯化或粗制的,新鲜或陈旧的,各种细胞,体液,完整的或降解的DNA。8.⽕焰原⼦吸收分光光度计的原理是什么

利⽤从光源辐射出的特征谱线被⽕焰原⼦化器产⽣的样品蒸⽓中的待测元素基态原⼦所吸收;通过测定特征辐射光被吸收的⼤⼩,来计算出待测元素的含量。

9. 什么是仪器分析它与化学分析⽅法⽐较有什么特点

仪器分析是指采⽤⽐较复杂或特殊的仪器设备,通过测量物质的某些物理或物理化学性质的参数及其变化来获取物质的化学组成、成分含量及化学结构等信息的⼀类⽅法。这些⽅法⼀般都有独⽴的⽅法原理及理论基础。仪器分析的特点(与化学分析⽐较):

1)灵敏度⾼,检出限量可降低。如样品⽤量由化学分析的mL、mg级降低到仪器分析的g、L级,甚⾄更低。适合于微量、痕量和超痕量成分的测定。

2)选择性好。很多的仪器分析⽅法可以通过选择或调整测定的条件,使共存的组分测定时,相互间不产⽣⼲扰。3)操作简便,分析速度快,容易实现⾃动化。

4)相对误差较⼤。化学分析⼀般可⽤于常量和⾼含量成分分析,准确度较⾼,误差⼩于千分之⼏。多数仪器分析相对误差较⼤,⼀般为5%,不适⽤于常量和⾼含量成分分析。5)需要价格⽐较昂贵的专⽤仪器。

10. 琼脂糖凝胶电泳的原理是什么

1)带电颗粒在电场中将受到电场⼒的作⽤⽽发⽣泳动。

2)电泳缓冲液中充满了离⼦,因⽽导电,DNA分⼦在PH 7~8时带负电,因此在电场作⽤下向正极泳动。3)琼脂糖凝胶中含有密集细⼩的孔洞,线状的DNA分⼦可以通过。

4)DNA分⼦越⼤,阻⼒越⼤,泳动越慢,经过⼀定时间泳动后将按⼤⼩排列成⼀组“条带”。五、论述题:

简述⼀个PCR反应需要哪些试剂与试样及常规PCR的反应条件答:1、反应需要的试剂:

模板核酸(template如:⼈基因组DNA µg)扩增引物(primer⼀对,各~1 µmol/L)TaqDNA聚合酶(U)

dNTP(四种:各20~200 µmol/L)

标准的缓冲液:10X buffer(KCl、Tris-HCl、MgCl2、BSA或DDT)⽆菌双蒸⽔或三蒸⽔

⽯蜡油或矿物油:30~50 µl(封闭、防⽌⾼温时液体的挥发)2、反应条件

预变性:94 ℃300 s(⾼温起动:充分变性,防⽌⾮特异性扩增)变性:90 ℃-95 ℃,30 s -60 s退⽕:55-65 ℃30 s-45 s延伸:70-72℃30-60 s (<2kb)

25-35次cycle后,延长延伸(72 ℃,10 min;充分延伸),冷却⾄4℃或加⼊EDTA⾄10 mmol/L以终⽌反应。

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