山东畜牧兽医 ２０１３年第３４卷 高致病性猪蓝耳病的组织病理学研究 张秀亮① 李丽②（①山东省潍坊市寒亭区畜牧兽医局２６１１００②山东省莱阳市沐浴店兽医站） 摘要采集具有典型高致病性猪蓝耳病病变特征的心、肝、脾、肺、肾、小肠和淋巴结等制作成石蜡切片，经Ｈ．Ｅ 染色后观察，显示。肾小管上皮细胞变性、坏死、脱落减少、肾脏局部出血、肾小球见有萎缩；肺的病例变化差异较大， 可见到肺气肿、出血、肺泡壁增厚、单核淋巴细胞等炎性细胞渗出和肺泡内充满纤维素样蛋白渗出物等；肝脏见液化性 坏死灶、肝小叶间结缔组织增生；脾脏的动脉鞘部位淋巴细胞减少，噬酸性粒细胞浸润，脾小体周围出血；淋巴结中见 有合胞体等。 关键词 高致病性猪蓝耳病组织病理学研究 中图分类号：￥８５２．１６＋６ 文献标识码：Ａ 文章编号：１００７—１７３３（２０１３）０１—００１６．０２ 马林清洗出来，防止福尔马林残留于组织中影响切片。 ２００１年７月开始，在浙江省和周边地区大面积爆发了 一种主要表现为病猪持续高温、皮肤发红、食欲废绝、 ２．３ 脱水采用逐级提高酒精浓度进行脱水。脱水在室 呼吸综合症为主要特征的猪病，有极高的发病率和死亡 率。给养殖业带来了极大的破坏。２００６年南方多省均有 发生，目前该疾病已成为影响养猪业发展的主要疾病之 一温下进行，顺序为３０％酒精（１ｈ）－－．５０％酒精（１ｈ）－－，７０％酒精 ｆ２ｈ）－＇＊８０％酒精（２ｈ）－－＊９０％酒精（２ｈ）－＊９５％酒精过夜一１ ００％ 酒精Ｉ（１．５ｈ）－ｑ００％酒精ＩＩ（１．５ｈ）。 ２．４透明 采用二甲苯在室温下进行透明组织块。过程 是二甲苯酒精（１５ｍｉｎ）一二甲苯Ｉ（１０ｍｉｎ）－－－，二甲苯 ＩＩ（１５ｍｉｎ），使组织达到透明。 ２．５浸蜡 此步骤是在温箱内进行，温度调至５８＂Ｃ左 右，使它恰好熔化石蜡。浸蜡过程为：二甲苯石蜡（１：１） （１５ｍｉｎ）一石蜡Ｉ（３０ｍｉｎ）－－－）石蜡ＩＩ（１ｈ．２ｈ）。 ２．６ 包埋、修块 包埋盒用光亮且厚的纸折叠成纸盒井 进行编号。采用的石蜡熔点为５４－－５６℃。包埋方法是把预 ，给养殖业带来了极大地损失。余旭平等ｆｌ】对浙江省几 个不同规模、不同发病情况的猪场的空气细菌含量进行 了测试，结果发现该病的严重程度与猪舍内空气的细菌 含量存在明显的正相关性。朱军莉等【 】设计了３条引物进 行ＰＣＶｏ１和ＰＣＶ－２的检测，结果表明，ＰＣＶ－２的阳性率为 ３６．１７％，ＰＣＶ－Ｉ单独感染阳性率为３４．０４％。张秀亮等【３】针 对猪链球菌的谷氨酸脱氢酶基因设计了分型ＰＣＲ的引物， 对常见血清型的猪链球菌进行鉴定。袁佳杰等【４Ｊ从忠病猪 中分离到了多种细菌。农业部于２００７年５月研制成功疫苗 并广泛应用，并取得了不错的免疫效果。本试验采集具 有典型高致病性猪蓝耳病病变特征的心、肝、脾、肺、 肾、小肠和淋巴结等制作成石蜡切片，观察其病理变化 特点。 热的包埋盒放平，将温箱中熔化好的石蜡倒进包埋盒 内，迅速用预热的镊子轻轻将组织放人包埋盒内，将要 切的面朝下摆正位置，等到石蜡表面凝同之后，将包埋 盒轻轻放人冷水内，经３０ｒａｉｎ后耿出，剥开包埋盒，取出 蜡块，把组织蜡块的上下两端修平 １材料与试剂 １．１ 病料 选取具有高致病性猪蓝耳病典型症状的病 猪，采集心、肝、牌、肺、肾、小肠和淋巴结等组织， 取材部位为病灶与正常组织的结合部位。 ２．７切片、贴片 将烧热的解剖刀平烙蜡块底面，迅速 粘贴在一‘个小方形的术块上，然后将其固定在切片机 上。装上锋利的切片刀（刀的斜度为ｌ５。），调整蜡块切面 使之与刀口平行。把厚度调节器调在５ｕｍ左右。左手平持 毛笔，右手旋动切片机把。切片带出来之后，用毛笔轻 １．２主要试剂 １０％甲醛溶液、５０％酒精、７０％酒精、 ８０％酒精、９０％酒精、９５ｔ冶酒精、１００％酒精、酒精二甲 轻托起，切片切取…定长度之后，用毛笔或镊子轻轻取 苯、二甲苯石蜡、石蜡Ｉ、石蜡ＩＩ、苏木精染色液、伊红 染色液。 出至４Ｏ～４５℃的恒温水箱中展片。等切片展开后ｆｌｊ清沽的 载玻片从水中捞出，拨正位置；把贴好切片的载玻片放 在染色架上竖立排水，然后烤片。 ２试验方法 ２．１ 组织固定 小块病料采集后迅速放入１０％甲醇溶液 中进行固定，固定时间在２４ｈ以上。 ２．２水洗 固定好的组织块用流水冲洗１２～２４ｈ，把福尔 ２．８烤片 把贴有切片的载玻片直立放在烤片架上，送 入４５℃左右的温箱巾烘烤２－￣４ｈ，直到蜡片成半透明状。 ２．９染色采用苏木精（Ｈｅｍａｔｏｘｙｌｉｎ）￣［１伊红（曙红，Ｅｏｓｉｎ） ｌ６