・论 著・ 中国医药导报２０１６年１１月第ｌ３卷第３３期 膈下逐瘀汤对非酒精性脂肪肝大鼠脂质代谢 和血小板活化的影响 朱晓松 方涛 陈文慧 谭丽萍 石安华 云南中医学院基础医学院．云南昆明６５０５００ 【摘要】目的研究膈下逐瘀汤对非酒精性脂肪肝（ＮＡＦＬＤ）大鼠的治疗作用及机制。方法雄性ｓＤ大鼠按完全随 机分组原则分为空白组、模型组和药物干预组。空白组基础饲料喂养，其余高脂饲料喂养，持续喂养１２周。８周末 药物干预组开始给药，动态观察各组大鼠肝组织病理变化，检测各组大鼠肝指数、血清总胆固醇（ＴＣ）、三酰甘油 （ＴＧ）、丙氨酸氨基转移酶（ＡＬＴ），肝组织ＴＧ和Ｔｃ含量，以及血小板聚集率和可溶性Ｐ一选择素（ＣＤ６２ｐ）的含量。结 果８周末模型组ＨＥ染色的肝组织病理切片观察到脂肪变性的肝细胞占肝小叶的比例＞１／３，证明造模成功，１２周末 模型组大鼠各项检测指标与空白组比较含量均有不同程度升高，差异有统计学意义（Ｐ＜０．０５或Ｐ＜０．０１）；与模型 组比较，药物干预组大鼠各项检测指标含量均有不同程度降低，差异有统计学意义（Ｐ＜０．０５或Ｐ＜０．Ｏ１）。结论膈 下逐瘀汤对于改善ＮＡＦＬＤ大鼠肝细胞脂质沉积有着显著的疗效，作用机制可能与调节脂质代谢、减少ＣＤ６２ｐ的 表达、降低血小板聚集率有关。 【关键词】膈下逐瘀汤；非酒精性脂肪肝；血小板；可溶性Ｐ一选择素 【中图分类号】Ｒ２８５．５ 【文献标识码】Ａ 【文章编号】１６７３—７２１０（２０１６）１ １（ｃ）一０００４—０４ Ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ Ｇｅｘｉａ Ｚｈｕｙｕ Ｄｅｃｏｃｔｉｏｎ ｏｎ ｌｉｐｉｄ ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ ａｎｄ ｐｌａｔｅｌｅｔ ａｃｔｉｖａ－ ｔｉｏｎ ｉｎ ｒａｔｓ ｗｉｔｈ ｎ０ｎ—ａｌｃ０ｈ０ｌｉｃ ｆａｔｔｙ ｌｉｖｅｒ ｄｉｓｅａｓｅ ＺＨＵ Ｘｉａｏｓｏｎｇ ＦＡＮＧ Ｔａｏ ＣＨＥＮ Ｗｅｎｈｕｉ ＴＡＮ Ｌｉｐｉｎｇ ＳＨＩＡｎｈｕａ Ｂａｓｉｃ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｃｏｌｌｅｇｅ，Ｙｕｎｎａｎ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ Ｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，Ｙｕｎｎａｎ Ｐｒｏｖｉｎｃｅ，Ｋｕｎｍｉｎｇ ６５０５００，Ｃｈｉｎａ ［Ａｂｓｔｒａｃｔ］Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ Ｔｏ ｓｔｕｄｙ ｔｈｅ ｅｆｆｅｃｔｓ ａｎｄ ｍｅｃｈａｎｉｓｍ ｏｆ Ｇｅｘｉａ Ｚｈｕｙｕ Ｄｅｃｏｃｔｉｏｎ ｉｎ ｒａｔｓ ｗｉｔｈ ｎｏｎ－ａｌｃｏｈｏｌｉｃ ｆａｔｔｙ ｌｉｖｅｒ ｄｉｓｅａｓｅ（ＮＡＦＬＤ）．Ｍｅｔｈｏｄｓ Ｍａｌｅ Ｓｐｒａｇｕｅ Ｄａｗｌｅｙ（ＳＤ）ｒａｔｓ ｗｅｒｅ ｒａｎｄｏｍｉｚｅｄ ｃｏｍｐｌｅｔｅｌｙ ｉｎｔｏ ｔｈｒｅｅ ｇｒｏｕｐｓ：ｂｌａｎｋ ｇｒｏｕｐ，ｍｏｄｅｌ ｇｒｏｕｐ ａｎｄ ｄｒｕｇ ｇｒｏｕｐ．Ｂｌａｎｋ ｇｒｏｕｐ ｗａｓ ｆｅｄ ｗｉｔｈ ｃｏｍｍｏｎ ｄｉｅｔ，ｔｈｅ ｏｔｈｅｒｓ ｗｅｒｅ ｆｅｄ ｗｉｔｈ ｈｉｇｈ—ｆａｔ ｄｉｅｔ ｆｏｒ １２ ｗｅｅｋｓ．Ａｔ ｔｈｅ ８ｔｈ ｗｅｅｋｅｎｄ，ｔｈｅ ｄｒｕｇ ｇｒｏｕｐ ｗａｓ ｇｉｖｅｎ Ｇｅｘｉａ Ｚｈｕｙｕ Ｄｅｃｏｃｔｉｏｎ．Ｔｈｅ ｐａｔｈｏｌｏｇｉｃａｌ ｃｈａｎｇｅｓ ｏｆ ｈｅｐａｔｉｃ ｔｉｓｓｕｅ ｉｎ ｒａｔｓ ｏｆ ａｌｌ ｇｒｏｕｐｓ ｗｅｒｅ ｏｂｓｅｒｖｅｄ ｄｙｎａｍｉｃａｌｌｙ．Ｔｈｅ ｌｉｖｅｒ ｉｎｄｅｘ，ｔｏｔａｌ ｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌ（ＴＣ），ｔｒｉｇｌｙｃｅｒｉｄｅ（ＴＧ），ａｌａｎｉｎｅ ａｍｉｎｏｔｒａｎｓｆｅｒａｓｅ（ＡＩ ｉｎ ｓｅｒｕｍ，ＴＣ，ＴＧ ｉｎ ｌｉｖｅｒ ｓｐｅｃｉｍｅｎｓ，ａｎｄ ｐｌａｔｅｌｅｔ ａｇｇｒｅｇａｔｉｏｎ，ｓｏｌｕｂｌｅ Ｐ—ｓｅｌｅｃｔｉｎ（ＣＤ６２ｐ）ｗｅｒｅ ｍｅａｓｕｒｅｄ．Ｒｅｓｕｌｔｓ Ａｔ ｔｈｅ ｅｎｄ ｏｆ ８ｔｈ ｗｅｅｋｅｎｄ，ｔｈｅ ｐａｔｈｏｌｏｇｉｃａｌ ｓｅｃｔｉｏｎ ｏｆ ｈｅｐａｔｉｃ ｔｉｓｓｕｅ ｂｙ ＨＥ ｓｔａｉｎｉｎｇ ｉｎ ｍｏｄｅｌ ｇｒｏｕｐ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ，ｔｈｅ ｐｒｏｐｏｒｔｉｏｎ ｏｆ ｈｅｐａｔｉｃ ｃｅｌｌｓ ｗｉｔｈ ｆａｔｔｙ ｄｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ ａｃｃｏｕｎｔｅｄ ｆｏｒ ｈｅｐａｔｉｃ ｌｏｂｕｌｅ ｗａｓ ｏｖｅｒ １１３，ｗｈｉｃｈ ｐｒｏｖｅｄ ｔｈａｔ，ｔｈｅ ｍｏｄｅｌ ｗａｓ ｓｕｃｃｅｓｓｆｕ１．Ａｔ ｔｈｅ ｅｎｄ ｏｆ １２ｔｈ ｗｅｅｋｅｎｄ，ａｌｌ ｉｎｄｅｘｅｓ ｏｆ ｍｏｄｅｌ ｇｒｏｕｐ ｗｅｒｅ ｈｉｇｈｅｒ ｔｈａｎ ｔｈｏｓｅ ｉｎ ｂｌａｎｋ ｇｒｏｕｐ，ｔｈｅ ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｓ ｗｅｒｅ ｓｔａｔｉｓｔｉｃａｌｌｙ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ（Ｐ＜０．０５ ｏｒ Ｐ＜０．０１）．Ａｌｌ ｉｎｄｅｘｅｓ ｏｆ ｄｒｕｇ ｇｒｏｕｐ ｗｅｒｅ ｌｏｗ— ｅｒ ｔｈａｎ ｔｈｏｓｅ ｉｎ ｍｏｄｅｌ ｇｒｏｕｐ，ｔｈｅ ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｓ ｗｅｒｅ ｓｔａｔｉｓｔｉｃａｌｌｙ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ（Ｐ＜０．０５ ｏｒ Ｐ＜Ｏ．Ｏ１）．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ Ｇｅｘｉａ Ｚｈｕｙｕ Ｄｅｃｏｃｔｉｏｎ ｃａｎ ｉｍｐｒｏｖｅ ｔｈｅ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ ｏｆ ｌｉｖｅｒ ｆａｔｔｙ ｄｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ ｏｆ ｒａｔｓ ｗｉｔｈ ｆａｔｔｙ ｌｉｖｅｒ ｏｂｖｉｏｕｓｌｙ。Ｔｈｅ ｍｅｃｈａｎｉｓｍ ｍａｙ ｂｅ ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｗｉｔｈ ｔｈｅ ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ ｏｆ ｌｉｐｉｄ ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ，ｒｅｄｕｃｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ＣＤ６２ｐ，ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ ｏｆ ｐｌａｔｅｌｅｔ ａｇｇｒｅｇａｔｉｏｎ． ［Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ］Ｇｅｘｉａ Ｚｈｕｙｕ Ｄｅｃｏｃｔｉｏｎ；Ｎｏｎ——ａｌｃｏｈｏｌｉｃ ａｔｆｔｙ ｌｉｖｅｒ ｄｉｓｅａｓｅ；Ｐｌａｔｅｌｅｔ；Ｓｏｌｕｂｌｅ Ｐ－ｓｅｌｅｃｔｉｎ 非酒精性脂肪肝（ＮＡＦＬＤ）为我国常见的慢性肝 度沉积为主要病理变化的临床综合征 １。现代分子病 病之一。是指除酗酒原因外引起的以肝细胞内脂质过 理学研究认为其发病跟胰岛素抵抗、氧化应激及遗传 【基金项目】国家自然科学基金资助项目（８１１６０４９２）；云南 省应用基础研究计划面上项目（２０１１ＦＢ０７５）。 等因素有关［２１。目前治疗仍以运动、减轻体重为主，尚 无理想药物［３１。中医学研究认为ＮＡＦＬＤ的基本病机是 痰瘀互结，治疗原则以活血化瘀、健脾祛痰为主【４Ｊ。应 用活血化瘀方治疗ＮＡＦＬＤ的作用机制还未研究透 者简介１朱晓松（１９８６一），女，医学硕士，从事中西医结合 基础研究 【通讯作者】石安华（１９７７一），男，医学硕士，副教授，从事中 西医结合基础研究。 褥 彻。本研究通过喂食大鼠高脂饲料．建立早期ＮＡＦＬＤ 大鼠模型，观察膈下逐瘀汤对ＮＡＦＬＤ大鼠模型的作 ＣＨＩＮＡ ＭＥＤＩＣＡＬ ＨＥＲＡＬＤ Ｖｏ１．１３ Ｎｏ．３３ Ｎｏｖｅｍｂｅｒ ２０１６ 中国医药导报２０１６年１１月第ｌ３卷第３３期 ・论 著・ 用．并从血小板活化的角度探索活血化瘀药物膈下逐 个样本比较的秩和检验（Ｋｒｕｓｋａｌ—Ｗａｌｌｉｓ）法及两两比 较的秩和检验（Ｗｉｌｃｏｘｏｎ）法，以Ｐ＜０．０５为差异有统 瘀汤治疗ＮＡＦＬＤ的作用机制。 １材料与方法 １．１材料 计学意义 ２结果 １．１．１实验动物ＳＰＦ级４周龄雄性ＳＤ大鼠１２０只， ２．１一般情况 体重８０～１００ ｇ，昆明医科大学动物中心提供，许可证 号：ｓｃｘＫ（滇）２ｏｌ １－０００４。 空白组大鼠毛发整洁有光泽，行动灵活，饮食饮 水正常，大便正常，体重稳定增长。模型组大鼠毛色暗 】．】．２实验药品膈下逐瘀汤ｆ处方组成：五灵脂、当归、 淡，行动迟缓，８周后食量逐渐减少，大便黏软，部分 川芎、桃仁、丹皮、赤芍、乌药、玄胡索、甘草、香附、红 出现便溏现象。药物干预组毛发趋于空白组，活动较 花、枳壳．比例：９：９：６：９：６：６：６：３：９：３：９：５）。制备成含生药 多，大便较正常。 量１．４４ ｇ／ｍＬ的药液［５１，４℃冰箱密封保存备用。 ２．２肝组织病理学变化 １．１－３仪器试剂Ｓｐｅｃｔｒａ Ｍａｘ ３４０ＰＣ酶标仪（美国分 ＨＥ染色镜下观察（图１，封三）：空白组大鼠肝细 子仪器公司）；ＬＢＹ—ＮＪ血小板聚集仪（北京普利生仪 胞内未发现明显脂肪空泡，肝小叶结构完整，肝索排 器公司）。血清总胆固醇（ＴＣ）、三酰甘油（ＴＧ）、丙氨酸 列整齐：模型组大鼠大量肝细胞内有脂肪空泡，脂肪 氨基转移酶（ＡＬＴ）检测试剂盒（上海荣盛生物药业有 变性的肝细胞数目占肝小叶比例＞２／３，少量肝细胞发 限公司）：可溶性Ｐ一选择素（ＣＤ６２ｐ）检测试剂盒（苏州 生气球样变．并伴有肝细胞点状坏死；药物干预组可 卡尔文生物技术有限公司）。 １．２模型建立及分组给药 见部分肝细胞内有较小的脂肪空泡。脂变细胞数目不 到肝小叶的１／３，无细胞坏死。苏丹Ⅲ染色镜下观察 适应性饲养３ ｄ后编号．按完全随机原则分为３组， （图２，封三）：空白组大鼠肝细胞未见明显红色脂滴， 空白组５０只，模型组５０只，药物干预组２０只。空白 模型组大鼠肝细胞内红色脂滴广泛分布，药物干预组 组喂饲基础饲料。其余组给予自制高脂饲料（基础饲 肝细胞红色脂滴明显减少。 料８８％，猪油１０％，胆固醇２％），自由饮水。于４，６、８周 ２．３肝指数、血脂、肝脂及血清ＡＬＴ的变化 末分别处死空白组和模型组大鼠各ｌ０只，取血和肝 与空白组比较，模型组大鼠肝指数，血清ＴＣ、ＴＧ、 组织样本，动态观察造模情况，发现８周末，脂肪变性 Ａ 和肝组织ＴＣ、ＴＧ含量均升高。差异有统计学意 的肝细胞占肝小叶比例＞１／３，为轻度脂肪肝『６＿７Ｉ，因此 义（Ｐ＜０．０５或Ｐ＜０．０１）；与模型组比较，药物干预组 从８周末药物干预组每天灌胃膈下逐瘀汤［７．２ ｇ／（ｋｇ・ｄ）】， 大鼠肝指数，血清ＴＣ、ＴＧ、ＡＬＴ和肝组织ＴＣ、ＴＧ含量 空白组和模型组灌胃等体积生理盐水，连续给药４周， 均降低，差异有统计学意义（Ｐ＜０．０５或Ｐ＜０．０１）。见 饲料不变，第１Ｏ、ｌ２周分别处死各组大鼠１０只。 １．３样本采集 表１。 ２．４血小板聚集率的变化 实验动物禁食不禁饮１２ ｈ，１０％水合氯醛麻醉， 与空白组比较，模型组大鼠血小板聚集率第４周 腹主动脉取血，分离血清、血浆。取血后，处死大鼠，迅 后升高，差异有统计学意义（Ｐ＜０．０５），第８周后升高 速取肝组织称重，计算肝指数（肝指数＝肝湿重／体重× 更明显，差异有高度统计学意义（Ｐ＜０．０１）；与模型组 １００％）。取肝左叶组织１０％甲醛固定，做病理组织学 比较，药物干预组大鼠血小板聚集率显著降低，差异 检查，肝右叶制备组织匀浆检测肝脂。 有高度统计学意义（Ｐ＜０．０１）。见表２。 １．４观察指标 ２．５血浆ＣＤ６２ｐ含量 ①肝组织病理学检查；②全自动生化仪检测血清 与空白组比较，模型组与药物干预组大鼠血浆 ＴＣ、ＴＧ、ＡＬＴ，肝组织ＴＧ和ＴＣ含量：③按照试剂盒说 ＣＤ６２ｐ含量均显著升高，差异有高度统计学意义（Ｐ＜ 明书用血小板聚集仪检测血小板聚集率；④按照试剂 ０．０１）：与模型组比较，药物干预组大鼠血浆ＣＤ６２ｐ 盒说明书采用酶标仪检测ＣＤ６２ｐ。 １．５统计学方法 含量显著降低，差异有高度统计学意义（Ｐ＜０．０１）。 见表３。 采用ＳＰＳＳ １ ７．０软件进行统计学分析，计量资料 ３讨论 数据以均数±标准差（ ）表示，样本符合正态分布且 本研究采用改良高脂饲料复制ＮＡＦＬＤ大鼠模 方差齐．眭时，多组间计量资料比较采用单因素方差分 型。由于造模时问较长，若使用成年大鼠在 １２周末实 析，两两比较时方差齐用ＬＳＤ检验，方差不齐采用多 验结束时大鼠重量太重不适合实验，因此采用４周龄 ＣＨＩＮＡ ＭＥＤＩＣＡＬ ＨＥＲＡＬＤ Ｖｏ１．１３ Ｎｏ．３３ Ｎｏｖｅｍｂｅｒ ２０１６ ・论 著・ 堕ｍｏｌ／一Ｌ） 中国医药导报２０１６年１１月第１３卷第３３期 表１ 各组大鼠肝指数、血脂、肝脂及血清ＡＬＴ的变化比较ｘ￣ｓ） 组别 只数 １Ｏ ｌ０ 肝指数（％）一Ｔ—Ｃ（ｍｍ—ｏｌ／Ｌ）一４ ０３＋Ｉ ８６ ４．６５￣２．１４ Ｔ Ｇ（ｍ面 】 ２５．４５￣３．０６ ５１．６３￣５ ６５ 一Ｔ—Ｃ（ｍｍ—ｏｌ／Ｌ 堕 ２．３０￣０－３２ ８．８０￣０．５２ ｍｏｌ／Ｌ）一 空Ｆ１组 模型组 １．７２￣０．２３ ２．３０＋＿０．２９ ０．６８￣０３５ １．３６十（Ｊ．２６ ０．３０￣０．０７ ０．８３￣０．１０” 药物ｒ预组 ｌ０ ３．９５￣０．５ｌ ２．０５￣０．３１ １．０１±Ｏ．２７ ３５．４６￣３．２４ ３．７３￣０．２３ ０．３４￣０．０７ 注： ｊ ｝ 组比较， Ｐ＜０．０５， ＜０．０ｌ；与模型组比较， ＜０．０５， Ｐ＜０．Ｏ１；ＴＣ：胆同醇；ＴＧ：三酰甘油；ＡＬＴ：丙氨酸氨基转移酶 的幼鼠作为实验对象。第８周末肝组织切片ＨＥ染色 肪窄泡，为轻度脂肪肝，第１２周末有超过２／３的肝细 膈下逐瘀汤选自王清任《医林改错》，方中当归、 附、乌药、枳壳、元胡行气止痛，是中医活血化瘀的经典 观察到模型组大鼠肝小叶内超过１／３的肝细胞有脂 川芎、赤芍养血活血；桃仁、红花、灵脂破血逐瘀；配香 ９＿１ １发现，含生药量为１．４４ ｇ／ｍＬ 胞内有脂肪空泡，有的空泡融合将细胞核挤到一侧， 方 。课题组前期研究ｌ有的甚至发生气球样变，可见点状坏死灶，为中重度 的药液药效最为显著，因此本研究采用了该浓度的药 脂肪肝，证明ＮＡＦＬＤ模型成立＿６＿７ 】液。１２周末空白组大鼠肝细胞脂肪变性不明显，几乎 表２各组大鼠血小板聚集率的变化比较（％，赶ｓ） 注：与夺白组比较， Ｐ＜０．０５， ＜０．叭；与模型组比较， Ｐ＜０．Ｏｌ；“一”表示无数据 表３各组大鼠血浆可溶性Ｐ一选择素含量的变化比较（ｐｇ／ｍＬ，ｉ ） 沣： 空ｈ组比较，“Ｐ＜Ｏ．叭；与模型组比较，斜Ｐ＜０，Ｏｌ；“一”表示无数据 看不到脂肪空泡：药物干预组大鼠肝细胞变性较模型 气滞血瘀、痰瘀互结［１２－１３】。“血瘀”在ＮＡＦＬＤ的发生发展 组轻微，变性细胞数目较少，表明膈下逐瘀汤可以减 中起到重要的作用＿ ｌ４】。通过对“血瘀证”的研究发现． 血流速度变慢，血栓形成ｌ ｌ５ｌ。 轻模型大鼠肝细胞脂肪变性的程度。由于造模所选择 其本质是血液循环障碍，的动物、方法、造模时问等因素的差异，未能找到本研 长期高脂饮食容易导致血脂升高，血液黏稠度增加． 究ＴＣ、ＴＧ、Ａ坍准确的参考范围，但跟课题组前期研 流动性降低，血小板聚集性增加，血管内皮受损，容易 究 ｌｌ的数据进行比较．数值还是较接近的。本研究还 形成血栓，也就是出现了血瘀证的表现 。不难看出， 进行了实验组问的比较，与空白组比较 模型组大鼠 血小板活化是血瘀证发生和发展的重要病理生理基 为解释血瘀证的病机提供了分子水平的客观依据ｌｌ７ｌ。 清 ＦＣ、ＴＧ和肝组织ＴＣ、ＴＧ含量均有不同程度的 础。升高：与模型组比较。药物干预组大鼠血清ＴＣ、ＴＧ和 血小板活化分子表达增加，血小板的聚集性会增强，血 肝组织ＴＣ、ＴＧ含量均有不同程度降低，表明膈下逐 栓形成的可能性就增加，机体就越容易出现血瘀证ｌＪ８１。 瘀汤能够降低ＮＡＦＬＤ模型大鼠血脂和肝脂的水平， ＣＤ６２ｐ是一种位于血小板特殊颗粒和血管内皮 表明其不仅可以抑制脂质的吸收，还能促进肝脏对脂 细胞Ｗｅｉｂｅｌ－Ｐａｌａｄｅ小体内的膜糖蛋白，当血小板受 质的降解代谢 与空白组比较，模型组大鼠血清ＡＩＪＴ 刺激时陕速大量地表达于血小板膜表面，介导血小板 含量明显升高（Ｊｐ＜０．０１），表明模型大鼠有较严重的 和血管内皮与炎细胞黏附以及血小板之间的黏附，进 肝细胞损伤：与模型组比较．药物干预组大鼠血清 而促进纤维蛋白沉积和血栓形成，是目前发现的最能 ＡＬＴ含量显著降低（Ｐ＜０．０１），表明膈下逐瘀汤可以 反映血小板活化程度的特异性指标之一ｌＪ９－２０１。血小板 减轻肝损伤，有保肝护肝的功效。 聚集率是中医血瘀证量化标准之一，血小板聚集率越 与空白组比较，从第４周造模开始，血小板聚集 传统中医学中没有ＮＡＦＬＤ的病名，根据临床表 高越容易形成瘀血和血栓 现将其归属于“瘀证”“肝痞”“黄疸”等范畴，其病机为 ＣＨＩＮＡ ＭＥＤＩＣＡＬ ＨＥＲＡＬＤ Ｖｏ１ １３ Ｎｏ ３３ Ｎｏｖｅｍｂｅｒ ２０１６ 中国医药导报２０１６年１１月第１３卷第３３期 ・论 著・ ８】乌兰图娅 鬲下逐瘀汤对肝瘀血疗效的分析【Ｊ】＿中国现 率就开始升高，第８周末升高更明显（Ｐ＜０．０１），同时 【血浆ＣＤ６２ｐ含量也显著升高（Ｐ＜０．０１），表明ＣＤ６２ｐ 环障碍，从而引起脂质代谢障碍，容易发生脂肪肝。与 模型组比较，药物干预组大鼠的血小板聚集率和血浆 代药物应用，２０１５，９（１９）：２５８—２５９． ９】李松梅，李秀芳，林青，等．参苓白术散和膈下逐瘀汤对 表达增多，血小板活化，血小板聚集率升高，加重微循 ［早期脂肪肝大鼠模型血小板聚集的影响ｆＪ１．中药药理与 临床，２０ｏ７，２３（５）：３８—３９． ＣＤ６２ｐ含量明显下降（Ｐ＜０．０１），表明膈下逐瘀汤可 以减少ＣＤ６２ｐ的表达和血小板活化．降低模型大鼠 【１０］杨银花，王佳宁，韩雪，等 鬲下逐瘀汤对早期非酒精性 脂肪肝大鼠肝脏脂质代谢的影ＤＮ［Ｊ］．中外医疗．２０１４。 １０（３３）：７９－８０． 的血小板聚集率，改善血流状态，促进微循环物质交 换，降低肝细胞脂肪变性的概率，从而减轻ＮＡＦＬＤ的 症状。本研究结果表明．以活血化瘀为主的膈下逐瘀 ［１１］杨银花，王佳宁，韩雪，等．早期非酒精性脂肪肝大鼠血 液流变学变化及膈下逐瘀汤的干预作用ｆＪ１．中国实用 医药，２０１５，１０（５）：２７８—２７９． 汤减轻ＮＡＦＬＤ大鼠模型肝脂肪变性程度和肝损伤。 【１２］卞瑶，黄文俊，姚政，等．去脂软肝方对高脂诱导大鼠脂 降低血脂、肝脂含量，可能是通过减少ＣＤ６２ｐ的表达 肪肝血管性血友病因子作用的实验研究【Ｊ］．中国医药 来抑制血小板活化、降低血小板聚集率、改善血流状 导报，２０１４．１１（１）：４—６． 态、促进肝脏脂质代谢来实现的。本研究以方验证，初 ［１３】李满容．非酒精性脂肪性肝病中医证候及临床特点分 步揭示了ＮＡＦＬＤ与血瘀证的关系．为临床形成更为 析【Ｊ］．中医临床研究，２０１５，７（２７）：１７＂１８． 有效的治法方药提供理论依据和实验研究基础。 ［参考文献】 ［１］Ｆｒａｃａｎｚａｎｉ ＡＬ，Ｖａｌｅｎｔｉ Ｌ，Ｂｕｇｉａｎｅｓｉ Ｅ，ｅｔ ａ１．Ｒｉｓｋ ｏｆ ｓｅｖｅｒｅ ｌｉｖｅｒ ｄｉｓｅａｓｅ ｉｎ ｎｏｎａｌｃｏｈｏｌｉｃ ｆａｔｔｙ ｌｉｖｅｒ ｄｉｓｅａｓｅ ｗｉｔｈ ｎｏｒｍａｌ ａｍｉｎｏｔｒａｎｓｆｅｒａｓｅ ｌｅｖｅｌｓ：ａ ｒｏｌｅ ｆｏｒ ｉｎｓｕｌｉｎ ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ ａｎｄ ［１４］梁菁，韩荣．非酒精性脂肪性肝病中医证型研究进展【Ｊ］－ 中医药，２０１５，３３（３）：７２—７５． ［１５】赵浩，刘剑刚，雷燕，等．血脂异常血瘀证患者血液流动 性和流变性观察［Ｊ１＿微循环学杂志，２０１５，２５（３）：２３—２６． ［１６】张顺贞，石安华，卞瑶，等．去脂软肝方对早期脂肪肝大 鼠血脂及血液流变学的影响叭中华中医药杂志，２０１５， ３０（３）：８７５—８７７． ｄｉａｂｅｔｅｓ［Ｊ】．Ｈｅｐａｔｏｌｏｇｙ，２００８，４８（３）：７９２—７９８． 【２］Ｃｏｈｅｎ ＪＣ，Ｈｏｒｔｏｎ ＪＯ，Ｈｏｂｂｓ ＨＨ．Ｈｕｍａｎ ｆａｔｔｙ ｌｉｖｅｒ ｄｉｓｅａｓｅ： ｏｌｄｑｕｅｓｔｉｏｎｓ ａｎｄｎｅｗｉｎｓｉｇｈｔｓ叨．Ｓｃｉｅｎｃｅ，２０１１，３３２（６０３７）： １５１９—１５２３． 【１７】刘碉，殷惠军，陈可冀．血小板蛋白质组学及其在血瘀 证与活血化瘀中药研究中的探索应用【Ｊ１＿中国科学：生 命科学，２０１３，４３（８）：６１９—６２５． ［１８】李云婷，张雷雷，张巧丽，等＿血小板活化标志物ＣＤ６２Ｐ、 ＣＤ６３在糖尿病患者早期肾脏微血管病变中的表达【Ｊ］． 河北医科大学学报，２０１５，３６（５）：５５１—５５３． 【１９］Ｂｏｎａｃｉｎａ Ｆ，Ｂａｒｂｉｅｒｉ ＳＳ，Ｃｕｔｕｌｉ Ｌ，ｅｔ ａ１．Ｖａｓｃｕｌａｒ ｐｅｎｔｒａｘｉｎ ３ ｃｏｎｔｒｏｌｓ ａｒｔｅｒｉａｌ ｔｈｒｏｍｂｏｓｉｓ ｂｙ ｔａｒｇｅｔｉｎｇ ｃｏｌｌａｇｅｎ ａｎｄ 【３］龚世梅，舒发明，冯全生．中药复方治疗非酒精性脂肪肝 研究进展 云南中医中药杂志，２０１６，３７（１）：８３—８５． ［４］韩莉，王观龙，杨钦河，等．数据挖掘非酒精性脂肪性肝 病中医证候及用药特点ｆＪ１．北京中医药大学学报，２０１５， ３８（７）：４９６—５００． ［５李仪奎．５】中药药理实验方法学［Ｍ】．上海：科技出版社， ２００６：３６． ｉｆｂｒｉｎｏｇｅｎ ｉｎｄｕｃｅｄ ｐｌａｔｅｌｅｔｓ ａｇｇｒｅｇａｔｉｏｎ［Ｊ１．Ｂｉｏｃｈｉｍ Ｂｉｏ－ 【６】中华医学会肝脏病学分会脂肪肝和酒精性肝病学组．非 酒精性脂肪性肝病诊疗指南（２０１０年修订版） 中华 肝脏病杂志，２０１０，１８（３）：１６３—１６６． ｐｈｙｓ Ａｃｔａ，２０１６，１８６２（６）：１１８２－１１９０． ［２０】Ｓａｍｂｏｌａ Ａ，Ｇａｒｃｆａ Ｄｅｌ Ｂｌａｎｃｏ Ｂ，Ｒｕｉｚ—Ｍｅａｎａ Ｍ，ｅｔ ａ１． ＩｎｃｒｅａｓｅｄｙｏｎＷｉｌｌｅｂｒａｎｄｆａｃｔｏｒ，Ｐ－－ｓｅｌｅｃｔｉｎａｎｄｆｉｂｒｉｎｃｏｎｔｅｎｔ ［７］徐中菊，姜超，顾婷婷，等．丹芍疏肝颗粒对非酒精性脂 肪肝大鼠ＮＦ—ＫＢ蛋白表达的影响『Ｊ１．上海中医药大学 学报，２０１６，３０（３）：６４—６８． ｉｎ ｏｃｃｌｕｓｉｖｅ ｔｈｒｏｍｂｕｓ ｒｅｓｉｓｔａｎｔ ｔｏ ｌｙｔｉｃ ｔｈｅｒａｐｙ［Ｊ１．Ｔｈｒｏｍｂ Ｈａｅｍｏｓｔ，２０１６，１１５（６）：１１２９—１１３７． （收稿日期：２０１６—０８—０７本文编辑：张瑜杰） ＣＨＩＮＡ ＭＥＤＩＣＡＬ ＨＥＲＡＬＤ Ｖｏ１．１ ３ Ｎｏ．３３ Ｎｏｖｅｍｂｅｒ ２０１ ６ 空白组 模型组 图１各组大鼠肝细胞脂肪变性程度比较（ＨＥ染色，４００ｘ） 药物干预组 （见内文第５页） 空白组 模型组 图２各组大鼠肝细胞脂肪变性程度比较（苏丹Ⅲ染色，４００ｘ） （见内文第５页） 药物干预组 孽 雩薅 － ‘ 鼻． ＇ － ● Ａ．ＲＥＣＫ阴性表达：Ｂ．ＲＥＣＫ阳性表达 图１ 免疫组织化学检测人骨肉瘤组织中ＲＥＣＫ的表达情｝Ｅ（ＳＰ染色，２００ｘ） （见内丈第１７页） Ａ．ＭＭＰ－９阴性表达：Ｂ．ＭＭＰ一９阳性表达 图２免疫组织化学检测人骨肉瘤组织中ＭＭＰ一９的表达情况（ｓＰ染色，２００ｘ） （见内文第ｌ８页）
