益气养阴活血通络方对糖尿病肾病大鼠肾脏的作用研究

中国中西医结合肾病杂志２０１２年８月第１３卷第８期ＣＪＩＴＷＮ．Ａｕｇｕｓｔ　２０１２．Ｖｏ１．１３．Ｎｏ．８　・７０７・　ＴＮＦｅｔ基因的ＴＮＦｏｔｌ／１基因型在进展组中比非进展　Ｍｐｈａ一３０８　ｐｒｏｍｏｔｅｒ　ｇｅｎｅ　ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍ　ａｎｄ　ｉｎｃｒｅａｓｅｄ　ｔｕｍｏｒ　组更普遍，表明ＴＮＦｃｔｌ／１基因型可能是ＩｇＡ肾病进展　ｎｅｃｒｏｓｉｓ　ｆａｃｔｏｒ　ｓｅｒｕｍ　ｂｉｏａｃｔｉｉｔｒｙ　ｉｎ　ｆａｒｍｅｒ’ｓ　ｌｕｎｇ　ｐａｔｉｅｎｔｓ．Ａｍ　Ｊ　的危险因素之一。　参考文献　Ｒｅｓｐｉｒ　Ｃｒｉｔ　Ｃａｒｅ　Ｍｅｄ，２００１，１６３（２）：３７９—３８２．　８．Ｓｈｕ　ＫＨ，Ｌｅｅ　ＳＨ，Ｃｈｅｎｇ　ＣＨ，ｅｔ　ａ１．Ｉｍｐａｃｔ　ｏｆ　ｉｎｔｅｒｔｅｕｋｉｎ一１　ｒｅ－　ｃｅｐｔｏｒ　ａｎｔａｇｏｎｉｓｔ　ａｎｄ　ｔｕｍｏｒ　ｎｅｃｒｏｓｉｓ　ｆａｃｔｏｒ—ａｌｐｈａ　ｇｅｎｅ　ｐｄｙｍｏｒ－　１．Ｂｅｒｇｅｒ　Ｊ．Ｈｉｎｇｌａｉｓ　Ｎ．Ｉｎｔｅｒｃａｐｉｌａｒｙ　ｄｅｐｏｓｉｔｓ　ｏｆ　ＩｇＡ—ＩｇＧ．Ｊｕｒｏｌ－　ｐｈｉｓｍ　ｏｆ　ＩｇＡ　ｎｅｐｈｒｏｐａｔｈｙ．Ｋｉｄｎｅｙ　Ｉｎｔ，２０００，５８（２）：７８３—７８９．　９．Ｌｅｅ　ＳＨ，Ｐａｒｋ　ＳＨ，Ｍｉｎ　ＪＫ，ｅｔ　ａ１．Ｄｅｃｒｅａｓｅｄ　ｔｕｍｏｒ　ｎｅｃｒｏｓｉｓ　ｆａｃｔｏｒ　ｂｅｔａ　ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ　ｉｎ　ＴＮＦ｛２　ｈｏｍｏｚｙｇｏｔｅ：ａｌｌ　ｉｍｐｏｒｔｎｔａ　ｐｒｅｄｉｓｐｏ—　Ｎｅｐｈｒｏｌ（Ｐａｒｉｓ）１９６８，７４（９）：６９４—６９５．　２．Ｂａｒｔｏｓｉｋ　ＬＰ，Ｌａｊｏｉｅ　Ｇ，Ｓｕｇａｒ　Ｌ，ｅｔ　ａ１．Ｐｒｅｄｉｃｔｉｎｇ　ｐｒｏｇｒｅｓｓｉｏｎ　ｉｎ　ＩｇＡ　ｎｅｐｈｒｏｐａｔｈｙ．Ａｍ　Ｊ　Ｋｉｄｎｅｙ　Ｄｉｓ，２００１，３８（４）：７２８—７３５．　ｓｉｎｇ　ｆａｃｔｏｒ　ｏｆ　ｌｕｐｕｓ　ｎｅｐｈｒｉｔｉｓ　ｉｎ　Ｋｏｒｅａｎｓ．Ｌｕｐｕｓ，１９９７，６（７）：６０３　—３．蒋黎华，许玲娣，陈楠，等．ＩｓＡ肾病与肿瘤坏死因子Ｂ基因　多态性研究．中华肾脏病杂志，１９９９，１５（１）：５４．　６０９．　１０．Ｍｅｄｃｒａｆｔ　Ｊ，Ｈｉｔｍａｎ　ＧＡ，Ｓａｃｈｓ　ＪＡ，ｅｔ　ａ１．Ａｕｔｏｉｍｍｕｎｅ　ｒｅｎａｌ　ｄｉｓ．　ｅａｓｅ　ａｎｄ　ｔｕｍｏｕｒ　ｎｅｃｒｏｓｉｓ　ｆａｃｔｏｒ　ｂｅｔａ　ｇｅｎｅ　ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍ．Ｃｌｉｎ　４．张宏　ＩｇＡ肾病的分子遗传学研究．中华肾脏病杂志，２００５，２１　（１１）：２１—２４．　５．Ｈａａｓ　Ｍ．Ｈｉｓｔｏｌｏｇｉｃ　ｓｕｂｃｌａｓｓｉｉｆｃａｔｉｏｎ　ｏｆ　ＩｇＡ　ｎｅｐｈｒｏｐａｔｈｙ：ａ　ｃｌｉｎｉ—　Ｎｅｐｈｒｏｌ，１９９３，４０（２）：６３—６８．　１１．倪红兵，张芹，鞠少卿，等．ＩｇＡ肾病与肿瘤坏死因子Ｂ基因　ｃｏｐａｔｈｏｌｏｇｉｃ　ｓｔｕｄｙ　ｏｆ２２４　ｃａｓｅｓ．Ａｍ　Ｊ　Ｋｉｄｎｅｙ　Ｄｉｓ，１９９７，２９（６）：　８２９—８４２．　多态性的关联性研究．现代检验医学杂志，２００４，１９（５）：１４　—１６．　１２　Ｌｅｅ　ＥＹ，Ｙａｎｇ　ＤＨ，Ｈｗａｎｇ　ＫＹ，ｅｔ　ａ１．Ｉｓ　ｔｕｍｏｒ　ｎｅｃｒｏｓｉｓ　ｆａｃｔｏｒ　６．Ｌｏｕｉｓ　Ｅ，Ｆｒａｎｃｈｉｍｏｎｔ　Ｄ，Ｐｉｒｏｎ　Ａ，ｅｔ　．Ｔｕｍｏｕｒ　ｎｅｃｒｏｓｉｓ　ｆａｃｔｏｒ　（ＴＮＦ）ｇｅｎｅ　ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍ　ｉｎｆｌｕｅｎｃｅｓ　ＴＮＦ一０【ｐｒｏｃｌｕｃｔｉｏｎ　ｉｎ　ｌｉ—　ｐｏｐｄｙｓａｃｅｈａｒｉｄｅ（ＬＰＳ）一ｓｔｉｍｕｌａｔｅｄ　ｗｈｏｌｅ　ｂｌｏｏｄ　ｃｅｌｌ　ＯＶ　ｃｕｌｔｕｒｅ　ｉｎ　ｈｅａｌｔｈｙ　ｈｕｍａｎｓ．Ｃｌｉｎ　Ｅｘｐ　Ｉｍｍｕｎｏｌ，１９９８，１１３（３）：４０１—４０６．　７．Ｓｃｈａａｆ　ＢＭ，Ｓｅｉｔｚｅｒ　Ｕ，Ｐｒａｖｉｃａ　Ｖ，ｅｔ　ａ１．Ｔｕｍｏｒ　ｎｅｃｒｏｓｉｓ　ｆａｃｔｏｒ一　ｇｅｎｏｔｙｐｅ（ＴＮＦＡ２／ＴＮＦＡ２）ａ　ｇｅｎｅｔｉｃ　ｐｒｏｇｎｏｓｔｉｃ　ｆａｃｔｏｒ　ｏｆ　ａｎ　ｕｎｆａｖｏｒａｂｌｅ　ｏｕｔｃｏｍｅ　ｉｎ　ＩｇＡ　ｎｅｐｈｒｏｐａｔｈｙ？Ｊ　Ｋｏｒｅａｎ　Ｍｅｄ　Ｓｃｉ，　２００１，１６（６）：７５１—７５５．　（收稿：２０１１—１２—１１二次修回：２０１２—０６—２４）　・短篇论著・　益气养阴活血通络方对糖尿病肾病大鼠肾脏的作用研究　罗　静①　沈慧平①　王韶军①舒惠荃②　［摘要］　目的：观察益气养阴活血通络方对糖尿病肾病大鼠肾脏的保护作用。方法：将５０只ＳＤ雄性大鼠随机分为　正常组和造模组，造模组采用腹腔注射链脲佐菌素（ＳＴＺ）诱导成模，成模后随机分为模型组、科素亚组、川芎嗪组及益气养阴　活血通络方组，给药１２周；监测２４　ｈ尿蛋白定量；１２周末处死大鼠，检测血糖、肾功能及肝功能，进行疗效判定。结果：益气　养阴活血通络方能够降低ＤＫＤ模型大鼠２４　ｈ尿蛋白、血肌酐、血尿素氮及血尿酸，与模型组比较差异有统计学意义（Ｐ＜０．０５　或Ｐ＜０．０１）。结论：益气养阴活血通络方能减少尿蛋白、保护肾功能，对糖尿病肾病大鼠有治疗作用。　［关键词］　益气养阴活血通络方糖尿病肾病大鼠　１．１糖尿病肾病模型的建立健康ＳＤ雄性大鼠５Ｏ只　糖尿病肾脏病（ｄｉｂｅｔａｉｃ　ｋｉｄｎｅｙ　ｄｉｓｅａｓｅ，ＤＫＤ）是主要的糖　尿病微血管病变之一，临床特征为蛋白尿、水肿、高血压、渐进　（购自四川省动物实验中心），体重１８０～２１０　ｇ，饲养于通风清　性肾功能损坏，晚期出现严重肾衰竭，是糖尿病患者死亡的主　洁橱中。适应性喂养１周后，随机分为糖尿病造模组４０只（简　要原因之一…。近年来，糖尿病肾病发病呈迅速上升之势，严　称造模组）和正常组（Ａ组）１０只。造模组于禁食１２　ｈ后一次　重危害人民健康。因此，研究ＤＫＤ的发病机制，预防和治疗　性按６０　ｍｓ／ｋｇ体重的剂量进行单次腹腔内注射ＳＴＺ（纯度　ＤＫＤ刻不容缓。本实验主要观察益气养阴活血通络方对ＤＫＤ　９９．７％），ＳＴＺ临用前用枸橼酸钠缓冲液（Ｏ．１　ｍｏ］／Ｌ，ｐＨ４．５）配　大鼠肾脏病变的保护作用，并探索其作用机制，为防治ＤＫＤ提　制，１０　ｍｉｎ内用完。正常对照组则注射等量枸橼酸钠溶液。　供实验依据。　材料与方法　７２　ｈ后至少连续３　ｄ尾静脉测随机血糖，连续３次血糖　＞１６．６　ｍｍｏｌ／Ｌ、２４　ｈ尿量＞原尿量５ｏ％、尿蛋白排泄＞３０　ｍｓ／２４　ｈ　者，确定造模成功　。　１．２试剂及分组　１动物模型及分组　①②河北省张家口市中医院（张家口０７５０００）　成都中医药大学附属医院（成都６１００７５）　・７０８・　中国中西医结合肾病杂志２０１２年８月第１３卷第８期ｃＪｒｒＷＮ，Ａｕｇｕｓｔ　２０１２，Ｖｏ１．１３，Ｎｏ．８　检测血肌酐（Ｓｃｒ）、尿素氮（ＢＵＮ）、血　１．２．１　益气养阴活血通络方　由太子参、黄芪、白术、防　行股动脉取血，分离血清，风、女贞子、旱莲草、丹参、川芎、红花、覆盆子、莲子、芡实组成，　尿酸（ＵＡ）及空腹血糖（ＦＢＧ）。　按比例称取后，水煎、过滤，浓缩至含生药１．５　ｇ／ｍｌ。装入瓶中　３统计学方法所有数据应用ＳＰＳＳ　１６．０统计软件进行　结果用（　±ｓ）表示，组间差异用单因素方差分析，　密封保存于４℃冰箱中。由成都中医药大学附属医院制剂室　统计学处理，组间两两比较采用ｇ检验，以Ｐ＜０．０５为差异有统计学意义。　提供。　１．２．２分组将造模成功的糖尿病造模组随机分为模型　组（Ｂ组）、科素亚组（Ｃ组）、川芎嗪组（Ｄ组）及益气养阴活血　通络汤组（Ｅ组）。将科素亚４０　ｍｇ／ｋｇ、川芎嗪１００　ｍｇ／ｋｇ，以等　结　果　１各组大鼠检测指标变化由表１可见，用药１２周后Ｂ　０５），Ｃ组和Ｅ组均低于Ｂ　量生理盐水配制分别给对应组灌胃；中药组予益气养阴活血通　组２４　ｈ尿蛋白定量高于Ａ组（Ｐ＜０．　络汤２５　ｇ・ｋｇ～・ｄ～；正常组、模型组喂以等量的生理盐水，　组（Ｐ＜０．０５），而Ｄ、Ｂ组之间差异无统计学意义（Ｐ＞０．０５）。ｃ组之间差异无统计学意义（Ｐ＞０．０５），而Ｄ、Ｅ　每１３上午１次。连续给药１２周。每２周称一次体重，根据体　Ｂ组Ｓｃｒ与Ａ、０５）。Ｂ组ＢＵＮ与ｃ、Ｄ组之间差异无统　重调整用药。所有大鼠实验期间予标准饲料，自由进食，常规　组均低于Ｂ组（Ｐ＜０．饮水，不使用胰岛素及其他降糖药。　２观察指标　计学意义（Ｐ＞０．０５），而Ｅ组低于Ｂ组（Ｐ＜０．０５），Ｅ、Ａ组之间　差异无统计学意义（Ｐ＞０．０５）。Ｃ、Ｅ组ＵＡ均低于Ｂ组（Ｐ＜　各　于造模第４、８、　０．０５），Ｄ组明显低于Ｂ组（Ｐ＜０．Ｏ１）。由于大鼠进食很少，益气养阴活血通络方是否具有降糖的　１２周末用代谢笼收集２４　ｈ尿液，记录尿量，送检测定２４　ｈ　Ｕｐｒｏ。　组空腹血糖均明显降低，２．１　２４　ｈ尿蛋白定量（２４　ｈ　Ｕｐｒｏ）测定２．２血液生化指标测定用药第１２周末，处死大鼠前进　作用需进一步验证。　表１各组大鼠２４　ｈ　Ｕｐｒｏ、Ｓｃｒ、ＢＵＮ、ＵＡ、ＦＢＧ变化（　４－ｓ）　注：与Ｂ组比较，‘Ｐ＜０．０５　２各组大鼠血清总蛋白（ＴＰ）、血清白蛋白（Ａｌｂ）、丙氨酸　均低于Ａ组（Ｐ＜０．０５或＜０．０１），而Ｅ、Ａ组之间差异无统计　氨基转移酶（ＡＬＴ）、天门冬氨酸氨基转移酶（ＡＳＴ）的变化由　学意义（Ｐ＞０．０５）。Ｂ组ＡＬＴ、ＡＳＴ均高于Ａ组（Ｐ＜０．０５），Ｃ、　表２可见，Ｂ、Ｄ组ＴＰ较Ａ组降低（Ｐ＜Ｏ．０５或＜０．Ｏ１），Ｃ、Ｅ组　Ｄ、Ｅ组与Ａ组问差异无统计学意义（Ｐ＞０．０５）。　与Ａ组相比较差异无统计学意义（Ｐ＞０．０５）。Ｂ、Ｃ、Ｄ组Ａｌｂ　表２各组大鼠ＴＰ、Ａｌｂ、ＡＬＴ、ＡＳＴ的变化（牙±ｓ）　注：与Ａ组比较，　Ｐ＜０．０５　讨　论　本研究结果显示，益气养阴活血通络方能够显著减少ＤＫＤ　模型大鼠２４　ｈ尿蛋白和血肌酐、尿素氮及血尿酸的生成，减轻　ＤＫＤ是糖尿病的主要慢性并发症之一，是全身微血管病变　肾脏损害，保护ＤＫＤ模型大鼠的肾脏功能，更进一步证明益气　为该方的临床应用提供　的肾脏表现。在临床中大多数ＤＫＤ患者表现为气阴两虚之　养阴活血通络方具有切实可靠的作用，证，且以脾肾气阴两虚最为突出，病程过程中常常兼挟瘀血、水　实验室依据。　湿、痰浊，且为导致ＤＫＤ病情加重的重要因素。　益气养阴活血通络方通过临床观察，对治疗ＤＫＤ患者取　的肾功能具有显著的保护作用。方中生黄芪、太子参益气养　邪，女贞子、旱莲草滋补肝肾之阴，共为臣药。覆盆子、芡实、莲　参考文献　得了良好的Ｉ临床效果。本实验进一步证实其对ＤＮ模型动物　１．叶任高，孙升云．肾脏病中西医诊治精要．北京：军事医学科　学出版社，２００５．１９６．　建立．中国实验动物学报，２００５，１３（３）：１６３—１６５．　（收稿：２０１２—０４—２１修回：２０１２—０５—２１）　阴，白术补气健脾，三药相伍共为君药；防风辛散温通，解表驱　２．雷作熹，罗仁，董晓蕾，等．ＳＴＺ诱导糖尿病肾病大鼠模型的　子益肾固精摄尿；丹参、川芎、红花活血化瘀，全方诸药合用，共　奏益气养阴、活血通络之功。