樱桃矮化砧的组培快繁技术研究

西北林学院学报２００６，２１（１）：８２￣８４　ＪｏｕｒｎＭ　ｏｆ　Ｎｏｒｔｈｗｅｓｔ　Ｆｏｒｅｓｔｒｙ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ　樱桃矮化砧的组培快繁技术研究　成密红　，　郭军战　，　成鸿飞　（１．西北农林科技大学林学院，陕西杨陵７１２１００；２．陕西省龙草坪林业局，陕西佛坪７２３４０１）　摘要：以中华矮樱、Ｇｉｓｅｌａ一５、Ｇｉｓｅｌａ一７为供试材料，进行组培快繁技术研究，结果表明中华矮樱　适宜的初代培养基为ＭＳ＋６一ＢＡ　１．０　ｍｇ・Ｌ　＋ＮＡＡ　０．１　ｍｇ・Ｌ＿。，增殖培养基为ＭＳ＋６一ＢＡ　１．０　ｍｇ・Ｌ　＋ＮＡＡ　０．２　ｍｇ・Ｌ＿。，生根培养基为１／２ＭＳ＋ＮＡＡ　０．８　ｍｇ・Ｌ＿。￣Ｇｉｓｅｌａ一５号适宜　的初代培养基为ＭＳ＋６一ＢＡ　０．８　ｍｇ・Ｌ　＋ＮＡＡ　０．１　ｍｇ・Ｌ＿。，增殖培养基为ＭＳ＋６－ＢＡ　０．８　ｍｇ・Ｌ　＋ＮＡＡ　０．２　ｍｇ・Ｌ一，生根培养基为１／２ＭＳ＋ＮＡＡ　０．５　ｍｇ・Ｌ＿。￣Ｇｉｓｅｌａ一７适宜的初代　培养基为ＭＳ＋６一ＢＡ　０．８　ｍｇ・Ｌ　＋ＮＡＡ　０．１　ｍｇ・Ｌ＿。，增殖培养基为ＭＳ＋６一ＢＡ　０．８　ｍｇ・Ｌ　＋ＮＡＡ　０．１　ｍｇ・Ｌ＿。，生根培养基为１／２ＭＳ＋ＮＡＡ　０．５　ｍｇ・Ｌ～。　关键词：中华矮樱桃；Ｇｉｓｅｌａ一５号￣Ｇｉｓｅｌａ一７号；组培快繁　中图分类号：￥６６２．５　文献标识码：Ａ　文章编号：１００１—７４６１（２００６）０１—００８２—０３　Ｏｎ　Ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ　ｏｆ　Ｔｉｓｓｕｅ　Ｃｕｌｔｕｒｅ　ｏｆ　Ｃｈｅｒｒｙ　Ｄｗａｒｆ　Ｒｏｏｔｓｔｉｃｋ　ＣＨＥＮＧ　Ｍｉ—ｈｏｎｇ　，　ＧＵｏ　Ｊｕｎ—ｚｈａｎ¨，　ＣＨＥＮＧ　Ｈｏｎｇ—ｆｅｉ　（１．Ｃｏｌｌｅｇｅ　ｏｆＦｏｒｅｓｔｒｙ，ＮｏｒｔｈｗｅｓｔＡ＆ＦＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｙａｎｇｌｉｎｇ，Ｓｈａａｎ￣７１２１００，Ｃｈｉｎａ　２．Ｓｈａａｎｚｉ　Ｐｒｏｖｉｎｃｅ　Ｌｏｎｇｃａｏｐｉｎｇ　Ｆｏｒｅｓｔｒｙ　Ｂｕｒｅａｕ，Ｆｏｐｉｎｇ，Ｓｈａａｎｘｉ　７２３４０１，Ｃｈｉｎａ）　Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔａｋｉｎｇ　Ｃｈｉｎｅｓｅ　ｌｏｗ　ｃｈｅｒｒｙ，Ｇｉｓｅｌａ－５　ｃｈｅｒｒｙ　ａｎｄ　Ｇｉｓｅｌａ一７　ｃｈｅｒｒｙ　ａｓ　ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ　ｍａｔｅｒｉａｌｓ，ｔｅｃｈ—　ｎｉｑｕｅｓ　ｏｆ　ｔｉｓｓｕｅ　ｃｕｌｔｕｒｅ　ｗｅｒｅ　ｓｔｕｄｉｅｄ．Ｔｈｅ　ｒｅｓｕｌｔｓ　ｓｈｏｗｅｄ　ｔｈａｔ，ｔｈｅ　ｍｏｓｔ　ｓｕｉｔａｂｌｅ　ｐｒｉｍａｒｙ　ｃｕｌｔｕｒｅ　ｍｅｄｉｕｍ　ｆｏｒ　Ｃｈｉｎｅｓｅ　ｌｏｗ　ｃｈｅｒｒｙ　ｗａｓ　ＭＳ＋６一ＢＡ　１．０　ｍｇ・Ｌ　＋ＮＡＡ　０．１　ｍｇ・Ｌ＿。，ｐｒｏｐａｇａｔｉｏｎ　ｃｕｌｔｕｒｅ　ｍｅｄｉｕｍ　ｉｓ　ＭＳ＋６一ＢＡ　１．０　ｍｇ・Ｌ　＋ＮＡＡ　０．２ｍｇ・Ｌ＿。，ｒｏｏｔ　ｃｕｌｔｕｒｅ　ｍｅｄｉｕｍ　１／２Ｍｓ＋ＮＡＡ　０．８　ｍｇ・Ｌ一　；ｔｈｅ　ｂｅｓｔ　ｐｒｉｍａｒｙ　ｃｕｌｔｕｒｅ　ｍｅｄｉｕｍ　ｆｏｒ　Ｇｉｓｅｌａ一５　ｃｈｅｒｒｙ　ｗａｓ　ＭＳ＋６一ＢＡ　０．８　ｍｇ・Ｌ　＋ＮＡＡ　０．１　ｍｇ・Ｌ＿。，ｐｒｏｐａｇａ—　ｔｉｏｎ　ｃｕｌｔｕｒｅ　ｍｅｄｉｕｍ　ＭＳ＋６一ＢＡ　０．８　ｍｇ・Ｌ　＋ＮＡＡ０．２　ｍｇ・Ｌ～，ｒｏｏｔ　ｃｕｌｔｕｒｅ　ｗａｓ　１／２ＭＳ＋ＮＡＡ　０．５　ｍｇ・Ｌ　；ｆｏｒ　Ｇｉｓｅｌａ一７　ｃｈｅｒｒｙ，ｐｒｉｍａｒｙ　ｃｕｌｔｕｒｅ　ｗａｓ　ＭＳ＋６一ＢＡ　Ｏ．８　ｍｇ・Ｌ一　＋ＮＡＡ　ｍｇ・Ｌ～０．１ｍｇ・　Ｌ一，ｐｒｏｐａｇａｔｉｏｎ　ｃｕｌｔｕｒｅ　ｍｅｄｉｕｍ　ＭＳ＋６－ＢＡ　０．８　ｍｇ・Ｌ一　＋ＮＡＡ　０．１　ｍｇ・Ｌ～，ｒｏｏｔ　ｃｕｌｔｕｒｅ　ｍｅｄｉｕｍ　１／　２ＭＳ＋ＮＡＡ　０．５　ｍｇ・Ｌ～。　Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ：Ｃｈｉｎｅｓｅ　ｌｏｗ　ｃｈｅｒｒｙ；Ｇｉｓｅｌａ一５　ｃｈｅｒｒｙ；Ｇｉｓｅｌａ一７　ｃｈｅｒｒｙ；ｔｉｓｓｕｅ　ｃｕｌｔｕｒｅ　中华矮樱桃，是原产于山东省莱阳市的中国樱　桃的一个矮生类型，树体紧凑矮小，树势强健，树姿　直立，枝条粗壮，节间短，叶片大而肥厚，叶色浓绿，　根系发达，须根较多，固地性强［１］，既是适于栽培的　非常必要，有着广阔的前景。　品种，又是优良的矮化砧木Ｃ２，３］。　　材料与方法　由德国Ｊｕｓｔｕｓ　Ｌｉｅｂｉｇ大学果树研究所选育的　１Ｇｉｓｅｌａ系列砧木品种　］具有适应性强、矮化，嫁接樱　桃品种苗亲和力强［引，抗根癌病［引，树体矮化紧凑，　早结果、早丰产等优良杼陛，是世界公认优良樱桃矮　化砧木［　卅］。中华矮樱、Ｇｉｓｅｌａ一５、Ｇｉｓｅｌａ一７是适应陛　广、嫁接亲和性好、丰产和早果性极好的樱桃矮化砧　收稿日期：２００５—０５—２４　修回日期：２００５—０６—１３　木，它们种子萌发率低，实生苗易感染病毒，扦插繁　殖系数低，因而在生产实践中的应用受到极大的限　制［　’２’　’９］。因此，应用组培快繁技术大规模繁殖显得　１．１供试材料　外植体为从陕西省苗木繁育中心分别于２００３　年１２月初采的中华矮樱、Ｇｉｓｅｌａ一５、Ｇｉｓｅｌａ一７一年生　枝条上的休眠芽（设为材料１），３月中旬采回的一年　生枝条在０．２５　ｍｇ・Ｌ　头孢氨苄胶囊水溶液中水　基金项目：陕西省苗木繁育中心项目“林果新品种引种与克隆”（１４２２０３０４）　作者简介：成密红（１９７４一），女，陕西武功人，讲师，在读硕士，主要从事林木遗传育种研究。　维普资讯 http://www.cqvip.com

第１期　成密红等樱桃矮化砧的组培快繁技术研究　８３　培１０　ｄ左右已萌发的芽（设为材料２）和５月中旬采　回的当年生嫩枝（设为材料３）。　１．２培养基　初代培养基（１）ＭＳ、添加６－ＢＡ　０．５、０．８、１．０　ｍｇ・Ｌ＿。，ＮＡＡ　０．０５、０．１　ｍｇ・Ｌ＿。，蔗糖３　９／６设６　个组合。增殖培养基（２）ＭＳ、添加６－ＢＡ　０．５、０．８、　１．０、１．５，ＮＡＡ　ｍｇ・Ｌ～０．０５、０．１、０．２，蔗糖３　９／５，　设１Ｏ个组合。诱导生根培养基：（３）１／２ＭＳ＋ＮＡＡ　０．２、０．５、０．８、１．０　ｎａｇ・Ｌ＿。，蔗糖１．５　，设４个组　合。以上培养基ｐＨ值均为５．８＂－＇６．０，琼脂０．６　９／５。　１．３消毒方法　，　将无菌芽接种在增殖培养基上筛选最佳的激素　浓度配比。　将无菌芽接种在生根培养基上筛选最佳的生根　ＮＡＡ浓度。　２　结果与分析　２．１不同供试材料与污染率　将消过毒的材料１的芽鳞剥掉接种到初代培养　基；材料２和材料３均除去受伤切面接种到初代培　养基；结果表明（表１）：在相同的消毒处理（７５　９／５酒　精浸３０　ｓ，０．１　９／６　ＨｇＣ１分别消毒５、６　ｍｉｎ）条件下　　ｍｇ・Ｌ　头孢氨苄　将供试材料在流水下冲洗１　ｈ后，装入磨口玻　２００４年３月中旬采回的在０．２５ｄ左右的一年生枝条上已萌　璃瓶中，在超净工作台上用７５　９／６酒精浸３０　ｓ，再用　胶囊水溶液中水培１０　０．１　ＨｇＣ１表面分别消毒４、５、６、７　ｍｉｎ，无菌水冲　发的芽（材料２）接种后污染率最小，未污染率可达　洗５～６次。　９Ｏ　以上，其次为２００４年５月中旬采回的当年生嫩　枝（材料３），可达８Ｏ　左右，而２００３年１２月初采回　１．４培养条件　材料１）污染率最高且初　培养温度（２５士２）℃，光照时间１２　ｈ・ｄ～，光　的一年生枝条上的休眠芽（照强度２　０００　ｌｘ。　１．５初代培养　代培养接种操作复杂。　２．２初代培养　经消毒处理的材料２的无菌茎尖接种到初代培　将供试材料经消毒和相关处理接种在初代培养　养基中，在合适的培养基上１０　ｄ茎尖开始萌动并迅　基上培养。　速增大，３０　ｄ可长成有３＂－－４片展开叶且有茎段抽出　１．６增殖生根培养　表１不同供试材料污染情况　Ｔａｂｌｅ　１　Ｔｈｅ　ｐｏｌｌｕｔｉｏｎ　ｐｅｃｅｎｔ　ｏｆ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ　ｍａｔｅｒｉａｌｓ　注：未污染率为未污染的株数／接种株数　的试管苗，在不适宜的培养基上只能展叶而不抽茎　和６号培养基上都能正常展叶但在６号培养基上基　段。结果表明（表２），中华矮樱桃在ＭＳ＋６一ＢＡ　１．０　部愈伤化相对较严重，叶片枯黄，只展叶，不抽茎段，　＋ＮＡＡ　０．１培养基上生长叶片浓绿，有茎段抽出，　在５号培养基上，根部几乎无愈伤化，叶片浓绿，生　生长健壮，确定ＭＳ＋６一ＢＡ　１．Ｏ＋ＮＡＡ　０．１为中华　长正常，故确定ＭＳ＋６－ＢＡ　０．８＋ＮＡＡ　０．１为　矮樱桃初代培养基；Ｇｉｓｅｌａ一５和Ｇｉｓｅｌａ一７虽在５号　Ｇｉｓｅｌａ一５和Ｇｉｓｅｌａ一７的初代培养基。　表２不同培养基对矮化砧初代培养的影响　Ｔａｂｌｅ　２　Ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　ｄｉｆｆｉｒｅｎｔ　ｃｕｌｔｕｒｅ　ｍｅｄｉｕｓ　ｔｏ　ｃｈｅｒｒｙ　ｄｗａｒｆ　ｒｏｏｔｓｔ￣ｋ’ｐｒｉｍａｒｙ　ｃｕｌｔｕｒｅ　注：分化率为茎尖能分化的外植体株数／接种的外植体株数。　２．３继代扩繁　数和生长情况取决于ＢＡ和ＮＡＡ二者的相对浓度　试管苗经切段后，每段带１、２片叶或基部芽团，　和比例。中华矮樱桃在１Ｏ号培养基上增殖倍数虽最　接种到增殖培养基中，结果表明（表３）芽的增殖倍　高但基部愈伤化严重，叶片黄化，生长细弱，在９号　维普资讯 http://www.cqvip.com

西北林学院学报　２１卷　培养基上增殖倍数虽不如１０号培养基上高，但基部　虽不如６号培养基上高，但，基部愈伤化少，叶片浓　愈伤化轻，叶片浓绿，生长健壮，确定ＭＳ＋６－ＢＡ　绿，生长健壮，而在７～１０号培养基上其增殖倍数虽　１．０＋ＮＡＡ　０．２为其最适增殖培养基；同样原因确　高，但其出现玻璃化且叶片小，呈不正常的类似植物　定ＭＳ＋６一ＢＡ　０．８＋ＮＡＡ　０．２为Ｇｉｓｅｌａ．５的最适　丛枝病的丛生状，故确定的ＭＳ＋６一ＢＡ　０．８＋ＮＡＡ　增殖培养基；Ｇｉｓｅｌａ一７在５号培培养基上增殖倍数０．１为Ｇｉｓｅｌａ．７最适增殖培养基。　表３不同浓度ＢＡ和ＮＡＡ浓度组合矮化砧增殖倍数的影响　Ｔａｂｌｅ　３　Ｅｆｆｃｅｔ　ｏｆ　ｄｉｆｆｉｒｅｎｔ　ＢＡ　ａｎｄ　ＮＡＡ’ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ　ｏｎ　ｃｈｅｒｒｙ　ｄｗａｒｆ　ｒｏｏｔｓｔｏｃｋ’ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｅ　ｍｕｌｔｉｐｌｅ　注；增殖倍数为接种后培养４０　ｄ左右分化的嫩芽数／接种初的嫩芽数。　２．４生根培养基的筛选　织，而阻碍根的生成。中华矮樱桃以１／２ＭＳ＋ＮＡＡ　将３．０　ｃｍ以上的试管苗剪去基部接种到生根　０．８为最适生根培养基；Ｇｉｓｅｌａ一５号和Ｇｉｓｅｌａ一７号以　培养基上，结果表明（表４），在一定的浓度范围内，　Ｉ／２ＭＳ＋ＮＡＡ　０．５为最适生根培养基，表现生根率　随ＮＡＡ浓度的增加，生根率和生根条数都增加，且　高且根条数多，根粗壮，愈伤化程度轻。　根较粗壮。但当ＮＡＡ浓度太大时，基部产生愈伤组　表４不同浓度的ＮＡＡ对樱桃矮化砧生根影响　Ｔａｂｌｅ　４　Ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　ＮＡＡ’ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ　ｏｎ　ｃｈｅｒｒｙ　ｄｗａｒｆ　ｒｏｏｔｓｔｏｃｋ’ｒｏｏｔｉｎｇ　３小结　中国农学通报，２０００，（６）：５８＿５９．　［２］安建平，焦成谨，王廷璞，等．樱桃矮化砧木一莱阳矮樱桃组培　３种樱桃矮化砧的组培陕繁，以早春在实验室水　快繁技术研究［刀．西北园艺，２００２，（５）：９－１０．　培萌发的芽为外殖体材料，接种污染较小，成功率最　［３］安建平，王廷璞，焦成谨，等．莱阳矮樱桃组培快繁中激索配　高。初代培养的培养基中华矮樱以ＭＳ＋６一ＢＡ　１．０＋　比研究Ｄ］．天津师范学院学报，２００２，（１０）：３０－３３．　ＮＡＡ　０．１为宜；Ｇｉｓｅｌａ一５和Ｇｉｓｅｌａ一７以ＭＳ＋６－ＢＡ　［４］刘庆忠，赵红军，李志强．甜樱桃矮化砧吉赛拉（Ｇｉｓｅｌａ）的离体　０．８＋ＮＡＡ　０．１为宜。增殖培养的培养基中华矮樱　叶片再生植株研究［刀．果树学报，２００１，（５）：２５５—２５７．　［５］刘翠兰，郝广洲，李双云．大樱桃Ｇｉｓｅｌａ砧木嫩枝扦插育苗技　桃以ＭＳ＋６－ＢＡ　１．０＋ＮＡＡ　０．２为宜；Ｇｉｓｅｌａ一５以　术［刀．山东林业科技，２００４，（１）：３２—３２．　ＭＳ＋６一ＢＡ　０．８＋ＮＡＡ　０．２为宜Ｇｉｓｅｌａ一７以ＭＳ＋　［６］乔艳辉，王清华．Ｇｉｓｅｌａ樱桃矮化砧木试管苗炼苗移栽技术　６－ＢＡ　０．８＋ＮＡＡ　０．１为宜；。生根培养中华矮樱桃　［刀．山东林业科技，２００３，（１）：３８—３８．　以１／２ＭＳ＋ＮＡＡ　ｏ．８为最适生根培养基；Ｇｉｓｅｌａ一５　［７］姜中武，沙玉芬．ＧＭ、ＧＣ矮化樱桃砧木组培快繁技术［刀．烟　台果树，２００４，（２）：１—２．　以１／２ＭＳ＋ＮＡＡ　０．２为最适生根培养基；Ｇｉｓｅｌａ．７　［８］刘庆忠，赵红军．大樱桃矮化砧吉赛拉（Ｇｉｓｅｌａ）的微体繁殖Ｄ］．　号以１／２ＭＳ＋ＮＡＡ　０．５为最适生根培养基。　植物生理学通讯，２００１，（６）：２３６—２３７．　参考文献：　［９］王侠礼．甜樱桃矮吉赛拉的引进及微体快繁技术研究［刀．江西　［１］韩文璞，袁明莲．中华矮樱桃的组织培养与快速繁殖技术Ｉ－Ｊ］．　园艺，２００４，（３）：１－２．