・ ６６６ ・ 旦隧 坠医堂枣志２０１２年３月第３３卷第６期Ｉｎｔ Ｊ ＬａｂＭｅｄ，Ｍａｒｃｈ ２０１２，Ｖｏ１．３３，Ｎｏ．６ ・临床检验研究论著・ 脑梗死患者血脂水平与颈动脉内中膜厚度的相关性分析 肖 胜 ，陈 婧 ，汪宏良 ，肖劲松。 （湖北省黄石市中心医院：１．神经科，２．检验科摘要：目的４３５０００；３．武汉大学中南医院神经科，湖北武汉４３００７１） 探讨脑梗死（ＣＩ）患者血脂水平与颈动脉内中膜厚度（ＣＩＭＴ）的相关性。方法 测定１２０例ＣＩ患者（ＣＩ组）和 １２０例神经科非ｃＩ患者（对照组）ＣＩＭＴ、血浆氧化低密度脂蛋白（ｏｘ－ＬＤＬ）及血清总胆固醇（Ｔｃ）、三酰甘油（ＴＧ）、低密度脂蛋白 胆固醇（ＬＤＬ－Ｃ）、高密度脂蛋白胆固醇（ＨＤＬ—Ｃ）、载脂蛋白Ａ１（Ａｐｏ—Ａ１）、栽脂蛋白Ｂ（Ａｐｏ—Ｂ）、脂蛋白（ａ）［ＬＰ（ａ）］水平，并进行 相关分析。结果 ＣＩ组ＴＣ、ＴＧ、Ａｐｏ－Ｂ、ＬＰ（ａ）和ｏｘ－ＬＤＬ水平高于对照组（Ｐ＜０．０１）；ＣＩ组ＣＩＭＴ检测结果为１．１士０．３２ ｍｍ， 高于对照组的０．８±０．５４ ｍｍ（Ｐ＜０．０１）；ＣＩ组ＴＣ、ＴＧ、ＬＤＬ－Ｃ、Ａｐｏ－Ｂ、ＬＰ（ａ）、ｏｘ－ＬＤＬ与ＣＩＭＴ呈正相关（Ｐ＜０．０１），ＨＤＬ—Ｃ、 Ａｐｏ－Ａ１与ＣＩＭＴ呈负相关（Ｐ＜Ｏ．０１）。结论脂代谢异常与ｃＩ患者动脉粥样硬化密切相关；ＣＩ患者体内可能存在脂质过氧化 反应；抑制脂质过氧化，减少ｏｘ－ＬＤＬ的生成有助于预防和治疗ＣＩ。 关键词：脑梗死；血脂；氧化低密度脂蛋白； 内中膜厚度 ＤＯＩ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１６７３－４１３０．２０１２．０６．０１２ 文献标识码：Ａ 文章编号：１６７３—４１３０（２０１２）０６—０６６６—０２ Ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐ ｂｅｔｗｅｅｎ ｌｉｐｉｄｅｍｉａ ａｎｄ ｃａｒｏｔｉｄ ｉｎｔｉｍａ－ｍｅｄｉａ ｔｈｉｃｋｎｅｓｓ ｉｎ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｉｔｈ ｃｅｒｅｂｒａｌ ｉｎｆａｒｃｔｉｏｎ Ｘｉａｏ Ｓｈｅｎｇ ，Ｃｈｅｎ Ｊｉｎｇ ，Ｗａｎｇ Ｈｏｎｇｌｉａｎｇ。，Ｘｉａｏ Ｊｉｎｓｏｎｇ。 （１．Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｎｅｕｒｏｌｏｇｙ，２．Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，Ｈｕａｎｇｓｈｉ Ｃｅｎｔｒａｌ Ｈｏｓｐｉｔａｌ。Ｈｕａｎｇｓｈｉ Ｈｕｂｅｉ ４３５０００，Ｃｈｉｎａ；３．Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｎｅｕｒｏｌｏｇｙ，Ｚｈｏｎｇｎａｎ Ｈｏｓｐｉｔａｌ ｏｆ ｈａｎ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｗｕｈａｎ Ｈｕｂｅｉ ４３００７１，Ｃｈｉｎａ） Ａｂｓｔｒａｃｔ：０ｂｊｅｃｔｉｖｅ Ｔｏ ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅ ｔｈｅ ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐ ｂｅｔｗｅｅｎ ｌｉｐｉｄｅｍｉａ ａｎｄ ｃａｒｏｔｉｄ ｉｎｔｉｍａ—ｍｅｄｉａ ｔｈｉｃｋｎｅｓｓ（ＣＩＭＴ）ｉｎ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｉｔｈ ｃｅｒｅｂｒａｌｉｎｆａｒｃｔｉｏｎ（ＣＩ）．Ｍｅｔｈｏｄｓ ＣＩＭＴ，ｐｌａｓｍａ ｏｘｉｄｉｚｅｄ ｌｏｗ—ｄｅｎｓｉｔｙ ｌｉｐｏｐｒｏｔｅｉｎ（ｏｘ－ＬＤＬ）ｌｅｖｅｌ ａｎｄ ｓｅｒｕｍ ｌｅｖｅｌ ｏｆ ｔｏｔａ１ ｃｈｏ— ｌｅｓｔｅｒｏｌ（ＴＣ），ｔｒｉａｃｙｌｇｌｙｃｅｒｏｌ（ＴＧ），ｌｏｗ ｄｅｎｓｉｔｙ ｌｉｐｏｐｒｏｔｅｉｎ－ｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏ（ＬＤＬ—Ｃ），ｈｉｇｈ ｄｅｎｓｉｔｙ ｌｉｐｏｐｒｏｔｅｉｎ—ｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏ（ＨＤＬ－Ｃ），ａｐ— ｏｐｒｏｔｅｉｎ Ａ１（Ａｐｏ—Ａ１），ａｐｏｐｒｏｔｅｉｎ Ｂ（Ａｐｏ—Ｂ）ａｎｄ ｌｉｐｏｐｒｏｔｅｉｎ（ａ）［－ＬＰ（ａ）］ｗｅｒｅ ｄｅｔｅｃｔｅｄ ｉｎ １２０ ｃａｓｅｓ ｏｆ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｉｔｈ ＣＩ（ＣＩ ｇｒｏｕｐ） ａｎｄ １２０ ｎｏｎ－ＣＩ ｓｕｂｊｅｃｔｓ（ｃｏｎｔｒｏｌ ｇｒｏｕｐ）．Ｒｅｓｕｌｔｓ Ｌｅｖｅｌｓ ｏｆ ＴＣ，ＴＧ，Ａｐｏ—Ｂ，ＬＰ（ａ）ａｎｄ ｏｘ－ＬＤＬ ｉｎ ＣＩ ｇｒｏｕｐ ｗｅｒｅ ｈｉｇｈｅｒ ｔｈａｎ ｔｈｏｓｅ ｉｎ ｃｏｎｔｒｏｌ ｇｒｏｕｐ（Ｐ＜０．０１）．ＣＩＭＴ ｏｆ ＣＩ ｇｒｏｕｐ ｗａｓ １．１土Ｏ．３２ ｍｍ，ｗｈｉｃｈ ｗａｓ ｈｉｇｈｅｒ ｔｈａｎ ０．８土Ｏ．５４ ｍｍ ｏｆ ｃｏｎｔｒｏｌ ｇｒｏｕｐ（Ｐ＜ Ｏ．Ｏ１）．Ｉｎ ＣＩ ｇｒｏｕｐ，ＴＣ，ＴＧ，ＬＤＬ—Ｃ，Ａｐｏ—Ｂ，ＬＰ（ａ）ａｎｄ ｏｘ－ＬＤＬ ｗｅｒｅ ｐｏｓｉｔｉｖｅｌｙ ｃｏｒｒｅｌａｔｅｄ ｗｉｔｈ ＣＩＭＴ（Ｐ＜Ｏ．Ｏ１），ｂｕｔ ＨＤＬ・Ｃ ａｎｄ Ａｐｏ—Ａ１ ｗｅｒｅ ｎｅｇａｔｉｖｅｌｙ ｃｏｒｒｅｌａｔｅｄ ｗｉｔｈ ＣＩＭＴ（Ｐ＜０．０１）．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ Ｔｈｅｒｅ ｃｏｕｌｄ ｂｅ ｃｅｒｔａｉｎ ｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎ ｂｅｔｗｅｅｎ ａｂｎｏｒｍａｌ １ｉｐｉｄ ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ ａｎｄ ａｔｈｅｒ０ｓｃ１ｅｒｏｓｉｓ ｉｎ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｉｔｈ ＣＩ．Ｔｈｅｒｅ ｃｏｕｌｄ ｂｅ ｐｅｒｏｘｉｄａｔｉｃ ｒｅａｃｔｉｏｎ ｏｆ ｌｉｐｉｄ ｉｎ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｉｔｈ ＣＩ．Ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ ｏｆ ｌｉｐｉｄ ｐｒｅｏｘｉｄａｔｉｏｎ ｔｏ ｒｅｄｕｃｅ ｔｈｅ ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ ｏｆ ｏｘ－ＬＤＬ ｍｉｇｈｔ ｐｌａｙ ａｎ ｉｍｐｏｒｔａｎｔ ｒｏｌｅ ｆｏｒ ｔｈｅ ｐｒｅｖｅｎｔｉｏｎ ａｎｄ ｔｈｅｒａｐｙ ｏｆ ＣＩ． Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ：ｃｅｒｅｂｒａｌ ｉｎｆａｒｃｔｉｏｎ； ｌｉｐｉｄｅｍｉａ； ｏｘｉｄｉｚｅｄ １ｏｗ—ｄｅｎｓｉｔｙ ｌｉｐｏｐｒｏｔｅｉｎ； ｉｎｔｉｍａ－ｍｅｄｉａ ｔｈｉｃｋｎｅｓｓ 脑梗死（ｃＩ）常继发于颈动脉粥样硬化，后者病变程度与 ＣＩ发病风险密切相关［】］。脂代谢异常作为动脉粥样硬化危险 因素之一，一直受到临床的关注，而氧化低密度脂蛋白（ｏｘ－ １．２方法 １．２．１ 传统血脂指标检测 以干燥真空试管采集受试者晨起 空腹静脉血５ ｍＬ，３ ０００ ｒ／ｍｉｎ离心１０ ｍｉｎ后分离血清，采用 罗氏Ｐ８００全自动生化分析仪及配套试剂进行检测；总胆固醇 （ＴＣ）、三酰甘油（ＴＧ）测定采用酶化学动力学法，低密度脂蛋 白胆固醇（Ｉ ＤＬ—ｃ）、高密度脂蛋白胆固醇（ＨＤＬ＿ｃ）测定采用均 相液体双向试剂直接测定法，载脂蛋白Ａ１（Ａｐｏ－Ａ１）、载脂蛋 白Ｂ（Ａｐｏ－Ｂ）、脂蛋白（ａ）［ＬＰ（ａ）］测定采用免疫透射比浊法。 同时进行仪器配套质控品检测，并确保检测结果在控制范围 内。各项操作均按仪器及试剂盒说明书进行。 Ｉ ＤＩ ）在ＡＳ发生、发展中的作用也日益受到重视。脑动脉粥 样硬化及血栓形成是主要的ＣＩ发病机制，ｏｘ－ＬＤＬ也是动脉粥 样硬化形成并引发ｃＩ的重要危险因素之一Ｌ２］。本研究探讨了 ｃＩ患者血脂水平与颈动脉粥样硬化程度相关性，以期为ＣＩ的 治疗提供参考依据。 １资料与方法 １．１ 一般资料２０１０年１月至２０１１年６月本院神经科收治 的ＣＩ患者１２０例（ＣＩ组），均为发病ｌ～３ ｄ后入院，经头部ＣＴ 和ＭＲＩ确诊；均排除心房纤颤、严重肝肾功能障碍、脑出血、甲 状腺功能障碍、肿瘤、感染等疾病；男性７９例、女性４１例，年龄 ３８￣８６岁，平均６７．５岁；均符合１９９５年全国第四届脑血管病 １．２．２ ｏｘ－ＬＤＬ检测 采集受试者晨起空腹静脉血３ ｍＬ， ＥＤＴＡ－Ｎａ抗凝，３ ０００ ｒ／ｍｉｎ离心１０ ｍｉｎ后分离血浆，酶联免 疫吸附法检测ｏｘ－ＬＤＬ，试剂盒购自上海荣盛生物制剂公司， ＲＴ６０００型酶标仪为深圳霄杜生命科学有限公司产品。按试 剂盒说明书制备标准曲线后计算标本浓度。各项操作均按仪 器及试剂盒说明书进行；批内变异系数小于６．０ 。 １．３颈动脉内中膜厚度（ＣＩＭＴ）测定采用惠普７５００彩色多 普勒超声机，测量皮肤远侧管腔内膜界面与中层外膜界面之间 学术会议修订的缺血性脑卒中诊断标准 ］。同期于本院神经 科接受脑血管评估的患者１２０例纳入对照组，其性别和年龄与 ＣＩ组相匹配，均无心房纤颤、脑出血、肿瘤、感染及其他系统性 疾病。 通讯作者，Ｅ—ｍａｉｌ：ｅｌｉｔｅｃｈｊ＠１２６．ｃｏｍ。 国际检验医学杂志２０１２年３月第３３卷第６期ｌｎｔ Ｊ ＬａｂＭｅｄ，Ｍａｒｃｈ ２０１２，Ｖｏ１．３３，Ｎｏ．６ ・ ６６７ ・ 的距离，即颈动脉后壁纵向超声显像表现为相对低回声分隔的 ２条平行亮线之间的距离，即为ＣＩＭＴ；分别测量颈总动脉远 端分叉处１ ｃｍ、颈内动脉起始端１ ｃｍ及颈动脉窦部的ＣＩＭＴ 值各３次，计算均值及标准差；测量时避开粥样斑块。ＣＩＭＴ￣＜ ０．９ ｍｍ为正常，ｃＩＭＴ＞０．９ ｍｍ为增厚＿４ｊ。 １．４统计学处理 采用ＳＰＳＳ１３．０统计软件进行数据分析； 计量资料以（ ±ｓ）表示，组间比较采用ｔ检验；计数资料以百 分率表示，组问比较采用．）ｆ。检验；血脂水平与ＩＭＴ相关性分 析采用Ｓｐｅａｒｍａｎ直线相关分析；显著性检验水准为ａ一０．０５。 ２结 果 ２．１ 各组受试对象一般资料比较 各组受试对象一般资料比 较见表１。其中，ＣＩ组颈内动脉供血区梗死８３例（６９．２ ），椎 基底动脉供血区梗死３７例（３０．８ ）。 ２．２各研究组血脂水平与ＣＩＭＴ比较 各研究组血脂水平 比较见表１。ＣＩ组ＣＩＭＴ检测结果为１．１士０．３２ ｍｍ，ＣＩＭＴ 增厚１０２例（８５．０ ）；对照组ＣＩＭＴ值检测结果０．８±０．５４ ｍｍ，ＣＩＭＴ增厚２Ｏ例（１６．７ ）；二者检测结果比较差异有统 计学意义（Ｐ＜Ｏ．０１）。 表１ 各组受试对象一般资料比较［ （ ）或 ±ｓ］ 组别ＴＣ（ｍｒｒ￣ｌ／Ｉ ）ＴＧ（ｍｍｏｌ／Ｉ ）ＬＤＬ－Ｃ（ｍｍｏｌ／Ｉ ）ＨＤＬ－Ｃ（ｍｍｏｌ／Ｌ）Ａｐｏ－Ａｌ（ｇ／Ｌ）Ａｐ０－Ｂ（ Ｌ）ＬＰ（ａ）（ｍｇ／Ｌ） ｏｘ－ＬＤＩ （ｒｎｇ／Ｉ ） ：Ｐ＜０．０１，与对照组比较。 ２．３ ＣＩ组血脂水平与ＣＩＭＴ相关性分析 Ｓｐｅａｒｍａｎ直线相 关分析显示，ＣＩ患者ＴＣ、ＴＧ、ＬＤＬ—Ｃ、Ａｐｏ－Ｂ、ＬＰ（ａ）、ｏｘ－ＬＤＬ ０．７０，Ｐ＜Ｏ．０１），表明ｏｘ－ＬＤＬ水平升高参与了ＣＩ的病理生理 过程，证实ｏｘ－ＬＤＡ可用于预测ＣＩ的发病风险，该结论与既往 水平与ＣＩＭＴ呈正相关，相关系数分别为０．５２、０．２５、０．６２、 ０．２８、０．４６、０．７０（Ｐ＜Ｏ．０１），ＨＤＬ—Ｃ、Ａｐｏ—Ａ１水平与ＣＩＭＴ呈 负相关，相关系数分别为～０．５４、一０．２２（Ｐ＜０．０１）。 ３讨 论 文献报道一致Ⅲ１ “］。 随着对自由基与动脉粥样硬化、ＣＩ的病理生理过程相关 性研究的深人，抗氧自由基治疗在保护神经、血管免受自由基 损伤中的作用将越来越受到重视。本研究证实有效阻止脂质 过氧化，减少ｏｘ－ＬＤＬ的生成，可作为ＣＩ治疗方案之一而应用 于临床，也为自由基清除剂在动脉粥样硬化和ＣＩ治疗中的应 动脉粥样硬化所致血管损害是诱发ＣＩ的主要原因之一。 脂代谢异常与动脉粥样硬化的关系早已得到证实＿５ ］。调脂治 疗已成为预防和治疗脑动脉粥样硬化，防止ＣＩ发生和复发的 重要手段 ］。内中膜厚度（ＩＭＴ）可用于早期判断动脉粥样硬 化，也是ＣＩ的预测指标之一。本研究证实，ＴＣ、ＴＧ、ＬＤＬ广Ｃ、 用提供了理论依据。 参考文献 ［１］Ｌｉｂｙ Ｐ，Ｒｉｄｋｅｒ ＰＭ，Ｈａｎｓｓｏｎ ＧＫ．Ｐｒｏｇｒｅｓｓ ａｎｄ ｃｈａｌｌｅｎｇｅｓ ｉｎ Ａｐｏ—Ｂ、ＬＰ（ａ）与ＣＩＭＴ呈正相关，ＨＤＬ－Ｃ、Ａｐｏ—Ａ１与ｃＩＭＴ 呈负相关，与以往报道相符＿８］。 氧化低密度脂蛋白是低密度脂蛋白（ＬＤＬ）氧化修饰形成 的脂蛋白，是动脉粥样硬化斑块中特有的成分，也是血管损伤 ｔｒａｎｓｌａｔｉｎｇ ｔｈｅ ｂｉｏｌｏｇｙ ｏｆ ａｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒｏｓｉｓ［Ｊ］．Ｎａｔｕｒｅ，２０１１，４７３ （７３４７）：３１７－３２５． ［２］Ｍｅｌｌｏ ＡＰ，ｄａ Ｓｉｌｖａ ＩＴ，Ａｂｄａｌｌａ ＤＳ，ｅｔ ａ１．Ｅ１ｅｃｔｒ０ｎｅｇａｔｉｖｅ ｌｏｗ－ｄｅｎ— ｓｉｔｙ ｌｉｐｏｐｒｏｔｅｉｎ：ｏｒｉｇｉｎ ａｎｄ ｉｍｐａｃｔ ｏｎ ｈｅａｌｔｈ ａｎｄ ｄｉｓｅａｓｅ［Ｊ］．Ａｔｈ— ｅｒｏｓｃｌｅｒｏｓｉｓ，２０ｌ１，２１５（２）：２５７—２６５． 过程中的重要起始因子，可经多种途径损伤血管内皮细胞 ］。 ｃＩ患者由于脑组织缺血、缺氧，产生大量免疫系统刺激原，通 过激活炎性细胞而产生大量的氧自由基，氧化修饰ＬＤＬ成为 ［３］中华医学会神经科学会．各类脑血管疾病诊断要点［Ｊ］．中华神经 科杂志，１９９６，２９（６）：３７９—３８１． ｒ４］Ｐｅｔｅｒｓ ＳＡ，Ｇｒｏｂｂｅｅ ＤＥ，Ｂｏｔｓ ＭＬ．Ｃａｒｏｔｉｄ ｉｎｔｉｍａ—ｍｅｄｉａ ｔｈｉｃｋ— ｏｘ－ＬＤＬ。ＬＤＬ经氧化修饰后，其受体识别位点发生变化，形成 ｏｘ－ＬＤＬ特有的受体识别位点。凝集素样氧化低密度脂蛋白受 体一１（Ｌ０Ｘ－１）是主要表达于血管内皮细胞及血管丰富组织的 ｏｘ－ＬＤＬ特异性受体。生理条件下，ＬＯＸ－１通过结合、吞噬ＯＸ－ ＬＤＬ而发挥清除功能；病理条件下，ＬＯＸ－１被炎性因子、氧化 应激、流体剪切力等刺激因素所诱导，从而介导ｏｘ－ＬＤＬ对内 皮细胞的损伤作用¨１ 。有研究发现，ｏｘ－ＬＤＬ引起的血管内皮 舒张因子合成减少和黏附分子表达增加可被ＬＯＸ－１反义寡核 苷酸抵消，间接证实ｏｘ－ＬＤＬ与Ｌ０ｘ＿１的相互作用可能是引 起血管内皮细胞功能障碍的重要分子机制［１１３。由此可见，ｏＸ－ ＬＤＬ与血管内动脉粥样硬化斑块的稳定性和ＣＩ的急性发作 有关。本研究结果显示，ｏｘ－ＬＤＬ水平与ＣＩＭＴ呈正相关（ｒ一 ｎｅｓｓ：ａ ｓｕｉｔａｂｌｅ ａｌｔｅｒｎａｔｉｖｅ ｆｏｒ ｃａｒｄｉｏｖａｓｃｕｌａｒ ｒｉｓｋ ａｓ ｏｕｔｃｏｍｅ［Ｊ］． Ｅｕｒ Ｊ Ｃａｒｄｉｏｖａｓｃ ＰｒｅｖＲｅｈａｂｉｌ，２０１１，１８（２）：１６７—１７４． ［５］Ｔｚｉｏｍａｌｏｓ Ｋ，Ａｔｈｙｒｏｓ ＶＧ，Ｋａｒａｇｉａｎｎｉｓ Ａ，ｅｔ ａ１．Ｄｙｓｌｉｐｉｄｅｍｉａ ａｓ ａ ｒｉｓｋ ｆａｃｔｏｒ ｆｏｒ ｉｓｃｈｅｍｉｃ ｓｔｒｏｋｅ［Ｊ］．Ｃｕｒｒ Ｔｏｐ Ｍｅｄ Ｃｈｅｍ，２００９，９ （１４）：１２９１－１２９７． ［６］胡俊萍，毛美娇，梁燕，等．血脂检测方法评价及影响因素研究 ［Ｊ］．国际检验医学杂志，２０１１，３２（５）：５８５—５８７． ［７］罗军，刘云兵，陈蓉蓉，等．阿托伐他汀对血清脂蛋白（ａ）的影响 ［Ｊ］．国际检验医学杂志，２０１０，３１（５）：４９１—４９２． ［８３杨柳，王志．脑血管疾病患者测定血脂、脂蛋白、载脂蛋白含量的 临床意义［Ｊ］．国际检验医学杂志，２０１０，３１（３）：２９７—２９８． ［９］Ｎｅｄｅｌｊｋｏｖｉｅ ＺＳ，Ｇｏｋｅｅ Ｎ，Ｌｏｓｅａｌｚｏ Ｊ．Ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ（下转第６７０页） ・ ６７０・ 国际检验医学杂志２０１２年３月第３３卷第６期Ｉｎｔ Ｊ ＬａｂＭｅｄ，Ｍａｒｃｈ ２０１２，Ｖｏ１．３３，Ｎｏ．６ 表２ 校准品浓度（ｎｇ／ｍＩ ）０．０ ０．２ １．０ 稳定性试验结果（ｎｇ／ｍＬ） ４℃保存试剂 ０．００ ０．１９ ＣＬＩＡ检测系统具备灵敏度高、测定范围广、精密度高、稳定性 高等优点，能够满足临床应用要求。 参考文献 ［１］Ｒａｓｓｕｅ ＭＪ，Ｋｕｍａｎ ＬＧ，Ｐａｎｄｅｙ ＰＫ，ｅｔ ａ１．Ａ ｈｉｇｈｌｙ ｓｐｅｃｉｆｉｃ ｈｅｔｅｒ— ｏｌｏｇｏｕｓ ｅｎｚｙｍｅ—－ｌｉｎｋｅｄ ｉｍｍｕｎｏｓｏｒｂｅｎｔ ａｓｓａｙ ｆｏｒ ｍｅａｓｕｒｉｎｇ ｔｅｓ—— ｔｏｓｔｅｒｏｎｅ ｉｎ ｐｌａｓｍａ ｕｓｉｎｇ ａｎｔｉｂｏｄｙ—ｃｏａｔｅｄ ｉｍｍｕｎｏａｓｓａｙ ｐｌａｔｅｓ ｏｒ ３７℃保存试剂 ０．００ ０．２１ １．１６ ２．７２ １０．１３ １．１２ ２．５ｌ ９．８４ ２．５ １０．０ ｐｏｌｙｐｒｏｐｙｌｅｎｅ ｔｕｂｅｓ［Ｊ］．Ｓｔｅｒｏｉｄｓ，１９９２，５７（６）：２８８ ２９４． ［２３ Ｏｓｔｒｏｗｓｋａ Ｚ，Ｋｏｓ—Ｋｕｄａ Ｂ，Ｍａｒｅｋ Ｂ，ｅｔ ａ１．Ｃｉｒｃａｄｉａｎ ｃｏｎｃｅｎｔｒａ— ｔｉｏｎｓ ｏｆ ｆｒｅｅ ｔｅｓｔｏｓｔｅｒｏｎｅ，ｓｅｌｅｃｔｅｄ ｍａｒｋｅｒｓ ｏｆ ｂｏｎｅ ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ， ３讨 论 ０ｓｔｅｏｐｒｏｔｅｇｅｒｉｎ ａｎｄ ｉｔｓ ｌｉｇａｎｄ ｓＲＡＮＫＩ ｉｎ ｏｂｅｓｅ ｐｏｓｔｍｅｎｏｐａｕｓａｌ 本研究采用非均衡竞争原理，将抗ＦＩＴＣ抗体包被在微孑Ｌ ｗｏｍｅｎ［Ｊ］．Ｐｏｓｔｅｐｙ Ｈｉｇ Ｍｅｄ Ｄｏｓｗ（Ｏｎｌｉｎｅ），２０１１，６５（４）：６５８— ６６７． 板中，加入ＦＩＴＣ－Ｔ类似物，校准品或样品，抗Ｔ抗体一ＨＲＰ，与 抗ＦＩＴＣ抗体相比，校准品或样品中的Ｔ与抗Ｔ抗体一ＨＲＰ结 合物的亲和力更高，形成Ｔ一抗Ｔ抗体－ＨＲＰ复合物和较少的 ［３１ Ｊｉｎ Ｈ，Ｑｉｕ ＷＢ，Ｍｅｉ ＹＦ，ｅｔ ａ１．Ｔｅｓｔｏｓｔｅｒｏｎｅ ａｌｌｅｖｉａｔｅｓ ｔｕｍｏｒ ｎｅｃ— ｒｏｓｉｓ ｆａｃｔｏｒ－ａｌｐｈａ—。ｍｅｄｉａｔｅｄ ｔｉｓｓｕｅ ｆａｃｔｏｒ ｐａｔｈｗａｙ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ ｄｏｗｎ—— 抗ＦＩＴＣ抗体一ＦＩＴＣ—Ｔ类似物一抗Ｔ抗体一ＨＲＰ复合物，去除游 离成分后加入ＨＲＰ的作用底物，于第５～１５分钟测定各加样 孔在４２５ ｎｍ处的ＲＬＵ。ＲＬｕ与样品Ｔ浓度呈负相关，根据 ＲＬＵ一浓度标准曲线即可获得样品中的Ｔ含量。 与传统的包被抗体标记抗原方法相比，本研究采用的抗 ＦＩＴＣ－ＦＩＴＣ系统可有效避免加样延迟时间对反应的影响。本 方法将抗原间接包被在微孔板上，样品或校准品中的抗原不与 已包被抗原反应，加入酶结合物后反应才开始，因此可避免加 样延迟时间对反应的影响。此外，间接包被法可以增加包被浓 度，使包被板的精密度优于直接包被法，ｃＶ＿批自最小可达 ３．５７ ，Ｃｖ批目小于５ 。应用ＦＩＴＣ－抗ＦＩＴＣ放大系统具有诸 多优点：ＦＩＴＣ易与抗原结合，标记率高，标记物易于分离； ＦＩＴＣ标记物十分稳定，保证了ＦＩＴＣ－抗ＦＩＴＣ系统的稳定性。 ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ ｖｉａ ｓｕｐｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ｎｕｃｌｅａｒ ｆａｃｔｏｒ－ｋａｐｐａ Ｂ ｉｎ ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ ｃｅｌｌｓ［Ｊ］．Ａｓｉａｎ Ｊ Ａｎｄｒｏｌ，２００９，１１（２）：２６６—２７１． ［４１芦志华，张宝刚，朱刚，等．血清睾酮水平对提高前列腺癌检出水 平临床意义的研究［Ｊ］．中国实验诊断学，２０１１，１５（７）：１１０２—１１０４． ［５］张静兰，陈磊，易浔飞，等．Ｃｅｎｔａｕｒ ＸＰ化学发光免疫系统检测雌 二醇的性能验证［Ｊ］．国际检验医学杂志，２０１１，３２（１４）：１６１５— １６１７． ［６］王德芝，张春明，杨福军，等．血清睾酮酶联免疫吸附分析试剂盒 的研制ＥＪ］．中国预防医学杂志，２００６，７（２）：１０２—１０４． －Ｉ７］莫军，杨丽珍，李景，等．化学发光法检测妇女血清睾酮及其临床 应用［Ｊ］．现代检验医学杂志，２００７，２２（２）：１０５—１０６． ［８］张东矗，王薇薇．化学发光酶免疫法与放射免疫法测定血清睾酮 的方法学评价［Ｊ］．检验医学，２００４，１９（１）：３２，３５． ［９］Ｇｈｏｓｈ Ｓ，Ｈｏｗｌｅｔｔ Ｍ，Ｂｏａｇ Ｄ，ｅｔ ａ１．Ｉｎｔｅｒｆｅｒｅｎｃｅ ｉｎ ｆｒｅｅ ｔｈｙｒｏｘｉｎｅ 本研究将抗ＦＩＴＣ抗体包被在微孔板上，再将Ｔ类似物标 记在ＦＩＴＣ上，从而可间接将Ｔ类似物包被在微孔板上，Ｔ类 似物与样品或校准品中Ｔ抗原竞争性结合抗Ｔ抗体。与传统 的将Ｔ直接包被在微孔板上比较，用Ｔ类似物竞争结合抗Ｔ 抗体一ＨＲＰ可显著提高检测灵敏度，因为Ｔ类似物、Ｔ抗原与 抗Ｔ抗体一ＨＲＰ具有不同的亲和力。 本研究建立的检测系统与罗氏检测系统的检测结果具有 良好的相关性（ｒ一０．９７３ ２）。后续将进一步扩大样本量并与 不同进口检测系统进行比对分析，对检测条件进行优化。 综上所述，本研究应用ＦＩＴＣ系统建立的非均衡竞争 （上接第６６７页） ｏｆ ｏｘｉｄａｔｉｖｅ ｓｔｒｅｓｓ ａｎｄ ｖａｓｃｕｌａｒ ｄｙｓｆｕｎｃｔｉｏｎ［Ｊ］．Ｐｏｓｔ ｇｒａｄ Ｍｅｄ Ｊ， ２００３，７９（９３０）：１９５－２００． ｉｍｍｕｎｏａｓｓａｙＥＪ］．Ｅｕｒ Ｊ Ｉｎｔｅｒｎ，１９（２）：２２１－２２２． ［１０１ Ｙａｎｇ Ｈ，Ｌｏｕ Ｃ，Ｘｕ Ｍ，ｅｔ ａ１．Ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｏｎ ｏｆ ｆｏｌａｔｅ—ｃｏｎｊｕｇａｔｅｄ ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｔ ｓｉｌｉｃａ ｎａｎｏｐａｒｔｉｃｌｅｓ ｆｏｒ ｔａｒｇｅｔｉｎｇ ｄｅｌｉｖｅｒｙ ｔｏ ｆｏｌａｔｅ ｒｅ— ｃｅｐｔｏｒ—ｐｏｓｉｔｉｖｅ ｔｕｍｏｒｓ ａｎｄ ｔｈｅｉｒ ｉｎｔｅｒｎａｌｉｚａｔｉｏｎ ｍｅｃｈａｎｉｓｍ［Ｊ１．Ｉｎｔ Ｊ Ｎａｎｏｍｅｄｉｃｉｎｅ，２０１１，６（２１）：２０２３—２０３２． ［１１］蔡文琴，王伯云．实用免疫细胞化学与核酸分子杂交技术［Ｍ］．成 都：四川Ｉ科技出版社，１９９４：４５—６０． ［１２１董雪，钟青萍，黄安诚，等．河豚毒素直接竞争Ｅｌ ＩＳＡ检测方法的 研究［Ｊ］．现代食品科技，２００９，２５（８）：９７７—９８１． （收稿日期：２０１１．１ｌ－０８） Ｒａｓ，２００６，６９（１）：３６—４５． ［１２］欧阳春，赵秋玲．７０例急性脑梗死患者ＯＸ－Ｉ ＤＩ 及Ｓ－ＩＯＯＢ蛋白监 测分析［Ｊ］．检验医学与临床，２００９，６（２０）：１７０３—１７０４． ［１３］王金松．血浆氧化低密度脂蛋白、白细胞介素６水平与急性脑梗 ［１０１ Ｓａｋｕｒａｉ Ｋ，Ｓａｗａｍｕｒａ Ｔ．Ｓｔｒｅｓｓ ａｎｄ ｖａｓｃｕｌａｒ ｒｅｓｐｏｎｓｅｓ：ｅｎｄｏｔｈｅｌｉ— ａｌ ｄｙｓｆｕｎｃｔｉｏｎ ｖｉａ Ｌｅｅｔｉｎ－ｌｉｋｅ ｏｘｉｄｉｚｅｄ ｌｏｗ－ｄｅｎｓｉｔｙ ｌｉｐｏｐｒｏｔｅｉｎ ｒｅ— 死的相关性研究［Ｊ］．国际检验医学杂志，２０１０，３１（７）：７３９—７４０． ｃｅｐｔｏｒ一１：ｃｌｏｓｅ ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐｓ ｗｉｔｈ ｏｘｉｄａｔｉｖｅ ｓｔｒｅｓｓ［Ｊ］．Ｊ Ｐｈａｒｍａｃｏｌ Ｓｃｉ，２００３，９１（３）：１８２—１８６． ［１４３方晓霞，周珂．血浆氧化低密度脂蛋白、高敏Ｃ反应蛋白与急性脑 梗死的相关性研究［Ｊ］．武汉大学学报：医学版，２００９，３Ｏ（２）：２３８— ２４】． ［１１］Ｍｅｈｔａ ＪＫ，Ｃｈｅｎ Ｊ，Ｈｅｒｍｏｎａｔ ＰＩ ，ｅｔ ａ１．Ｌｅｃｔｉｎ—ｌｉｋｅ ｏｘｉｄｉｚｅｄ ｌｏｗ— ｄｅｎｓｉｔｙ ｌｉｐｏｐｒｏｔｅｉｎ ｒｅｃｅｐｔｏｒ一１（ＬＯＸ一１）：Ａ ｃｒｉｔｉｃａｌ ｐｌａｙｅｒ ｉｎ ｔｈｅ ｄｅ— ｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ｏｆ ａｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒｏｓｉｓ ａｎｄ ｒｅｌａｔｅｄ ｄｉｓｏｒｄｅｒｓ［Ｊ］．Ｃａｒｄｉｏｖａｓｃ （收稿日期：２０１１－１０—０８）
