——显微镜下观察叶绿体的方法，显微镜下观察线粒体的方法
前情提要：
关键词：叶绿体、线粒体、健那绿 难度系数：★★★ 重要程度：★★★★ 基础回顾：
考点内容 要求 考纲解读 1、理解显微镜下观察叶绿体的方法 观察线粒体和叶绿体 Ⅱ 2、理解显微镜下观察线粒体的方法 考点一览：显微镜下观察线粒体和叶绿体 1． 实验原理
（1）叶绿体呈绿色、扁平的椭球形或球形，不需染色，制片后直接观察。 （2）线粒体呈无色，有短棒状、圆球状、线形、哑铃形等，用健那绿染成蓝绿色后制片
观察。 2． 实验步骤 （1）观察叶绿体
（2）观察线粒体
技能方法：
1． 观察叶绿体时，临时装片中的材料要随时保持有水状态的原因
保持有水状态以保证叶绿体的正常形态，并能悬浮在细胞质基质中，否则，细胞失水收缩，将影响对叶绿体形态的观察。
2． 观察线粒体的实验要滴加健那绿染液的原因
健那绿是将活细胞中线粒体染色的专一性染料，可使细胞中的线粒体呈现蓝绿色，而细胞质接近无色，从而在高倍显微镜下可以观察线粒体的分布和形态。
3、与叶绿体和线粒体实验有关注意事项 （1）要漱净口腔，防止杂质对观察物像的干扰。
（2）用菠菜叶稍带些叶肉的下表皮为实验材料的原因：靠近下表皮的叶肉为栅栏组织，叶绿体大而排列疏松，便于观察；带叶肉是因为表皮细胞不含叶绿体。
（3）叶绿体在弱光下以椭球形的正面朝向光源，便于接受较多的光照；在强光下则以侧面朝向光源，以避免被灼伤。
（4）盖盖玻片时，一定要缓慢且与载玻片成45°夹角，盖玻片一侧先接触液滴，防止装片下产生气泡。
【误区警示】走出叶绿体、线粒体观察实验的“5”个误区
（1）观察线粒体应选择人体或动物细胞或植物体无色部位细胞，不能选择绿色组织细胞。
（2）观察线粒体与叶绿体均需保持细胞活性状态。 （3）观察叶绿体时需保持叶片有水状态，防止失水。
（4）制作观察线粒体的临时装片时，是滴一滴健那绿染液于载玻片中央用于染色，而不是滴一滴生理盐水。
（5）叶绿体不仅随细胞质的流动而流动，还随光照方向的改变而旋转，一般叶绿体以正面朝向光源，以利于接受更多光照。
【课堂巩固】
1．下列关于用高倍显微镜观察叶绿体和线粒体的实验中，说法不正确的是（ ） A．观察叶绿体时，可以用菠菜做实验材料，但是必须撕取稍带些叶肉的下表皮细胞 B．不能用菠菜叶做实验材料来观察线粒体，因为菠菜叶为绿色，影响了对实验现象的观察 C．可以用人的口腔上皮细胞做材料观察线粒体 D．健那绿可使线粒体染成灰绿色
【答案】D
【解析】高倍显微镜观察叶绿体和线粒体的实验时，可用菠菜做实验材料观察叶绿体（但是必须撕取稍带些叶肉的下表皮细胞），但不能用来观察线粒体（因为菠菜叶为绿色，干扰实验现象）；可用人的口腔上皮细胞做材料观察线粒体，该实验需要用健那绿染液对线粒体进行染色，使线粒体呈蓝绿色。故选D。
2．检测试剂或染色剂在生物学实验中具有重要作用，下列叙述中错误的是（ ） A．在脂肪的检测实验中，苏丹Ⅲ染液将脂肪染成橘黄色 B．在观察线粒体的实验中，健那绿染液将线粒体染成蓝绿色
C．在探究酵母菌细胞呼吸实验中，酸性重铬酸钾与酒精反应呈现灰绿色 D．在观察植物细胞有丝分裂的实验中，碱性吡罗红可将染色体染成红色
【答案】D
3．下列有关“用高倍镜观察叶绿体和线粒体”实验的叙述中，正确的是（ ）
A．观察叶绿体和线粒体都要用健那绿染色 B．用健那绿给活细胞染色时会杀死活细胞 C．观察叶绿体时必须使细胞处于有水状态 D．高倍镜下可看到短棒状或哑铃形的叶绿体
【答案】C
【解析】叶绿体本身就是绿色的，不用染色就能观察，线粒体需要用健那绿染成蓝绿色才能观察，A项错误；健那绿染液是将活细胞中线粒体染色的专一性染料，不会杀死细胞，B项错误；观察叶绿体时必须使细胞处于有水状态，以保证叶绿体的正常形态，并能悬浮在细胞质基质中，否则细胞失水收缩，将影响叶绿体形态的观察，故C项正确；高倍镜下可看到呈绿色、扁平的椭球形或球形的叶绿体，D项错误。
4．下列关于“用高倍显微镜观察叶绿体和线粒体”的实验说法，错误的是（ ） A．健那绿是一种活细胞染料，几乎不损伤细胞
B．高倍镜下，可看到绿色、扁平的椭球形或球形的叶绿体 C．健那绿染液可将细胞质染成蓝绿色 D．藓类叶片可直接放到载玻片上观察叶绿体
【答案】C
5．下列关于实验的说法正确的是（ ）
A．“用高倍镜观察叶绿体和线粒体”实验中，叶绿体和线粒体都不需染色 B．叶绿体多呈绿色的球形或椭球形，但黑藻的叶绿体呈带状螺旋分布 C．无关变量是对实验结果没有影响的因素，所以设计实验时可以不用考虑
D．在“观察DNA和RNA在细胞中的分布”实验中，加入8%盐酸的目的包括使DNA和蛋白质分开
【答案】D
【解析】叶绿体中含有色素，不需要染色，而线粒体需要用甲基绿染色，故A错误；叶绿体呈带状螺旋分布的是水绵中的叶绿体，而不是黑藻的，故B错误；无关变量对实验结果也会造成影响，因而实验过程中要保持无关变量相同且为适宜条件，故C错误；在观察DNA和RNA在细胞中的分布的实验中，盐酸能够改变细胞膜的通透性，加速染色剂进入细胞，同时使染色休中的DNA和蛋白质分离，有利于DNA与染色剂结合，故D正确。
6． 用高倍显微镜观察黑藻叶片细胞，正确的结论是（ ）
A．叶绿体在细胞内是固定不动的 B．叶绿体在细胞内是均匀分布的 C．叶绿体的存在是叶片呈绿色的原因D．叶肉细胞含有叶绿体，不含线粒体 【答案】C
【解析】黑藻是高等植物，其叶肉细胞中含有叶绿体，利于光合作用的进行。叶绿体在细胞内分布不均匀；叶绿体在细胞内不断运动，当光照较弱时，它们会朝光照方向聚集；光照强时，会远离光源，且温度适当升高、水分含量越多、新陈代谢越强，叶绿体的运动越快；A、B两项错误；叶绿体中含有叶绿素，使叶片呈现绿色，C项正确；黑藻主要进行有氧呼吸，叶肉细胞内含有线粒体，D项错误。
【课后提升】
1．下列关于用高倍镜观察人的口腔上皮细胞线粒体的实验的说法，不正确的是（ ）
A．牙签消毒、实验前漱口都是为了保证该实验的准确性
B．制作装片时在载玻片上滴一滴1．9%的NaCl溶液，目的是维持口腔上皮细胞的正常形态
C．在高倍显微镜下观察可以看到活细胞的线粒体呈现蓝绿色，而细胞质接近无色
D．在电子显微镜下观察可以看到线粒体有2层磷脂分子层
2．只有在保持细胞活性的条件下，才能显示细胞中某物质或结构的实验是
（ ）
A．苏丹Ⅲ染色观察花生种子子叶细胞中的脂肪 B．龙胆紫染色观察洋葱根尖分生区细胞的有丝分裂 C．健那绿（詹纳斯绿B）染色观察动物细胞中的线粒体
D．甲基绿、吡罗红（派洛宁）染色观察动物细胞中的DNA和RNA
3．将有关生物材料直接制成临时装片，在普通光学显微镜下可以观察到的现象是
（ ）
A．菠菜叶片下表皮保卫细胞中具有多个叶绿体B．花生子叶细胞中存在多个橘黄色脂肪颗粒
C．人口腔上皮细胞中线粒体数目较多 D．紫色洋葱鳞片叶外表皮细胞中细胞核清晰可见
4．观察与实验是生物科学研究中的重要手段。某同学用电子显微镜观察玉米根尖分生区细胞后得出如下结论，不正确的是（ ）
A．线粒体中的内膜向内折叠形成嵴 B．内质网是细胞内联系最广的一种生物膜
C．细胞中具有双层膜的结构有线粒体、叶绿体和核膜 D．核糖体分布在内质网和细胞质基质中
5．下列有关中学生物学实验材料、试剂、过程等方面的叙述，不正确的是（ ） A．“观察植物细胞质壁分离和复原”实验中，不能用根尖分生区细胞代替表皮细胞 B．“用高倍显微镜观察叶绿体和线粒体”实验中，线粒体需要用健那绿染液染色 C．观察DNA、RNA的分布实验，可选洋葱内表皮细胞做材料 D．可用溴麝香草酚蓝水溶液来探究酵母细胞呼吸作用的类型
6．下列有关实验的描述错误的是（ ）
A．甘蔗、甜菜等不适宜作为还原糖的鉴定实验材料是因为其细胞中还原糖含量较少 B．观察植物细胞质壁分离和复原实验时只用低倍镜即可
C．观察植物细胞的有丝分裂实验中，盐酸和酒精混合液可使细胞相互分离开来 D．用高倍镜观察叶绿体和线粒体时可选用根尖作为实验材料 7．下列与实验有关的叙述，正确的是（ ）
A．人的口腔上皮细胞经处理后被甲基绿染色，其细胞核呈绿色 B．剪取大蒜根尖分生区，经染色在光镜下可见有丝分裂各时期 C．叶绿体色素在层析液中的溶解度越高，在滤纸上扩散就越慢 D．在光镜的高倍镜下观察新鲜菠菜叶装片，可见叶绿体的结构
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