植物生长抑制剂对万寿菊镉积累和化学形态的影响

农业环境科学学报２０１０，２９【２）：２５８－２６３　Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ａｇｒｏ—Ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔ　Ｓｃｉｅｎｃｅ　植物生长抑制剂对万寿菊镉积累和化学形态的影响　张银秋　，一，台崇帆ｓ，李培军　，冯　倩　一，杜艳玲　，一，赵１０００４９；３．辽宁省实验中学，沈阳１１００３１）　青　一，董殿波１，２　（１．中国科学院沈阳应用生态研究所，中国科学院陆地生态过程重点实验室，沈阳１１００１６；２．中国科学院研究生院，北京　摘要：通过水培实验研究了细胞分裂抑制剂（青鲜素ＭＨ）和蛋白合成抑制剂（放线菌酮ＣＨＩ）对万寿菊镉积累及化学形态的影　响。结果表明，在溶液Ｃｄ浓度为０．１　ｍｇ・Ｌ　的条件下，投加浓度为２、４　ｍｍｏｌ・Ｌ　青鲜素及３、６　ｖ￣ｍｏｌ・Ｌ－　放线菌酮显著抑制了万寿　菊的相对生长速率及地上部镉含量，另外两种抑制剂也降低了万寿菊地上部可溶性蛋白含量，但对叶绿素ａ，ｂ及总叶绿素含量并　无显著影响，证明细胞分裂及蛋白合成过程直接影响着万寿菊地上部镉积累。通过采用逐步提取法对万寿菊体内镉的化学存在形　态分析，表明在单独ｃｄ处理条件下万寿菊体内移动性较差的醋酸提取态及ＮａＣ１提取态镉占有较高比例，其中地上部两种结合态　镉约占万寿菊地上部总镉量的６８％，而施加植物生长抑制剂后万寿菊地上部两种结合态镉含量显著降低，放线菌酮处理下仅为　３１％，进一步证实镉主要与万寿菊体内蛋白质等物质结合后才能在其体内长久固定，否则不能在其体内发生累积。　关键词：镉积累；生长速率；细胞分裂；蛋白质合成；化学形态　中图分类号：Ｘ５０３．２３３　文献标志码：Ａ　文章编号：１６７２～２０４３（２０１Ｏ）０２—０２５８—０６　Ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　Ｐｌａｎｔ　Ｇｒｏｗｔｈ　Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ　ｏｎ　Ａｃｃｕｍｕｌａｔｉｏｎ　ａｎｄ　Ｃｈｅｍｉｃａｌ　Ｆｏｒｍ　ｏｆ　Ｃｄ　ｉｎ　Ｔａｇｅｔｅｓ　ｅｒｅｃｔａ　Ｌ．　ＺＨＡＮＧ　Ｙｉｎ—ｑｉｕ　，ＴＡＩ　Ｃｈｏｎｇ—ｆａｎ　，ＬＩ　Ｐｅｉ－ｊｕｎ　，ＦＥＮＧ　Ｑｉａｎ　，ＤＵ　Ｙａｎ－ｌｉｎｇ　，ＺＨＡＯ　Ｑｉｎｇ　，ＤＯＮＧ　Ｄｉａｎ－ｂｏ　０　（１．Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ　ｏｆＡｐｐｌｉｅｄＥｃｏｌｏｇｙ，ＣｈｉｎｅｓｅＡｃａｄｅｍｙ　ｏｆＳｃｉｅｎｃｅｓ，Ｓｈｅｎｙａｎｇ　１１００１６，Ｃｈｉｎａ；２．Ｇｒａｄｕａｔｅ　Ｓｃｈｏｏｌ　ｏｆＣｈｉｎｅｓｅＡｃａｄｅｍｙ　ｏｆＳｃｉｅｎｃｅｓ，　Ｂｅｉｊｉｎｇ　１０００４９，Ｃｈｉｎａ；３．Ｌｉａｏｎｉｎｇ　Ｐｒｏｖｉｎｃｅ　Ｓｈｉｙａｎ　Ｈｉｇｈ　Ｓｃｈｏｏｌ，Ｓｈｅｎｙａｎｇ　１　１００３１，Ｃｈｉｎａ）　Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ａ　ｈｙｄｒｏｐｏｎｉｃ　ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ　ｗａｓ　ｃａｒｒｉｅｄ　ｏｕｔ　ｔｏ　ｓｔｕｄｙ　ｔｈｅ　ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　ｃｅｌｌ　ｄｉｖｉｓｉｏｎ　ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ（Ｍａｌｅｉｃ　ｈｙｄｒａｚｉｄｅ　ＭＨ）ａｎｄ　ｐｒｏｔｅｉｎ　ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ　ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ（Ｃｙｅｌｏｈｅｘｉｍｉｄｅ　ＣＨＩ）ｏｎ　Ｃｄ　ａｃｃｕｍｕｌａｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｃｈｅｍｉｃａｌ　ｆｏｒｍｓ　ｏｆ　Ｃｄ　ｉｎ　Ｔａｇｅｔｅｓ　ｅｒｅｃｔａ　Ｌ．Ｗｈｅｎ　０，２，４　ｍｍｏｌ・Ｌ～ＭＨ　ａｎｄ　０，３，６　ｐ￣ｍｏｌ・Ｌ一　ＣＨ１　ｗｅｒｅ　ａｄｄｅｄ　ｔｏ　０．１　ｍｇ‘Ｌ～Ｃｄ　ｓｏｌｕｔｉｏｎ　ｆｏｒ　３　ｄａｙｓ．ｔｈｅ　ｒｅｌａｔｉｖｅ　ｇｒｏｗｔｈ　ｒａｔｅ　ｏｆ　Ｔａｇｅｔｅｓ　ｅｒｅｃｔａ　Ｌ．ｗａｓ　ｓｉｇｎｉｉｆｃａｎｔｌｙ　ｉｎｈｉｂｉｔｅｄ　ｂｙ　ｔｈｅ　ｔｗｏ　ｇｒｏｗｔｈ　ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ，ａｎｄ　Ｃｄ　ｃｏｎｔｅｎｔｓ　ｉｎ　ｓｈｏｏｔｓ　ｏｆ　Ｔａｇｅｔｅｓ　ｅｒｅｃｔａ　Ｌ．ｕｎｄｅｒ　ＭＨ　ｏｒ　ＣＨＩ　ｔｒｅａｔｍｅｎｔ　ｗｅｒｅ　３．１　ｍｇ‘ｋｇ一　ｏｒ　２．２　ｍｇ‘ｋｇ～，ｂｏｔｈ　ｏｆ　ｗｈｉｃｈ　ｗｅｒｅ　ｏｂｖｉｏｕｓｌｙ　ｄｅｃｒｅａｓｅｄ　ａｓ　ｃｏｍｐａｒｅｄ　ｗｉｔｈ　ｃｏｎｔｒｏｌ，ｔｈｅ　ｓｏｌｕｂｌｅ　ｐｒｏｔｅｉｎ　ｃｏｎｔｅｎｔｓ　ｏｆ　Ｔａｇｅｔｅｓ　ｅｒｅｃｔａ　Ｌ．ｗｅｒｅ　ａｌｓｏ　ｄｅｃｒｅａｓｅｄ　ｕｎｄｅｒ　ｔｈｅ　ｐｌａｎｔ　ｇｒｏｗｔｈ　ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ　ｔｒｅａｔｍｅｎｔｓ，ｂｕｔ　ｔｏｔａｌ　ｃｈｌｏｒｏｐｈｙｌｌ　ｃｏｎｔｅｎｔ，Ｃｈｌｏｒｏｐｈｙｌｌ　ａ，ｃｈｌｏｒｏｐｈｙｌｌ　ｂ，ａｎｄ　Ｃｈｌｏｒｏｐｈｙｌｌ　ａ／ｂ　ｖａｌｕｅ　ｉｎ　ｌｅａｖｅｓ　ｏｆ　Ｔａｇｅｔｅｓ　ｅｒｅｃｔａ　Ｌ．ｗｅｒｅ　ｎｏｔ　ａｆｆｅｃｔｅｄ．ｉｎｄｉｃａｔｉｎｇ　ｔｈａｔ　Ｃｄ　ａｃｃｕｍｕｌａｔｉｏｎ　ｉｎ　ｓｈｏｏｔｓ　ｏｆ　Ｔａｇｅｔｅｓ　ｅｒｅｃｔａ　Ｌ．ｗａｓ　ｍａｉｎｌｙ　ａｆｆｅｃｔｅｄ　ｂｙ　ｃｅｌｌ　ｄｉｖｉｓｉｏｎ　ａｎｄ　ｐｒｏｔｅｉｎ　ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ．Ｂｙ　ｕｓｉｎｇ　ｓｅｑｕｅｎｔｉａｌ　ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ．ａｂｏｕｔ　６８％ｏｆ　ｔｈｅ　ｔｏｔａｌ　Ｃｄ　ｉｎ　１ｅａｖｅｓ　ｏｆ　Ｔａｇｅｔｅｓ　ｅｒｅｃｔａ　Ｌ．ｗａｓ　ｆｏｕｎｄ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　ｏｆ　１　ｍｏ卜Ｌ　ＮａＣ１　ａｎｄ　２％ＨＡｃ　ｉｎ　０．１　ｍｇ・ｋｇ～Ｃｄ　ｓｏｌｕｔｉｏｎ，ｓｕｇｇｅｓｔｉｎｇ　ｔｈａｔ　ｐｅｃｔａｔｅｓ　ａｎｄ　ｐｒｏｔｅｉｎ　ｉｎｔｅｇｒａｔｅｄ　Ｃｄ（ｅｘｔｒａｃｔｅｄ　ｂｙ　１　ｍｏｌ・Ｌ－　ＮａＣ１）ａｎｄ　ｕｎｄｉｓ—　ｓｏｌｖｅｄ　Ｃｄ　ｐｈｏｓｐｈａｔｅ（ｅｘｔｒａｃｔｅｄ　ｂｙ　２％ＨＡＣ）ｉｎ　Ｔａｇｅｔｅｓ　ｅｒｅｃｔａ　Ｌ．ｗｅｒｅ　ｍｕｃｈ　ｈｉｇｈｅｒ　ｔｈａｎ　ｏｔｈｅｒ　ｏｒｆｍｓ　ｏｆ　Ｃｄ，ｂｕｔ　ｔｈｅ　ｔｗｏ　ｏｆｍｓｒ　ｏｆ　Ｃｄ　ａｓ　ｍｅｎ—　ｔｉｏｎｅｄ　ａｂｏｖｅ　ｗｅｒｅ　ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ　ｄｅｃｒｅａｓｅｄ　ｗｈｅｎ　ｐｌａｎｔ　ｇｒｏｗｔｈ　ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ　ｗｅｒｅ　ａｄｄｅｄ　ｔｏ　ｔｈｅ　ｓｏｌｕｔｉｏｎ，ｉｎｄｉｃａｔｅｄ　ｔｈａｔ　ｔｈｅ　ｌｏｎｇ—ｔｅｒｍ　ｉｆｘａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｃｄ　ｉｎ　Ｔａｇｅｔｅｓ　ｅｒｅｃｔａ　Ｌ．ｏｃｃｕｒｒｅｄ　ｗｈｅｎ　Ｃｄ　ｉｎｔｅｇｒａｔｅｄ　ｗｉｔｈ　ｐｒｏｔｅｉｎ　ｅｔ　ａ１．Ｃｏｎｔｒａｒｉｌｙ，Ｃｄ　ａｃｃｕｍｕｌａｔｉｏｎ　ｉｎ　ｓｈｏｏｔｓ　ｏｆ　Ｔａｇｅｔｅｓ　ｅｒｅｃｔａ　Ｌ．ｗｏｕｌｄ　ｎｏｔ　ｈａｐ—　ｐｅｎ・　Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：Ｃｄ　ａｃｃｕｍｕｌａｔｉｏｎ；ｐｌａｎｔ　ｇｒｏｗｔｈ　ｒａｔｅ；ｃｅｌｌ　ｄｉｖｉｓｉｏｎ；ｐｒｏｔｅｉｎ　ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ；ｃｈｅｍｉｃａｌ　ｆｏｒｍ　收稿日期：２００９—０７－０８　基金项目：国家自然科学基金面上项目（２０９７７０９５）；中国科学院陆地生态过程重点实验室基金（Ｋｅｙ　Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ　ｏｆ　Ｔｅｒｒｅｓｔｒｉａｌ　Ｅｃｏｌｏｎｇｉｅａｌ　Ｐｒｏｃｅｓｓ　ＣｈｉｎｅｓｅＡｃａｄｅｍｙ　ｏｆＳｃｉｅｎｃｅｓ）；国家基金重点项目（４０９３０７３９）；中国科学院知识创新工程重要方向项目（ｋｚｃｘ２一ｙｗ一４４６）　作者简介：张银秋（１９８Ｏ一），女，辽宁盖州人，博士研究生，主要从事植物积累重金属的机理研究。Ｅ—ｍａｉｌ：ｚｈａｎｇｙｑ９９２００３＠ｙａｈｏｏ．ｔｏｍ．ｃｎ　通讯作者：李培军Ｅ—ｍａｉｌ：ｌｉｐｅｉｊｕｎ＠ｉａｅ．ａｃ．ｃｎ　第２９卷第２期　农　业　环　境　科　学　学　报　２５９　镉（Ｃｄ）被认为是一种对地球上所有生命具有潜　在危害的重金属，不同种类植物积累镉的能力也有所　不同ｆ１］。大量研究表明，不同种类植物对镉胁迫的适应　１材料和方法　１．１供试材料　有明显的差异【２Ｊ，这与植物对镉的吸收、转运、累积和　体内的分布有种内和种间的差异有关嘲。研究植物对　供试植物万寿菊（Ｔａｇｅｔｅｓ　ｅｒｅｃｔａ　Ｌ．）种子购于沈　阳农业大学。　１．２研究方法　镉的积累及耐性机理，对于污染环境的治理与保护具　有十分重要的意义。　植物对重金属的耐性主要通过金属排斥和金属　种子经２％Ｈ　０　消毒１０　ｍｉｎ后，用去离子水冲　洗，播种于装有蛭石的盆中，发芽后以Ｈｏａｇｌａｎｄ营养　富集来实现，而后者主要指重金属在植物体内以不具　液浇灌，待长出２～４片真叶后选取长势一致的苗移人　生物活性的形态存在，如与细胞壁结合，进入液泡或　与有机酸和蛋白质络合等　。金属硫蛋白（ＭＴｓ）是目　前发现在动物体内能够与ｃｄ结合的一类低分子量　富含半胱氨酸的蛋白质　］，植物体内是否存在这类蛋　白质仍不清楚。植物络合素作为一类具有很强络合金　属能力的小分子多肽，在植物重金属解毒机制中起着　十分重要的作用ｌ　６ｌ，但其仍不能从根本上解决植物对　重金属富集生理学问题。国内外学者采用各种方法对　植物体内的重金属分布特征及结合形态进行了研究，　试图以此寻找植物对重金属耐性和富集的生理基础。　氮、磷、硫作为植物生长必须的物质对植物镉积累起　着重要的作用。大量实验表明外部环境中这些元素及　其化合物的变化都会不同程度地影响植物体内的镉　含量　，说明植物体内这些元素及其化合物参与的某　种生理代谢过程影响着植物对的镉积累。而Ｓａｂｒｅｅｎ　与Ｓｕｇｉｙａｍａ［　ｏｌ通过对１０种草的研究表明，植物对镉　的耐性与不同植物之间的相对生长速率存在一定的　平衡关系，即相对生长速率高的植物对镉的忍耐性较　差，而相对生长速率较低的种类由于其镉主要集中在　根部，植物地上部对镉的耐性较强。同时此研究也指　出，叶片具有较高分裂活性的植物更易于受到镉的伤　害，由此暗示植物的生长代谢过程对植物镉积累起着　一定的作用。　青鲜素（ＭＨ）是农业中广泛使用的一种植物生　长抑制剂，研究表明，青鲜素能被优先输送到植物的　分生组织进而打破有丝分裂，破坏顶端优势。另外，　青鲜素可通过影响细胞分裂Ｓ期而影响ＤＮＡ复制，　诱导染色体畸变，因此被作为染色体断裂剂用于实　验研究　”。放线菌酮（ＣＨＩ）则为广泛使用的真核细胞　蛋白质合成抑制剂ｌＩ２１。本文以万寿菊（Ｔａｇｅｔｅｓ　ｅｒｅｃｔａ　Ｌ）作为实验对象，通过外界施加植物生长抑制物质　青鲜素和放线菌酮分别抑制细胞分裂和蛋白质合成　过程，研究植物生长代谢过程对镉的累积及分布的　影响。　容积为４００　ｍＬ的陶瓷罐中，每罐一株，装３００　ｍＬ营　养液，于光照培养箱中培养至３～４　ｇ，选取长势一致植　株称其鲜重，然后分对照组＋Ｃｄ，青鲜素＋Ｃｄ，放线菌　酮＋Ｃｄ共３组处理，每组３个重复。Ｃｄ以ＣｄＣ１　・　２．５Ｈ：０的形式加入，为使本实验中的Ｃｄ浓度更接近　于现实环境，将Ｃｄ浓度定为０．１　ｍｇ・Ｌ　㈣。青鲜素　（ＭＨ）浓度为２、４　ｍｍｏｌ・Ｌ～，放线菌酮（ＣＨＩ）浓度为３、　６　ｐ．ｍｏｌ・Ｌ～。培养３　ｄ后测全株鲜重，然后取根、茎、叶　测其干重，用于计算干物质积累量。另取３组处理，使　其Ｃｄ浓度为０．１　ｍｇ・Ｌ。，ＭＨ浓度为４　ｍｍｏｌ・Ｌ　，ＣＨＩ　浓度为３　Ｉｘｍｏｌ・Ｌ～，培养３　ｄ后，取根、茎、叶并测其鲜　重，样品用于镉含量、可溶性蛋白含量、镉化学形态及　叶绿素含量分析。　１．３测定方法　相对生长速率（ＲＧＲ）按照下式计算：　ＲＧＲ＝（１ｎＦＷ２一ｌｎＦＷ１）／（ｔ２一ｔ１）【　卅　叶绿素采用９５％乙醇提取法　；可溶性蛋白采用　考马斯亮蓝法　。　镉形态分析采用化学试剂逐步提取法［１７Ｊ：８０％乙　醇主要提取硝酸盐、氯化物为主的无机盐及氨基酸盐　等；去离子水主要提取水溶性有机酸盐等；１　ｍｏｌ・Ｌ　的ＮａＣ１主要提取果胶酸盐、与蛋白质结合态或吸附　态的重金属等；２％醋酸主要提取难溶于水的重金属　磷酸盐；０．６　ｍｏｌ・Ｌ　盐酸主要提取草酸盐等；最后为　残留态。　１．４镉含量分析方法　样品经ＨＮＯｄＨＣＩＯ４　ｍｉｘｔｕｒｅ（４：１，Ｖ／Ｖ）消解后，用　火焰原子吸收分光光度计测定镉含量ｆｌ８］。　１．５数据分析　本实验采用Ｅｘｃｅｌ和ＳＰＳＳ１　１．５软件对数据进行　平均值计算和单因素方差分析。　２结果与分析　２．１植物生长抑制剂对万寿菊生长的影晌　２６０　张银秋等：植物生长抑制剂对万寿菊镉积累和化学形态的影响　２０１０年２月　表１表明，通过施加ＭＨ与ＣＨＩ，万寿菊根部及　地上部生物量与单独镉处理相比有所降低，但差异不　显著。而相对生长速率（ＧＲＧ）则较对照显著降低，并　且随着ＭＨ与ＣＨＩ浓度的增加而降低；另外，ＭＨ与　ＣＨＩ处理下根部可溶性蛋白未检出，但地上部可溶性　蛋白含量较对照显著降低（图１），而ＭＨ与ＣＨＩ对万　寿菊叶绿素的影响无显著差异（图２）。　表１　０．１　ｍｇ・Ｌ－　Ｃｄ处理条件下植物生长　抑制剂对万寿菊生长的影响　Ｔａｂｌｅ　Ｉ　Ｔｈｅ　ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　ｐｌａｎｔ　ｇｒｏｗｔｈ　ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ　ｏｎ　ｔｈｅ　ｒｇｏｗｔｈ　ｏｆ　Ｔａｇｅｔｅｓ　ｅｒｅｃｔａ　Ｌ．ｉｎ　０．１　ｍｇ‘Ｌ－　Ｃｄ　ｓｏｌｕｔｉｏｎ　　【皿唧　如　皿　嘲　避　图１　Ｏ．１　ｍｇ・Ｌ－‘Ｃｄ处理条件下植物生长抑制剂　对万寿菊可溶性蛋白含量的影响　Ｆｉｇｕｒｅ　１　Ｔｈｅ　ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　ｐｌａｎｔ　ｇｒｏｗｔｈ　ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ　ｏｎ　ｓｏｌｕｂｌｅ　ｐｒｏｔｅｉｎ　ｃｏｎｔｅｎｔ　ｏｆ　Ｔａｇｅｔｅｓ　ｅｒｅｃｔａ　Ｌ．ｉｎ　０．１　ｍｇ・Ｌ－　Ｃｄ　ｓｏｌｕｔｉｏｎ　Ｃｄ　Ｃｄ＋ＭＨ　Ｃｄ＋ＣＨＩ　图２　０．１　ｍｇ・Ｌ－　Ｃｄ处理条件下植物生长抑制剂　对万寿菊叶绿素含量的影响　Ｆｉｇｕｒｅ　２　Ｔｈｅ　ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　ｐｌａｎｔ　ｇｒｏｗｔｈ　ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ　ｏｎ　Ｃｈｌｏｒｏｐｈｙｌｌ　ｃｏｎｔｅｎｔ　ｏｆ　Ｔａｇｅｔｅｓ　ｅｒｅｃｔａ　Ｌ．ｉｎ　０．１　ｍｇ・Ｌ－’Ｃｄ　ｓｏｌｕｔｉｏｎ　２．２植物生长抑制剂对万寿菊镉积累的影响　镉处理条件下万寿菊不同部位对镉的积累量有　５　所不同（图３），不同部位镉含量依次为根＞茎＞叶，其　鲜重含量分别为７．０、６．９、６．３　ｍｇ・ｋｇ～。投加ＭＨ和　ＣＨＩ后，各部位的镉含量有所变化，其变化表现为地　上部镉含量较对照明显降低，根部则有所增加。叶片　镉含量变化最为明显，ＭＨ与ＣＨＩ处理叶片镉含量分　别为３．１和２．２　ｍｇ・ｋｇ～，较对照６－３　ｍｇ・ｋｇ　显著降低　（Ｐ＜０．０５）；茎部镉含量在各处理中也有所降低，但差　异不显著。　’龇　１０　面躅　钿　５　Ｏ　图３　０．１　ｍｇ・Ｌ－　Ｃｄ处理条件　植物生长抑制剂　对万寿菊镉积累的影响　Ｆｉｕｇｒｅ　３　Ｔｈｅ　ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　ｐｌａｎｔ　ｒｇｏｗｔｈ　ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ　ｏｎ　Ｃｄ　ａｃｃｕｍｕｌａｔｉｏｎ　ｉｎ　Ｔａｇｅｔｅｓ　ｅｒｅｃｔａ　Ｌ．ｉｎ　０．１　ｍｇ・Ｌ一　Ｃｄ　ｓｏｌｕｔｉｏｎ　２．３植物生长抑制剂对万寿菊镉化学形态的影响　植物生长抑制剂处理下万寿菊根、茎、叶中Ｃｄ　化学形态的结果见图４。　从图４可以看出，在正常含镉溶液中培养的万寿　菊的根、茎、叶中都有其主要的化学形态。叶中以醋酸　提取态、氯化钠提取态及盐酸提取态为其主要的化学　存在形态，其总含量约占８５％；茎中以氯化钠提取态、　醋酸提取态及残渣态为其主要化学存在形态，约占总　量的７３％；根中以氯化钠、醋酸及盐酸提取态为其主　要化学存在形态，约占总量的８６％。　当营养液中施加ＭＨ和ＣＨＩ后，根、茎、叶中Ｃｄ　主要化学存在形态出现明显的变化，主要表现为：叶　中醋酸提取态和氯化钠提取态镉所占比例明显降低，　盐酸及其余提取态镉含量有所增加，以ＣＨＩ作用最　为明显。具体表现为ＭＨ处理后醋酸提取态和氯化钠　提取态镉含量由原来的６８％降为６０％；而ＣＨＩ处理　下这两种提取态镉含量由６８％降为３　１％，含量显著　降低（Ｐ＜０．０１）。另外叶片中盐酸提取态、水溶态及残　渣态镉所占比例有所升高，ＭＨ处理下此３种形态镉　所占比例由２８．６％升高至３９％；ＣＨＩ处理下此比例由　臣４　第２９卷第２期　删姐　忸　∞　如　∞　∞　加　ｍ　Ｏ　∞　∞　∞　∞　∞　∞　∞　堡卿姐　陋　农　业　环　境　科　学　学　报　∞　∞　∞　∞　加　ｍ　０　∞　∞　∞　∞　∞　∞　∞　根　茎　叶　根　茎　叶　删如　根　茎　叶　、删妞　删啦求　∞　如　∞　如　∞　ｍ　Ｏ　∞　∞　∞　∞　∞　∞　∞　∞　∞　∞　∞　加　ｍ　０　∞　∞　∞　∞　∞　∞　∞　皿衄１　缸　妞　堡　根　口对照＋Ｃｄ　髓ＭＨ＋Ｃｄ　园ＣＨＩ＋Ｃｄ　茎　叶　图４　０．１　ｍｇ・Ｌ－。Ｃｄ处理条件下植物生长抑制剂对万寿菊镉化学形态的影响　Ｆｉｇｕｒｅ　４　Ｔｈｅ　ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆｐｌａｎｔ　ｇｒｏｗｔｈ　ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ　Ｏｉｌ　ｃｈｅｍｉｃａｌｆｏｒｍ　ｏｆＣｄ　ｉｎ　Ｔａｇｅｔｅｓ　ｅｒｅｃｔａＬ．ｉｎ　Ｏ．１　ｍｇ　Ｌ－　Ｃｄ　ｓｏｌｕｔｉｏｎ　２８．６％上升至６１．７％，并且差异达极显著。茎中变化趋　势与叶相似，即ＭＨ和ＣＨＩ处理下醋酸提取态和氯　化钠提取态含量有所降低，其他各形态镉含量均有所　增加。ＭＨ处理下根中氯化钠和醋酸态镉含量有所降　低，其中醋酸态镉含量显著降低（Ｐ＜０．０１），其他形态　均有所提高；ＣＨＩ处理下根中氯化钠提取态镉含量显　使用的真核细胞蛋白质合成抑制剂ｌｌ２１。有研究表明，　将植物暴露于０．１　ｍｇ・Ｌ　的低浓度Ｃｄ溶液中７　ｄ并　未对植物产生毒性　９Ｊ，因此本实验中单独Ｃｄ处理３　ｄ　并未对万寿菊生长产生抑制作用。当使用ＭＨ和ＣＨＩ　后，由于细胞分裂和蛋白质合成过程受阻，万寿菊生　长速率显著降低（表１），并且地上部可溶性蛋白含量　也随之降低（图１）；与此同时，万寿菊地上部镉含量　显著降低（图３），而万寿菊叶片中叶绿素ａ．ｂ及总叶　绿素含量并未随着施加植物生长抑制剂而发生明显　变化（图２）。表明万寿菊地上部镉积累与其细胞分裂　著降低，而醋酸提取态镉含量显著增加，其余各形态　镉均有所增加。　３讨论　青鲜素作为一种植物生长抑制剂其主要作用为　抑制有丝分裂并诱导染色体断裂【ｌ１】’放线菌酮为广泛　和蛋白质合成过程存在一定的关系，而植物的叶绿素　并未受到两种抑制剂的影响，说明本实验中光合作用　２６２　张银秋等：植物生长抑制剂对万寿菊镉积累和化学形态的影响　２０１０年２月　对抑制剂处理下万寿菊地上部镉积累基本无影响。由　此可以看出，细胞分裂及蛋白合成过程是万寿菊地上　部镉积累的主要原因，虽然ＭＨ不直接参与抑制蛋白　量大大减少，进一步证明万寿菊叶片中镉积累与蛋白　质合成有关，当叶片中蛋白质合成受阻时，万寿菊地　质的合成　，但其可以通过影响万寿菊地上部的组织　器官细胞分裂间接阻碍蛋白质的生成，从而使万寿菊　地上部镉积累降低。　大量资料表明，ｃｄ与生物体内的蛋白质之间存　在高度的亲和性，可以与其结合而使生物受害。Ｎｇ　上部镉含量也随之大量减少，其主要表现为蛋白质结　合态所占比例显著降低。其他结合态镉比例虽然有所　增加，但由于其有较高的移动性，并不能够在地上部　长久固定，因而不能够在植物体内累积，导致植物地　上部镉含量总体减少（图３）。施加抑制剂后，根部较　茎叶部镉化学形态的变化有所不同（图４）：ＭＨ和　等ｌ２１　研究发现，在一种贻贝Ｐｅｒｎａ　ｖｉｒｉｄｉｓ）体内大量的　镉与高分子量蛋白质（ＨＭＷ）结合，且其细胞溶质中　镉含量的增加与高分子量蛋白结合的镉含量增加呈　正相关。此外，细胞溶质当中的高分子量蛋白质是镉　最初的结合蛋白，之后镉才转移到金属硫蛋白从而达　到解毒的作用。Ｚｈａｎｇ等　研究了蚯蚓分泌物对西红　柿幼苗生长及镉积累的情况，结果表明蚯蚓分泌物能　够显著促进西红柿幼苗的生长及地上部的镉积累，其　原因可能与蚯蚓分泌物中含有ＩＡＡ等生长物质有　关，进而促进了西红柿幼苗生长及镉积累，并且叶片　中蛋白结合态镉含量较对照有所增加。以上均表明生　物对镉的积累与蛋白质之间存在着密不可分的关系。　而ＭＨ和ＣＨＩ处理下万寿菊根部镉含量与地上部相　反，即根部镉含量较对照有所增加。Ｓａｌｔ等　认为植物　根部吸收镉与地上部镉积累是两个相互独立的过程，　因此万寿菊根部镉含量的变化可能是由于其根部特　殊的生理代谢机制所导致。　许多学者用不同的化学试剂提取植物体内的重　金属，试图从研究重金属在植物体内的结合形态来揭　示植物对重金属的积累和耐性机制旧。一般认为，以　水溶性有机盐（水溶提取态）、醇溶性蛋白质和氨基酸　盐（乙醇提取态）结合态存在的镉具有较高的移动性，　而以重金属磷酸盐（ＨＡｃ提取态）、蛋白质结合态及果　胶酸盐（ＮａＣ１提取态）及草酸盐（ＨＣｌ提取态）结合态　存在的镉移动性较差ｒ４ｌ切。　本实验中，单独镉处理条件下万寿菊根、茎、叶中　蛋白结合态镉含量都占很大比例（图４），Ｋｔｉｐｐｅｒ等　利用扩展ｘ射线衍射试验发现在超积累植物Ｔｈｌａｓｐ￣　ｃａｅｒｕｌｅｓｃｅｎｓ体内幼叶及成熟叶片中的镉主要与Ｓ元　素结合，表明植物体内的镉主要与植物螯合素或者细　胞壁等物质结合，其中蛋白质作为植物体内富含巯基　的大分子化合物易于与镉结合，由于其活性不高，可　以使镉在植物体内发生累积。施用ＭＨ和ＣＨＩ后，叶　片中占优势含量的醋酸提取态及氯化钠提取态镉显　著降低（图４），即重金属磷酸盐和蛋白质结合态镉含　ＣＨＩ处理下虽然根部镉含量总体增加，但其增加的部　分主要是移动性较差的醋酸提取态、盐酸提取态及移　动．陛较强的结合态镉，究竟是由于地上部对镉积累的　减少致使根部镉大量累积，或者其他原因所致还有待　进一步研究。虽然根部可溶性蛋白含量未检出（图　１），但ＭＨ及ＣＨＩ处理下其蛋白质结合态镉含量并　未提高，并且根部蛋白结合态镉在单独镉处理条件下　也占有较高比例（图４），说明万寿菊根部镉积累与蛋　白合成也可能存在一定的关系。总之，万寿菊体内镉　积累与其生长代谢过程有着密切的关系，其中蛋白质　合成过程起着十分关键的作用。　参考文献　ｆ１】Ｊｏｈｎ　Ｍ　Ｋ，Ｖａｎ　Ｌａｅｒｈｏｖｅｎ　Ｃ　Ｊ．Ｄｉｆｅｒｅｎｔｉａｌ　ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ｃａｄｍｉｕｍ　ｏｎ　ｌｅｔｔｕｃｅ　ｖａｒｉｅｔｉｅｓ［Ｊ］．Ｅｎｖｉｒｏｎ　Ｐｏｌｌｕｔ，１９７６，４：７－１５．　［２］熊愈辉，杨肖娥．镉对植物毒害与植物耐镉机研究进展【Ｊ］．安徽农　业科学［ＪＪ＿２００６，３４（１３）：２９６９—２９７１．　ＸＩＯＮＧ　Ｙｕ－ｈｕｉ，ＹＡＮＧ　Ｘｉａｏ—ｅ．Ｒｅｖｉｅｗ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｔｏｘｉｃ　ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ｃａｄｍｉｍｎ　ｏｎ　ｐｌａｎｔｓ　ａｎｄ　ｔｈｅｉｒ　ｔｏｌｅｒａｎｔ　ｍｅｃｈａｎｉｓｍ［Ｊ］．如ｕｒｎａｌ　ｏｆＡｎｈｕｉ　Ａｇｒ／Ｓｃｉ，　２００６，３４（１３）：２９６９—２９７１．　［３】杨明杰，林成丞，杨肖娥．ｃｄ对不同种类植物生长和养分积累的影　响［Ｊ］．应用生态学报，１９９８，９（１）：８９—９４．　ＹＡＮＧ　Ｍｉｎｇ－ｊｉｅ，ＬＩＮ　Ｃｈｅｎｇ－ｃｈｅｎｇ，ＹＡＮＧ　Ｘｉａｏ－ｅ．Ｉｍｐｅｃｔ　ｏｆ　Ｃｄ　ｏｎ　ｇｒｏｗｔｈ　ａｎｄ　ｎｕｔｒｉｅｎｔ　ａｃｃｕｍｕｌａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｐｌａｎｔ　ｓｐｅｃｉｅｓ［Ｊ］．Ｃｈｉｎｅｓｅ　Ｊｏｕｒｎｄ　ｏｆＡｐｐｌｉｅｄ　Ｅｃｏｌｏｇｙ，１９９８；９（１）：８９－９４．　［４］周守标，徐礼生，吴龙华，等．镉和锌在皖景天细胞内的分布及化学　形态『Ｊ】．应用生态学报，２００８，１９（１　１）：２５１５—２５２０．　ＺＨＯＵ　Ｓｈｏｕ－ｂｉａｏ，ＸＵ　Ｌｉ－ｓｈｅｎｇ，ＷＵ　Ｌｏｎｇ－ｈｕａ，ｅｔ　１ａ．Ｓｕｂｅｅｌｌｕｌａｒ　ｄｉｓ—　ｔｒｉｂｕｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｃｈｅｍｉｃａｌ　ｆｏｒｍｓ　ｏｆ　Ｃｄ　ａｎｄ　Ｚｎ　ｉｎ　Ｓｅｄｕｍ　ｉｆｎｉａｎｕｍ［Ｊ］．Ｃｈｉ－　ｎｅｓｅ　Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆＡｐｐｌｉｅｄ　Ｅｃｏｌｏｇｙ，２００８，１９（１　１）：２５　１５—２５２０．　［５】Ｊｉａｎ　Ｌｕ，Ｔａｉｙｉ　Ｊｉｎ，Ｎｏｒｄｂｅｒｇ　Ｇ　Ｆ，ｅｔ　ａ１．Ｍｏｎｉｃａ　Ｎｏｒｄｂｅｒｇ　ｔｈｅ　ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｍｅｔａｌｌｏｔｈｉｏｎｅｉｎ（ＭＴ）ｇｅｎｅ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｉｎ　ｐｅｒｉｐｈｅｒａｌ　ｂｌｏｏｄ　ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅｓ　（ＰＢＬｓ）ａｓ　ａ　ｂｉｏｍａｒｋｅｒ　ｏｆ　ｃａｄｍｉｕｍ　ｅｘｐｏｓｕｒｅ［Ｊ］．ＢｉｏＭｅｔａｌｓ，２００４，１７：　５６９—５７０．　［６】严竞竞，刘伟，麻远，等．植物络合素分析方法进展［Ｊ】＿分析化学　评述与进展，２００５，３３（９）：１３３９—１３４４．　ＹＡＮＧ　Ｊｉｎｇ－ｊｉｎｇ，ＬＩＵ　Ｗｅｉ，ＭＡ　Ｙｕａｎ，ｅｔ　ａ１．Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔｓ　ｏｆ　ａｎａｌｙｔｉｃａｌ　ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ　ｏｆ　ｐｈｙｔ０ｃｈｅｌａｔｉｎｓ［Ｊ】．Ｃｈｉｎｅｓｅ　Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆＡ　ｎｄｆｌ＆ｄ　Ｃｈｅｍ～　ｉｓｔｒｙ，２００５，３３（９）：１３３９—１３４４．　第２９卷第２期　农　业　环　境　科　学　学　报　２６３　【７】王云，张海军，唐为忠，等．硫对镉胁迫下小麦幼苗生长和一些生　理特性的影响［Ｊ】．农业环境科学学报，２００８，２７（３）：１０２９—１０３２．　ＷＡＮＧ　Ｙｕｎ，ＺＨＡＮＧ　Ｈａｉ－ｊｕｎ，ＴＡＮＧ　Ｗｅｉ－ｚｈｏｎｇ，ｅｔ　ａ１．Ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　ｓｕｌｆｕｒ　ｏｎ　ｐｌａｎｔ　ｇｒｏｗｔｈ　ａｎｄ　ｓｏｍｅ　ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｉｃａｌ　ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓ　ｏｆ　ｗｈｅａｔ　ｓｅｅｄｌｉｎｇｓ　ｕｎｄｅｒ　ｃａｄｍｉｕｍ　ｓｔｒｅｓｓ［Ｊ］．Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆＡｇｒｏ－Ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔ　Ｓｃｉｅｎｃｅ，　２００８，２７（３）：１０２９—１０３２．　［８】李继光，林国林，杨春文，等．有机和无机氮对东南景天生长和镉积　累的影响比较［Ｊ】．农业环境科学学报，２００７，２６（１）：９９—１０４．　ＬＩ　Ｊｉ－ｇｕａｎｇ，ＬＩＮ　Ｇｕｏ－ｌｉｎ，ＹＡＮＧ　Ｃｈｕｎ－ｗｅｎ，ｅｔ　ａ１．Ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ｏｒｇａｎｉｃ　ａｎｄ　ｉｎｏｒｇａｎｉｃ　ｎｉｔｒｏｇｅｎ　ｏｎ　ｇｒｏｗｔｈ　ａｎｄ　ｃａｄｍｉｕｍ　ａｃｃｕｍｕｌａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｓｅｄｕｍ　ａｌｆｒｅｄｉｉ　Ｈａｎｃｅ［Ｊ］．Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆＡｇｏ－Ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔ　Ｓｃｉｅｎｃｅ，２００７，２６（１）：　９９—１ｏ４．　［９】杨志敏，郑绍健，胡霭堂，等．不同磷水平下植物体内镉的积累、化　学形态及生理特性［Ｊ】．应用与环境生物学报，２０００，６（２）：１２１－１２６．　ＹＡＮＧ　Ｚｈｉ—ｍｉｎ，ＺＨＥＮＧ　Ｓｈａｏ－ｊｉａｎ，ＨＵ　Ａｉ—ｔａｎｇ，ｅｔ　ａ１．Ａｃｃｕｍｕｌａｔｉｏｎ，　ｃｈｅｍｉｃａｌ　ｆｏｒｍｓ　ａｎｄ　ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｉｃａｌ　ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｃａｄｍｉｕｍ　ｉｎ　ｐｌａｎｔｓ　ａｆｆｅｃｔｅｄ　ｂｙ　ｐｈｏｓｐｈｏｒｕｓ［Ｊ］．Ｃｈｉｎ　ＪＡｐｐｌ　Ｅｎｖｉｒｏｎ，２０００，６（２）：１２１－１２６．　［１０１　Ｓａｂｒｅｅｎ　Ｓ，Ｓｕｇｉｙａｍａ　Ｓ．Ｔｒａｄｅ－ｏｆｆ　ｂｅｔｗｅｅｎ　ｃａｄｍｉｕｍ　ｔｏｌｅｒａｎｃｅ　ｎａｄ　ｒｅ１－　ａｔｉｖｅ　ｇｒｏｗｔｈ　ｒａｔｅ　ｉｎ　１０　ｇｒａｓｓ　ｓｐｅｃｉｅｓ［Ｊ］．Ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔａｌ　ａｎｄ　Ｅｘｐｅｒｉ—　ｅｍｎｔｌａ　Ｂｏｔｎａｙ，２００８，６３：３２７－３３２．　［１　１】Ｍａｒｃａｎｏ　Ｌ，Ｃａｒｒｕｙｏ　Ｉ，Ｄｅ１　Ｃａｍｐｏ　Ａ，ｅｔ　ａ１．Ｃｙｔｏｔｏｘｉｃｉｔｙ　ｎａｄ　ｍｏｄｅ　ｏｆ　ａｃ—　ｔｉｏｎ　ｏｆ　ｍａｌｅｉｅ　ｈｙｄｒａｚｉｄｅ　ｉｎ　ｒｏｏｔ　ｔｉｐｓ　ｏｆ　Ａ１１ｉｕｍ　ｃｅｐａ　Ｌ【Ｊ】．Ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔａｌ　Ｒｅｓｅａｒｃｈ，２００４，９４：２２１—２２６．　［１２］Ｐａｎｄａ　Ｋ　Ｋ，Ｐａｔｒａ　Ｊ，Ｐａｎｄａ　Ｂ　Ｂ．Ｐｅｒｓｉｓｔｅｎｃｅ　ｏｆ　ｃａｄｍｉｕｍ－ｉｎｄｕｃｅｄ　ａｄａｐ—　ｔｉｖｅ　ｒｅｓｐｏｎｓｅ　ｔｏ　ｇｅｎｏｔｉｘｉｃｉｔｙ　ｏｆ　ｍａｌｅｉｃ　ｈｙｄｒａｚｉｄｅ　ａｎｄ　ｍｅｔｈｙｌ　ｍｅｒｃｕｒｉｃ　ｃｈｌｏｒｉｄｅ　ｉｎ　ｒｏｏｔ　ｍｅｒｉｓｔｅｍ　ｃｅｌｌｓ　ｏｆＡＩｌｉｕｍ　ｃｅｐａ　Ｌ．：Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉｌａ　ｉｎｈｉｂｉ—　ｔｉｏｎ　ｂｙ　ｃｙｃｌｏｈｅｘｉｍｉｄｅ　ａｎｄ　ｂｕｔｈｉｏｎｉｎｅ　ｓｕｌｆｏｘｉｍｉｎｅ［Ｊ］．Ｍｕｔａｔｉｏｎ　Ｒｅ—　ｓｅａｒｃｈ，１９９７，３８９：１２９—１３９．　【１３］Ｓａｎｉｔ６　ｄｉ　Ｔｏｐｐｉ　Ｌ，Ｇａｂｂｒｉｅｌｌｉ　Ｒ．Ｒｅｓｐｏｎｓｅ　ｔｏ　ｃａｄｍｉｕｍ　ｉｎ　ｈｉ　ｇＩ１ｅｒ　ｐｌａｎｔｓ　［Ｊ］．ＥｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔｌａａｎｄＥｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌＢｏｔｎａｙ，１９９９，４１：１０５－１３０．　【１４】Ｓｕｇｉｙａｍａ　Ｓ．Ｒｅｌａｔｉｖｅ　ｃｏｎｔｉｒｂｕｔｉｏｎ　ｏｆ　ｍｅｒｉｓｔｅｍ　ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ　ａｎｄ　ｓｐｅｃｉｉｆｃ　ｌｅａｆ　ａｒｅａ　ｔｏ　ｓｈｏｏｔ　ｒｅｌａｔｉｖｅ　ｇｒｏｗｔｈ　ｒａｔｅ　ｉｎ　Ｃ３　ｇｒａｓｓ　ｓｐｅｃｉｅｓ［Ｊ］．Ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ　Ｅｃｏｌｏｇｙ，２００５，１９：９２５—９３１．　［１５］Ｘｉｏｎｇ　Ｚ　Ｔ，Ｌｉｕ　Ｃ，Ｇｅｎｇ　Ｂ．Ｐｈｙｔｏｔｏｘｉｃ　ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ｃｏｐｐｅｒ　ｏｎ　ｎｉｔｒｏｇｅｎ　ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ　ｎａｄ　ｐｌｎａｔ　ｇｒｏｗｔｈ　ｉｎ　Ｂｒａｓｓｉｃａ　ｐｅｋｉｎｅｎｓｉｓ　Ｒｕｐ删．Ｅｃｏｔｏｘｉｃｉ—　ｔｙ　ａｎｄ　Ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔｌａ　Ｓａｆｅｔｙ，２００６，６４：２７３—２８０．　［１６］Ｂｒａｄｆｏｒｄ　Ｍ．Ｍ．Ａ　ｒａｐｉｄ　ａｎｄ　ｓｅｎｓｉｔｉｖｅ　ｍｅｔｈｏｄ　ｆｏｒ　ｔｈｅ　ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｎｆｉｅｒｏｇｒａｍ　ｑｕａｎｔｉｔｉｅｓ　ｏｆ　ｐｒｏｔｅｉｎ　ｕｔｉｌｉｚｉｎｇ　ｔｈｅ　ｐｒｉｎｃｉｐｌｅ　ｏｆ　ｐｒｏｔｅｉｎ－－ｄｙｅ　ｂｉｎｄｉｎｇ［Ｊ］．ＡｎａｌｙｔｉｃａｌＢｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，１９７６，７２：２４８－２５４．　【１７］Ｆｅｉ—Ｂ０　Ｗｕ，Ｊｉｎｇ　Ｄｏｎｇ，Ｑｉｏｎｇ　Ｑｉｕｑｉａｎ，ｅｔ　ａ１．Ｓｕｂｃｅｌｌｕｌａｒ　ｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｃｈｅｍｉｃａｌ　ｆｏｒｍ　ｏｆ　Ｃｄ　ａｎｄ　Ｃｄ　Ｚｎ　ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎ　ｉｎ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｂａｒｌｅｙ　ｇｅｎｏ—　ｔｙｐｅｓ［Ｊ］．Ｃｈｅｍｏｓｐｈｅｒｅ，２００５，６０：１４３７—１４４６．　【１８］Ｃｈａｏｕｉ　Ａ，Ｈａｂｉｂ　Ｇｈｏｒｂａｌ　Ｍ，Ｅ１　Ｆｅｒｊａｎｉ　Ｅ．Ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ｃａｄｍｉｕｍ－ｚｉｎｃ　ｉｎ—　ｔｅｒａｃｔｉｏｎｓ　ｏｎ　ｈｙｄｒｏｐｏｎｉｃａｌｌｙ　ｇｒｏｗｎ　ｂｅａｎ（Ｐｈａｓｅｏｌｕｓ　ｖｕｌｇａｒｉｓ　Ｌ．）［Ｊ］．　Ｈａｎｔ　Ｓｃｉｅｎｃｅ，１９９７，１２６：２１—２８．　【１９］Ｗａｎｇ　ＸＦ，Ｚｈｏｕ　Ｑｘ．Ｅｃｏｔｏｘｉｃｏｌｏｇｉｃａｌ　ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ｃａｄｍｉｕｍ　ｏｎ　ｔｈｒｅｅ　ｏｒ－　ｎａｍｅｎｔａｌ　ｐｌａｎｔｓ［Ｊ］．Ｃｈｅｍｏｓｐｈｅｒｅ，２００５，６０：１６－２１．　【２ｏ］Ｎｏｏｄ６ｎ　Ｌ　Ｄ．１’ｈｅ　ｍｏｄｅ　ｏｆ　ａｃｔｉｏｉｎ　ｏｆ　Ｍａｌｅｉｃ　Ｈｙｄｒａｚｉｄｅ：Ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ　ｏｆ　ｇｒｏｗｔｈ【Ｊ］．Ｐｈｙｓｉｏｌ　Ｐｌｎａｔｒａｕｍ，１９６９，２２：２６０－２７０．　［２１］Ｎｇ　Ｔ　Ｙ　Ｔ，Ｒａｉｎｂｏｗ　Ｐ　Ｓ，Ａｍｉａｒｄ－Ｔｒｉｑｕｅｔ　Ｃ，ｅｔ　ａ１．Ｍｅｔａｌｌｏｔｈｉｏｎｅｉｎ　ｔｕｒｎｏｖｅｒ，ｅｙｔｏｓｏｌｉｅ　ｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｔｈｅ　ｕｐｔａｋｅ　ｏｆ　Ｃｄ　ｂｙ　ｔｈｅ　ｇｒｅｅｎ　ｍｕｓ－　ｓｅｌＰｅｒｎａｖｉｒｉｄｉｓ［Ｊ］．Ａｑｕａｔｉｃ　Ｔｏｘｉｃｏｌｏｇｙ，２００７，８４：１５３—１６１．　［２２］Ｚｈａｎｇ　Ｓｈｕｊｉｅ，Ｈｕ　Ｆａｎｇ，Ｌｉ　Ｈｕｉｘｉｎ．Ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ｅａｒｔｈｗｏｒｍ　ｍｕｃｕｓ　ａｎｄ　ａｍｉｎｏ　ａｃｉｄｓ　ｏｎ　ｃａｄｍｉｕｍ　ｓｕｂｃｅＵｕｌａｒ　ｄｉｓｔｉｒｂｕｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｃｈｅｍｉｃａｌ　ｆｏｒｍｓ　ｉｎ　ｔｏｍａｔｏ　ｓｅｅｄｌｉｎｇｓ［Ｊ］．Ｂｉｏｒｅｓｏｕｒｃｅ　Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，２００９，１００：４ｏ４１—４０４６．　［２３］ＳａｌｔＤＥ，ＰｒｉｎｃｅＲ　Ｃ，ＰｉｃｋｅｒｉｎｇＬ　Ｊ，ｅｔａ１．Ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ　ｏｆ　ｃａｄｍｉｕｍｍｏ—　ｂｉｌｉｔｙ　ａｎｄ　ａｃｃｕｍｕｌａｉｔｉｏｎ　ｉｎ　Ｉｎｄｉａｎ　Ｍｕｓｔｒａｄ　．Ｈａｎｔ　Ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｙ，１９９５，　１０９：１４２７－１４３３．　［２４］Ｋｕ‘＂ｐｐｅｒ　Ｈ，Ｍｉｊｏｖｉｌｏｖｉｃｈ　Ａ，Ｍｅｙｅｒ—Ｋｌａｕｃｋｅ　Ｗ，ｅｔ　ａ１．Ｔｉｓｓｕｅ—ａｎｄ　ａｇｅ－ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｓ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｃｏｍｐｌｅｘａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｃａｄｍｉｕｍ　ａｎｄ　ｚｉｎｃ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｃａｄｍｉｕｍ／ｚｉｎｃ　ｈｙｐｅｒａｃｃｕｍｕｌａｔｏｒ　Ｔｈｌａｓｐｉ　ｅａｅｒｌｄｅｓｃｅ？￣（Ｇａｎｇｅｓ　Ｅ－　ｅｏｔｙｐｅ）ｒｅｖｅａｌｅｄ　ｂｙ　Ｘ－Ｒａｙ　ａｂｓｏｒｐｔｉｏｎ　ｓｐｅｃｔｏｒｓｃｏｐｙ【Ｊ］．Ｐｌａｎｔ　Ｐｈｙｓｉｏｌｏ－　ｙｇ，２００４，１３４：７４８—７５７．　致谢：感谢沈阳应用生态研究所刘宛副研究员对英文摘要　的斧正。