硕士学位论文第二章材料与方法实验...

变应性鼻炎患者血清IL-12和IL-27的表达水平及其意义初探

姓名：***申请学位级别：硕士专业：耳鼻咽喉头颈外科

指导教师：***

201105

硕士学位论文中文摘要摘要目的：通过研究接受和未经免疫治疗的变应性鼻炎患者血清中ＩＬ．１２和ＩＬ．２７的水平，并分析ＩＬ．１２和ＩＬ．２７两者的相关性，探讨ＩＬ．１２和ＩＬ．２７在变应性鼻炎的发病机制和治疗中的作用。方法：选择接受免疫治疗２年以上的变应性鼻炎患者２０例为免疫治疗组，未经免疫治疗的变应性鼻炎患者２０例为未治疗组，以２０例无变态反应疾病的健康人为对照组。三组间年龄和性别均无显著差异，受检前二周内均未使用类固醇激素。对免疫治疗组和未治疗组的变应性鼻炎患者进行症状和体征评分。用ＥＬＩＳＡ法检测三组血清中ＩＬ．１２和ＩＬ一２７的水平。采用ＳＰＳＳｌ６．０统计软件进行统计分析。结果：１．免疫治疗组的症状和体征记分（６．９５４－１．１９）明显低于未治疗组（９．８０４．１．９８），两者比较有统计学意义（Ｐ＜Ｏ．０５）。２．ＩＬ．１２水平：变应性鼻炎患者未治疗组、免疫治疗组和正常对照组的血清ＩＬ．１２浓度分别为（１１１．８２４－４１．３２ｐｇ／ｍ１）、（１６３．７８４－５１．７６ｐｇ／ｍ１）和（２０７．２８４－７３．９０ｐｇ／ｍ１），变应性鼻炎两组均显著低于正常对照组，未治疗组显著低于免疫治疗组，两两之间比较有统计学意义（Ｐ＜Ｏ．０５）。３．ＩＬ．２７水平：变应性鼻炎患者未治疗组、免疫治疗组和正常对照组的血清ＩＬ．２７浓度分别为（２８７．７２４－１０７．９７ｐｇ／ｍ１）（４０３．８５４－１５５．５９ｐｇ／ｍ１）和（６２２．６５＋２３７．８７ｐｇ／ｍ１），变应性鼻炎两组均显著低于正常对照组，免疫治疗组血清ＩＬ．２７浓度高于未治疗组，两两之间比较有统计学意义（Ｐ＜Ｏ．０５）。４．ＩＬ．２７和ＩＬ．１２水平有一定正相关性（ｒ＝０．３４３）。Ｔ硕士学位论文中文摘要结论：１．变应性鼻炎患者血清中ＩＬ．１２和ＩＬ．２７水平显著低于正常人，表明ＩＬ一１２和ＩＬ．２７在变应性鼻炎的发病机制中起作用。２．经免疫治疗症状和体征获得改善的变应性鼻炎患者，血清中ＩＬ．１２和ＩＬ．２７水平显著高于未经治疗的患者，表明ＩＬ．１２和ＩＬ一２７可能在变应性鼻炎免疫治疗中发挥免疫调节作用。３．ＩＬ．２７与ＩＬ．１２在变应性鼻炎患者血清中的表达水平有一定正相关性，提示ＩＬ．２７可能在变应性鼻炎的发病机制中与ＩＬ．１２发挥相似的作用，ＩＬ一２７有可能作为治疗变应性鼻炎的新靶点。关键词：变应性鼻炎，免疫治疗，ＩＬ—１２，ＩＬ一２７，Ｔｈｌ／Ｔｈ２Ｕ硕七学位论文英文摘要ＡＢＳＴＲＡＣＴｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：Ｖｉａｏｂｓｅｒｖｉｎｇｔｈｅｌｅｖｅｌｏｆｓｅｒｕｍｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ－１２（ＩＬ－１２）ａｎｄ‘ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ一２７（ＩＬ一２７）ｉｎｔｈｅｐａｔｉｅｎｔｓｗｉｔｈａｌｌｅｒｇｉｃｒｈｉｎｉｔｉｓｗｈｏｗｅｒｅｔｒｅａｔｅｄｂｅｔｗｅｅｎｏｒｕｎｔｒｅａｔｅｄａｎｄｂｙｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒａｐｙ，ａｎａｌｙｚｉｎｇｔｈｅｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｌｅｖｅｌ，ｔｏｅｘｐｌｏｒｅｒｏｌｅｏｆＩＬ－１２ＩＬ－２７ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ··１２ａｎｄｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ·－２７ｉｎｔｈｅｐａｔｈｏｇｅｎｅｓｉｓａｎｄｔｒｅａｔｍｅｎｔｏｆａｌｌｅｒｇｉｃｒｈｉｎｉｔｉｓ．Ｍｅｔｈｏｄ：Ｔｗｅｎｔｙｐａｔｉｅｎｔｓｗｉｔｈａｌｌｅｒｇｉｃｒｈｉｎｉｔｉｓ，ｗｈｏｗｅｒｅｕｎｄｅｒｗｅｎｔｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒａｐｙｗｉｔｈ０ＲｏｇｇｅＤｅｓｅｎｓｉｔｉｚａｔｉｏｎａｓｓｉｇｎｅｄａｓｏｖｅｒｔｗｏｙｅａｒｓ，ｗｅｒｅｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒａｐｙｇｒｏｕｐ．Ｔｗｅｎｔｙｐａｔｉｅｎｔｓｗｉｔｈａｌｌｅｒｇｉｃｒｈｉｎｉｔｉｓｗｈｏｗｅｒｅｕｎｔｒｅａｔｅｄｗｉｔｈｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒａｐｙｗｅｒｅａｓｓｉｇｎｅｄａｓｕｎｔｒｅａｔｅｄｇｒｏｕｐ．ＴｗｅｎｔｙｈｅａｌｔｈｙｐｅｏｐｌｅｗｉｔｈｏｕｔａｌｌｅｒｇｉｃｄｉｓｅａＳｅｓｗｅｒｅｃｈｏｓｅｎ嬲ｃｏｎｔｒ０１．Ａｌｌｏｆｔｈｅｍｈａｄｎｏｔａｃｃｅｐｔｅｄｓｔｅｒｏｉｄｓｉｎｔｗｏｗｅｅｋｓｂｅｆｏｒｅｔｈｅｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｏｎ．Ｔｈｅｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｓｏｆｔｈｅｇｅｎｄｅｒａｎｄａｇｅａｍｏｎｇｔｈｒｅｅｇｒｏｕｐｓｗｅｒｅｎｏｓｔａｔｉｓｔｉｃａｌｌｙｇｒｏｕｐｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ．Ｔｈｅｔｒｅａｔｅｄｇｒｏｕｐｓｙｍｐｔｏｍｗｅｒｅａｎｄｓｉｇｎｓｃｏｒｅｓｏｆｕｎｔｒｅａｔｅｄａｎｄｒｅｃｏｒｄｅｄ．Ｔｈｅｓｅｒｕｍｄａｔａｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ·１２ａｎｄｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ一２７ｗｅｒｅｍｅａｓｕｒｅｄｂｙｗｅｒｅａｎａｌｙｚｅｄｂｙＳＰＳＳ１６．０ｓｏｆｔｗａｒｅ．Ｒｅｓｕｌｔ：１．ＴｈｅｓｙｍｐｔｏｍｈｉｇｈｅｒｔｈａｎＥＬＩＳＡ．Ｔｈｅａｎｄｓｉｇｎｓｃｏｒｅｓｏｆｕｎｔｒｅａｔｅｄｇｒｏｕｐｗｅｒｅｖｅｒｓｕｓｔｈａｔｏｆｔｈｅｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒａｐｙｇｒｏｕｐ，９．８０＋１．９８６．９５＋１．１９．Ｔｈｅｒｅｗａｓｓｔａｔｉｓｔｉｃａｌｌｙｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｂｅｔｗｅｅｎｔｈｅｔｗｏｇｒｏｕｐｓ硕十学位论文英文摘要（Ｐ＜０．０５）．２．ＴｈｅｌｅｖｅｌｏｆＩＬ一１２ｉｎｓｅｒｕｍ：ｔｈｅｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓｏｆＩＬ．１２ｉｎｕｎｔｒｅａｔｅｄｇｒｏｕｐ（１１１．８２土４１．３２ｐｇ／ｍ１）ａｎｄｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒａｐｙ４－５１．７６ｐｇ／ｍ１）ｗｅｒｅｌｏｗｅｒｔｈａｎｔｈｅｃｏｎｔｒｏｌｇｒｏｕｐ（１６３．７８ｇｒｏｕｐ（２０７．２８４－７３．９０ｐｇ／ｍ１）．ｇｒｏｕｐｓ（Ｐ＜Ｏ．０５）．３．ＴｈｅｒｅｗｅｒｅｓｔａｔｉｓｔｉｃａｌｌｙｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｓａｍｏｎｇｔｈｅｔｈｒｅｅＴｈｅｌｅｖｅｌｏｆＩＬ一２７ｉｎｓｅｒｕｍ：ｔｈｅｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓｏｆＩＬ．２７ｉｎｕｎｔｒｅａｔｅｄｇｒｏｕｐ（２８７．７２４－１０７．９７ｐｇ／ｍ１）ａｎｄｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒａｐｙｇｒｏｕｐ（４０３．８５１５５．５９４－ｐｇ／ｍ１）ｗｅｒｅｏｂｖｉｏｕｓｌｙｌｏｗｅｒｔｈａｎｔｈｅｎｏｒｍａｌｇｒｏｕｐ（６２２．６５４－２３７．８７ｐｇ／ｍ１）．Ｔｈｅｒｅｗｅｒｅｓｔａｔｉｓｔｉｃａｌｌｙｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｓａｍｏｎｇｔｈｅｔｈｒｅｅｇｒｏｕｐｓ（Ｐ＜Ｏ．０５）．４．ＴｈｅｒｅｌａｔｉｖｉｔｙｂｅｔｗｅｅｎｔｈｅｌｅｖｅｌｏｆＩＬ一１２ａｎｄａＩＬ－２７：ｔｈｅｒｅｗａｓｐｏｓｉｔｉｖｅｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎｂｅｔｗｅｅｎｔｈｅＩＬ一１２ａｎｄＩＬ一２７ｌｅｖｅｌ（ＦＯ．３４３）．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：１．ＴｈｅｓｅｒｕｍｌｅｖｅｌｓｏｆＩＬ－－１２ａｎｄＩＬ·－２７ｏｆｔｈｅｐａｔｉｅｎｔｓｗｉｔｈａｌｌｅｒｇｉｃｒｈｉｎｉｔｉｓｗｅｒｅｃｏｎｔｒｏｌ，ｉｍｐｌｙｉｎｇｔｈａｔｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｌｏｗｅｒｔｈａｎｔｈａｔｏｆｔｈｅｎｏｒｍａｌａｎｄＩＬ－２７ｍｉｇｈｔｐｌａｙｒｏｌｅｓｉｎｔｈｅＩＬ－１２ｐａｔｈｏｇｅｎｅｓｉｓｏｆｔｈｅａｌｌｅｒｇｉｃｒｈｉｎｉｔｉｓ．２．ＴｈｅｓｅｒｕｍｌｅｖｅｌｓｏｆＩＬ．１２ａｎｄＩＬ一２７ｉｎｔｈｅｐａｔｉｅｎｔｓｗｉｔｈｍａｒｋｅｄｌｙｓｙｍｐｔｏｍａｎｄｓｉｇｎｉｍｐｒｏｖｅｍｅｎｔｓｂｙｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒａｐｙｗｅｒｅｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｈｉｇｈｅｒｔｈａｎｉｎｔｈｅｕｎｔｒｅａｔｅｄｐａｔｉｅｎｔｓ，ｉｎｄｉｃａｔｉｎｇｔｈａｔｂｏｔｈＩＬ··１２ａｎｄＩＬ··２７ｍａｙｐｌａｙｉｍｍｕｎｅｒｅｇｕｌａｔｉｎｇｒｏｌｅｉｎｔｈｅｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒａｐｙｏｆｔｈｅａｌｌｅｒｇｉｃｒｈｉｎｉｔｉｓ．３．ＴｈｅｐｏｓｉｔｉｖｅｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎｂｅｔｗｅｅｎＩＬ－２７ａｎｄＩＬ－１２ｄｅｍｏｎｓｔｒａｔｅｓｔｈａｔＩＬ一２７ｍａｙｐｌａｙａｓｉｍｉｌａｒｒｏｌｅｉｎｔｈｅｐａｔｈｏｇｅｎｅｓｉｓｏｆｔｈｅａｌｌｅｒｇｉｃａｒｈｉｎｉｔｉｓ，ａｎｄＩＬ一２７ｃａｎｂｅｃｏｎｓｉｄｅｒｅｄａｓｎｅｗｔａｒｇｅｔｉｎｔｈｅｔｒｅａｔｍｅｎｔｏｆａｌｌｅｒｇｉｃｒｈｉｎｉｔｉｓ．ＩＶ硕士学位论文英文摘要Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：Ａｌｌｅｒｇｉｃｒｈｉｎｉｔｉｓ，Ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒａｐｙ，Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ一１２（ＩＬ一１２），Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ一２７（ＩＬ－２７），Ｔｈｌ／Ｔｈ２Ｖ硕士学位论文第一章前言变应性鼻炎患者血清ＩＬ．１２和ＩＬ．２７的表达水平及其意义初探第一章前言变应性鼻炎（ａｌｌｅｒｇｉｃｒｈｉｎｉｔｉｓ，ＡＲ）即过敏性鼻炎，是机体接触变应原后主要由ＩｇＥ介导的鼻黏膜非感染性炎性疾病，属于Ｉ型超敏反应，临床上以鼻塞、鼻痒、打喷嚏、流清涕为主要症状，其发病率约为１０％～２５％，在全球有逐渐增加的趋势。目前，变应性鼻炎的发病机制并不完全明了，近年Ｔｈｌ／Ｔｈ２平衡失调学说获得较广泛认同。该学说认为变应性鼻炎是一系列细胞间相互作用的结果，开始于抗原呈递细胞（ａｎｔｉｇｅｎｐｒｅｓｅｎｔｉｎｇｃｅｌｌ，ＡＰＣ）对变应原的摄取和加工处理，而后传递给辅助性Ｔ淋巴细胞（Ｔｈ细胞），使Ｔｈ细胞的分化向Ｔｈ２反应偏移，Ｔｈｌ／Ｔｈ２反应平衡被打破，成为Ｔｈ２＞Ｔｈｌ反应，Ｔｈ２细胞及相关因子将诱导Ｂ细胞释放ＩｇＥ；当相同的变应原再次进入时，与ＩｇＥ结合，使肥大细胞脱颗粒，释放组胺、前列腺素和白三烯等炎性介质，引起毛细血管扩张及通透性增加、腺体分泌增加、嗜酸性粒细胞浸润等，由此引发变应性鼻炎的临床症状【１，２ｌ。Ｉｌａｌ／Ｉｑａ２失衡与相关疾病关系的研究是当前医学热点课题，而在变应性鼻炎的研究中，主要着眼于以下两点：一是探讨已知治疗方法在治疗变应性鼻炎中是如何调节Ｔｈｌ／Ｔｈ２失衡的；二是以纠正Ｔｈｌ／Ｔｈ２失衡为出发点，研究治疗变应性鼻炎的新方法和新药物。这两方面研究的共同核心部分，就是使Ｔｈ２反应减轻，或者使Ｔｈｌ反应增强，或者是使Ｔｈ２反应减轻和Ｔｈｌ反应增强结合起来，从而纠正Ｔｈｌ／Ｔｈ２失衡，达到治疗变应性鼻炎的目的。近年来，人们发现白介素．１２（ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ１２，ＩＬ．１２）作为一种ＴＩｌｌ型细胞因子，在促进辅助性Ｔ淋巴细胞向Ｔｈｌ方向分化和抑制其向Ｔｈ２方向分化起着关键作用，在逆转变应性鼻炎的发生发展中也有重要的调节作用。国内外较多研究显示，ＩＬ．１２在变应性鼻炎患者血清及鼻粘膜组织中的表达明显低于正常人。周兵等【３ｌ利用ＩＬ．１２的ＥＢ病毒（ＥＢＶ）重组质粒与阳离子脂质体混合物形成ＥＢＶ／ｌｉｐｏｐｌｅｘ，将其成功转染ＣＯＳ．７细胞及局部转染小鼠鼻黏膜上皮，均获得ＩＬ．１２分泌性蛋白的高效表达，并能有效抑制Ｔｌｌ２型细胞因子ＩＬ．５的产生及嗜酸性粒细胞及肥大细胞硕士学位论文第一章前言浸润等炎症反应。这些探索为ＩＬ．１２转基因治疗变应性鼻炎奠定了基础。韩德民等【４】在此基础上进一步用ＩＬ．１２的ＥＢＶ／ｌｉｐｏｐｌｅｘ质粒载体对变应性鼻炎小鼠模型进行治疗，结果表明：经ＩＬ．１２基因治疗的变应性鼻炎小鼠血清总ＩｇＥ水平显著性下降，同时其鼻黏膜嗜酸性粒细胞浸润显著减少。但是，由于ＩＬ．１２全身用药有相当大的毒副作用，局部用药难以控制等原因，ＩＬ．１２在人类变应性鼻炎中的应用相关研究仍然很少，ＩＬ一１２基因治疗距离临床应用还有很长的路要走，相关研究还有待进一步深入。ＩＬ．２７是ＩＬ．１２家族成员之一，能促进Ｔｈｌ型细胞生成，同时抑制ｎ１２型细胞因子产生和Ｔｈ２型细胞极化，在维持机体的免疫自稳中起着重要的作用。ＩＬ．２７可以促进辅助性Ｔ淋巴细胞的增值，也可以促进其向ｎｌｌ细胞分化及产生ＩＦＮ吖，而在高度Ｔｈｌ极化的情况下，ＩＬ．２７的主要作用是限制ｎｌｌ免疫反应的强度和持续时间，从而保护机体免受过度的免疫反应的损伤。目前，ＩＬ．２７与哮喘的关系研究在国内外有所报道，Ｃｈａｅ等【５】检测了韩国哮喘患者ＩＬ．２７ｐ２８基因的５个外显子和边界内含子序ＹＵ（包括启动子区），发现在翻译起始点上游第９６４位点的Ａ／Ｇ转换型ＳＮＰｓ（基因频率Ａ＞Ｇ）与哮喘易感性最相关，说明ＩＬ．２７ｐ２８与哮喘的遗传易感性紧密相关。Ｙｅｓｈｉｍｏｔｏ等【６】研究证明了用ＩＬ．２７鼻腔给药途径能有效缓解由卵清蛋白（ｏＶＡ）致敏引起气道高反应的动物模型，ＩＬ．２７抑制１１１２型细胞的生成能使Ｔｈ２型细胞极化，并提出了ＩＬ．２７有可能成为治疗哮喘的一种新途径。这些研究能够很好地说明ＩＬ．２７与哮喘的紧密关系，并且可以在特有的阶段起到对哮喘患者的保护和治疗作用。变应性鼻炎与哮喘属于“同一个气道，同一种疾病”，其主要发病机制都是Ｔｈｌ／Ｔｈ２平衡失调，但ＩＬ．２７与变应性鼻炎的关系鲜有报道。我们通过对未经治疗及接受免疫治疗后的变应性鼻炎患者和正常对照组血清ＩＬ．１２与ＩＬ．２７的水平进行对比研究，初步探讨ＩＬ．１２和ＩＬ．２７在变应性鼻炎的发病机制及逆转变应性鼻炎发展过程中的作用。２硕士学位论文第二章材料与方法第二章２．１临床资料２．１．１研究对象材料与方法未治疗组：选择２０１０年１０月－一２０１１年４月在中南大学湘雅二医院耳鼻咽喉科门诊就诊的变应性鼻炎患者２０例，男１２例，女８例，年龄７岁－－－５３岁；全部病例均合中华医学会耳鼻咽喉科学分会２００９年武夷山会议制定的“变应性鼻炎诊断和治疗指南”标准忉，未进行免疫治疗，受检前二周内未使用类固醇激素。免疫治疗组：已行免疫治疗２年以上的变应性鼻炎患者２０例，男１ｌ例，女９例，年龄８岁－＇－，４７岁，均符合变应性鼻炎诊断标准，常规吸入物变应原皮试一种以上变应原呈阳性反应，并已接受屋尘螨和粉尘螨混合变应原（阿罗格）治疗２年以上。受检前二周内未使用类固醇激素。正常对照组：选择健康体检人员２０例，均无变态反应性疾病史，无家庭及个人过敏史，男女各ｌＯ例，年龄１６岁＂－－５０岁。以上３组均排除严重心肺肝肾疾病。三组间性别、年龄无显著差异。２．１．２症状和体征记分对变应性鼻炎患者组和经阿罗格脱敏治疗组患者，进行症状和体征记分（评分标准见表１，表２）。根据症状和体征记分评定阿罗格脱敏治疗的疗效：（治疗前总分．治疗后总分）／治疗前总分ｘ１００％（＞６６％为显效，６５％～２６％为有效，盟５％为无效）硕士学位论文第二章材料与方法表１变应性鼻炎患者症状分级记分标准分级记分喷嚏（一次连续个数）流涕（每日擤鼻次数）鼻堵鼻痒表２变应性鼻炎患者体征分级记分标准分级记分体征１分鼻甲轻度肿胀，鼻中隔、中鼻甲尚可见２分下鼻甲与鼻中隔（或鼻底）紧靠，下鼻甲与鼻底（或鼻中隔）之间尚有小缝隙３分下鼻甲与鼻底、鼻中隔紧靠，见不到中鼻甲，或中鼻甲黏膜息肉样变、息肉形成２．２实验器材与试剂２．２．１主要试剂人ＩＬ．１２和ＩＬ．２７ＥＬＩＳＡ试剂盒：深圳晶美生物公司。２．２．２主要仪器（１）全自动酶标仪：型号Ｍｏｄｅｌ６８０，美国伯乐。（２）离心机：ＬＤ４．２型，北京医用离心机厂。（３）冰箱：ＢＣＤ．２０５ＷＥ型，广州华凌公司。（４）电热恒温水浴箱：ＢＨＷ－ＩＶ型，北京医疗设备厂。均由中南大学湘雅二医院中心实验室提供。４硕士学位论文第二章材料与方法２．３实验方法２．３．１标本采集抽空腹静脉血３ｍｌ，置于肝素抗凝管中，在２小时内室温下以１５００ｒ／ｍｉｎ转速离心１０分钟，小心提取血清移至另一洁净干燥玻璃试管中，置于．２０。Ｃ冰箱内冷冻保存待检。２．３．２ＩＬ．１２的检测采用酶联免疫吸附法（ＥＬＩＳＡ）检测ＩＬ．１２，严格按照ＩＬ．１２试剂盒使用说明书操作。具体操作步骤如下：（１）准备：从冰箱取出试剂盒，室温复温平衡３０分钟。（２）配液：用蒸馏水将２０倍浓度洗涤液稀释成原倍的洗涤液。（３）加标准品和待测样本：取足够数量的酶标包被板，固定于框架上，分别设置标准品孔、待测样本孔和空白对照孔，记录各孔位置，在标准品孔中放入标准品５０止；待测样本孔先加入待测样本１０止，再加样本稀释４０止（即样本稀释５倍）；空白对照孔不加。标准品依次稀释成２００、１００、５０、２５、１２．５、６．２５、０ｐｇ／ｍｌ。（４）温育：３７℃恒温箱温育３０ｍｉｎ。（５）洗板：弃去洗液，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置ｌｍｉｎ，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复４次。（６）加酶标工作液：每孔加入酶标工作也５０９Ｌ，空白对照空不加。（７）温育：重复４的操作。（８）洗板：重复５的操作。（９）显色：每孔先加入显色剂Ａ液５０９Ｌ，再加入显色剂Ｂ液５０止，３７Ｃ避光显色１５ｍｉｎ。（１０）终止：取出酶标板，每孔加终止液５０Ｉ＿ｔＬ，终止反应。（１１）测定：以空白孔调零，在终止后ｌ５ｍｉｎ内，用４５０ｎｍ波长测量各孔的吸光值（ＯＤ值）。（１２）计算：以ＯＤ值为纵坐标，以标准品浓度为横坐标，绘制标准曲线，５硕士学位论文第二章材料与方法根据血清样本的ＯＤ值即可在标准曲线上得到其浓度。（注：最终浓度为实际测定浓度乘以稀释倍数。）２．３．３ＩＬ．２７的检测同法检测ＩＬ．２７水平。２．４统计学处理所得实验结果采用ＳＰＳＳｌ６．０统计分析软件进行数据处理，检测结果用均数４－标准差（ｘ士ｓ）表示，采用独立样本ｔ检验，相关性采用线性相关分析，Ｐ＜０．０５定为有统计学差异。６硕十学ｆ旁论文第三章结果第三章结果３．１未治疗组和免疫治疗组的症状和体征记分比较免疫治疗组的症状和体征记分（６．９５＋１．１９）明显低于未治疗组（９．８０＋１．９８），Ｐ＜Ｏ．０５，差异有统计学意义（见表３，图１）。表３未治疗组、免疫治疗组的症状和体征记分（Ｘ±Ｓ）比较注：与未治疗组比较，·Ｐ＜Ｏ．０５口朱汀｝疗｝１【●免疫治疗｝３．２未治疗组、免疫治疗组和对照组血清ＩＬ．１２浓度比较未治疗组变应性鼻炎患者血清ＩＬ．１２的浓度为（１ｌ１．８２＋４１．３２ｐｇ／ｍ１）、免疫治疗组为（１６３．７８＋５１．７６ｐｇ／ｍ１），显著低于『Ｆ常对照组（２０７．２８＋７３．９０ｐｇ／ｍ１）（均为Ｐ＜Ｏ．０５），且免疫治疗组血清ＩＬ．１２浓度刃ｉ显著高于未治疗组（Ｐ＜Ｏ．０５）（见表４，表２）。７硕士学位论文第二章结果未治疗组２０１１１．８２士４１．３２△注：未治疗组与免疫治疗组比较，≠｝Ｐ＜０．０５；未治疗组与对照组比较，ＡＰ＜Ｏ．０５；免疫治疗组与对照组比较，·Ｐ＜Ｏ．０５．２００１１５（）口未治疗组●免疫治疗组口对照纰口１００５００３．３未治疗组、免疫治疗组和正常对照组血清ＩＬ．２７浓度比较未治疗组变应性鼻炎患者血清ＩＬ．２７浓度为（２８７．７２＋１０７．９７ｐｇ／ｍ１），免疫治疗组血清ＩＬ一２７浓度为（４０３．８５＋１５５．５９ｐｇ／ｍ１），两组均显著低于难常对照组（６２２．６５＋２３７．８７ｐｇ／ｍ１）（均为Ｐ＜Ｏ．０５），免疫治疗组血清ＩＬ．２７浓度显著高于未治疗组（Ｐ＜Ｏ．０５）（见表５，图３）。８硕Ｐ≯伉论文第二章结粜未治疗组２０２８７．７２＋１０７．９７Ａ注：未治疗组与免疫治疗组比较，撑Ｐ＜ｏ．０５；未治疗组与对照组比较，△Ｐ＜Ｏ．０５；免疫治疗组与对照组比较，·Ｐ＜Ｏ．０５．到：ｊｊ组问ＩＩ．一２７浓度比较６００５００｛４００口未：；ｆｉ，，组■免疫治｝，组口对照组兰，３００２００１００ＯＩ【。一２７经线性相关分析，变应性鼻炎患者血清中ＩＬ．２７和ＩＬ．１２水平有一定Ｊ下相关性，相关系数ｒ＝Ｏ．３４３，Ｐ＜Ｏ．０５（见图４）。硕士学位论文第三章结果图４ＩＬ－２７与ＩＬ－１２的相关性散点图０１辞１Ｉ０．００１００．∞Ｚｍ∞３００．００４００脚湖舯６∞舶ＩＬ－１２ｉ０硕士学位论文第四章讨论第四章讨论４．１变应性鼻炎与Ｔｈｌ／Ｔｈ２失衡的关系１９８６年，Ｍｏｓｍａｍｎ等首先报道小鼠的辅助性Ｔ淋巴细胞（Ｔｈ）根据其分泌细胞因子的不同可以分为ｌ型和２型，即Ｔｈｌ和Ｔｈ２。此后不久，又发现了Ｔｈｌ和Ｔｈ２细胞的前身细胞，即Ｔｈ０细胞。１９９１年，Ｍａｇｇｉ等证实人类同样存在Ｔｈｌ和Ｔｈ２亚群。Ｔｈｌ细胞主要分泌ＩＬ．２、ＩＬ．１２、ＩＦＮ吖等细胞因子，其中ＩＦＮ吖是其特征因子；而ＴＭ细胞主要分泌ＩＬ４、ＩＬ．５、ＩＬ．６、ＩＬ．９、ＩＬ．１０及ＩＬ．１３等细胞因子，其中ＩＬ．４是其特征因子。因此，前一类细胞因子称为Ｔｈｌ细胞因子，后一类细胞因子称为Ｔｈ２细胞因子。Ｔｈｌ细胞因子主要介导细胞免疫反应；Ｔｈ２细胞因子主要介导体液免疫反应。正常情况下，辅助性Ｔ淋巴细胞按一定比例向Ｔｈｌ、Ｔｈ２细胞分化，两者处于相对平衡状态，维持着机体正常的细胞免疫和体液免疫功能。Ｔｈｌ或Ｔｈ２细胞通过其所分泌的细胞因子的作用而参与机体的特异性免疫反应。Ｔｈ０细胞向Ｔｈｌ细胞或Ｔｈ２细胞的分化以及Ｔｈｌ细胞和Ｔｈ２细胞之间的相互转换会受局部微环境中细胞因子的种类及浓度、免疫活性激素、抗原的剂量及来源、抗原呈递细胞的类型以及Ｔ细胞受体与ＭＨＣ抗原复合物的亲和力的强弱等多种因素的调节【ｓ】。微环境中细胞因子的种类是影响辅助性Ｔ淋巴细胞分化的关键因素。在诸多的细胞因子中，ＩＬ．１２和ＩＬ－４对Ｔｈ０细胞分化起关键性调节作用：巨噬细胞所产生的ＩＬ—１２可以促进Ｔｈ０细胞向Ｔｈｌ细胞分化：而在由ＮＫＴ细胞和树突状细胞（ＤＣ）细胞所产生的ＩＬ．４的作用下，有利于Ｔｈ０细胞分化为Ｔｈ２细胞。在疾病状态下，Ｔｈ０细胞受特异抗原的刺激时，上述平衡被打破，一方面可能向Ｔｈｌ方向发展，另一方面可能向Ｔｈ２方向发展。Ｔｈｌ细胞因子功能亢进将导致炎症的慢性迁移、器官特异性自身免疫病、急性排斥反应和接触性皮炎的发病或免疫病理损伤：而Ｔｈ２细胞因子功能亢进，将导致特异性过敏反应，参与高ＩｇＥ综合征和嗜酸性粒细胞增多症。因此，Ｔｈｌ／Ｔｈ２的平衡是维持机体处于健康状态的重要机制之一。变应性鼻炎是ＩｇＥ介导的Ｉ型超敏反应，其主要血清学特征是ＩｇＥ水平升高，肥大细胞及嗜碱性粒细胞脱颗粒则是变应性鼻炎免疫连锁反应中的最终效应。ＩｇＥ由Ｂ淋巴细胞合成，受辅助性Ｔ淋巴细胞的调节，日ＰＴｈｌ细胞阻止ＩｇＥ的合成，硕＋学位论文第四章讨论而Ｔｈ２细胞促进ＩｇＥ的合成。Ｔｈｌ细胞所分泌的ＩＦＮ吖不足会出现Ｔｈ２细胞分泌功能亢进，引起ＩＬ－４的分泌增多，导致ＩｇＥ分泌失控。而Ｔｈ２型细胞因子如ＩＬ．４、ＩＬ．５、ＩＬ．６及ＩＬ．１３等尤其是ＩＬ．４能够促进ＩｇＥ的产生；ＩＬ．５能引起嗜酸性粒细胞的汇聚和活化，由此产生了“变态反应中的Ｔｈ２假说”。这个假说已得到较多实验研究和基础研究的支持。国内外研究发现，血清中Ｔｈ２细胞因子在变应性鼻炎患者明显增高，取自变应原激发部位鼻黏膜中的Ｔｈ２细胞因子如ＩＬ．３、ＩＬ．４、ＩＬ．５和粒细胞集落刺激因子（ＧＭ．ＣＳＦ）等的数量比对照部位在ｍＲＮＡ水平增加１９】。还有研究证实，变应性鼻炎患者经变应原鼻激发２４／ｉｘ时后与激发前相比较，鼻腔活检组织中ＩＬ．３、ＩＬ＿４、ＩＬ．５和ＩＬ．１３ｍＲＮＡ阳性细胞数增加【１０－１２］。在有些对照实验中，Ｔｈ２细胞因子的数目在蛋白质水平亦见升高［１０Ｊ３１。这些都充分表明变应性鼻炎是Ｔｈ２细胞因子相对于Ｔｈｌ细胞因子占优势的结果。目前，Ｔｈｌ／Ｔｈ２失衡与疾病关系的研究是当前医学热点课题，而在变应性鼻炎的研究中，主要着眼于以下两点：一是研究已知治疗方法在治疗变应性鼻炎中是如何调节Ｔｈｌ／Ｔｈ２失衡的；二是基于以Ｔｈｌ／Ｔｈ２失衡为出发点，研究治疗变应性鼻炎的新药物和新方法。这两方面研究共同的核心部分，就是使Ｔｈ２反应减轻，或者使Ｔｈｌ反应增强，或者是使Ｔｈ２反应减轻和Ｔｈｌ反应增强结合起来，从而调节Ｔｈｌ／Ｔｈ２失衡，达到治疗变应性鼻炎的目的。４．２ＩＬ－１２对变应性鼻炎的影响ＩＬ．１２是重要的Ｔｈｌ型细胞因子，主要来源于活化的单核细胞、巨噬细胞和树突状细胞，在诱导初始ＣＤ４＋Ｔ细胞（Ｔｈ０）向Ｔｌｌｌ分化及促进Ｔｈｌ细胞产生ＩＦＮ吖中起着关键作用。同时，ＩＬ．１２还能抑制ＴｈＯ细胞向Ｔｈ２分化，减少Ｔｈ２细胞因子的分泌。Ｗｒｉｇｈｔ等ｔ１４】报道在变应性鼻炎患者中，鼻黏膜局部ＩＬ—１２的表达要显著低于正常人。国内学者吕梅等１１５】证实，卵清蛋白（ＯＶＡ）激发的变应性鼻炎豚鼠动物模型鼻黏膜ＩＬ．１２的含量显著低于对照组。这些都提示变应性鼻炎患者鼻黏膜ＩＬ．１２表达的下降与变应性鼻炎的发病有一定相关性。此前有较多报道证实血清中ＩＬ．１２水平在变应性鼻炎患者比正常人低，本次实验再次验证了这一结果：变应性鼻炎患者组血清ＩＬ．１２浓度低于正常对照组，差异有统计学意义。这也表明Ｔｈｌ／Ｔｈ２失衡可能在变应性鼻炎的发生发展中发挥１２硕士学位论文第四章讨论着重要作用。周兵等【３】利用ＩＬ．１２的ＥＢ病毒（ＥＢＶ）重组质粒与阳离子脂质体混合物形成ＥＢＶ／ｌｉｐｏｐｌｅｘ，将其成功转染ＣＯＳ．７细胞及局部转染小鼠鼻黏膜上皮，均获得ＩＬ．１２分泌性蛋白的高效表达，并能有效抑制Ｔｈ２型细胞因子ＩＬ．５的产生及嗜酸性粒细胞及ｌｉＪ］巴大细胞浸润等炎症反应。这些探索为ＩＬ．１２转基因治疗变应性鼻炎奠定了基础。正是基于纠正Ｔｈｌ／Ｔｈ２平衡为目的，韩德民等１４Ｊ在此基础上进一步用ＩＬ．１２的ＥＢＶ／ｐｏｐｌｅｘ质粒载体对变应性鼻炎小鼠进行治疗，结果表明：经ＩＬ．１２基因治疗的变应性鼻炎小鼠血清总ＩｇＥ水平显著性下降，同时其鼻黏膜嗜酸性粒细胞浸润显著减少。这提示ＩＬ．１２以其逆转变应性鼻炎Ｔｈｌ／Ｔｈ２失衡的特点，能有效治疗变应性鼻炎。但是，由于ＩＬ．１２全身用药有相当大的毒副作用，局部用药难以控制等原因，ＩＬ．１２在人类变应性鼻炎中的应用相关研究仍然很少，ＩＬ．１２基因治疗距离临床应用还有很长的路要走，相关研究还有待进一步深入。４．３ＩＬ－２７与Ｔｈｌ／Ｔｈ２反应的关系ＩＬ－２７及其受体的结构白细胞介素．２７（ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ，ＩＬ．２７）是２００２年由Ｐｌｆａｎ等在基因库中找到的一４．３．１个新基因，用ＳＤＳ．ＰＡＧＥ电泳技术检测分离出基因的产物分子质量为２８ｋｕ由此命名为ｐ２８，进一步的研究结果证实ｐ２８与ＥＢ病毒诱导基因３（Ｅｐｓｔｅｉｎ．Ｂａｒｒｉｎｄｕｃｅｄｇｅｎｅｖｉｒｕｓ３，ＥＢｌ３）形成的异二聚体，被命名为ＩＬ．２７，属于ＩＬ．１２家族。ＩＬ．１２家族成员包括ＩＬ．１２，ＩＬ．２３，ＩＬ．２７以及ＩＬ．３５，前三者及其各自受体在结构上的相似性，使得它们在发挥调节ＮＫ细胞活性、Ｔ细胞增殖和细胞因子产生以及抗体类别转换等方面的功能相互重叠但又不完全相同。ＩＬ．２７由两条多肽链ＥＢｌ３和螺旋亚基ｐ２８（ＩＬ．１２、ｐ３５相关多肽）通过二硫键组成。ＥＢｌ３是一种分泌型糖蛋白，为造血因子受体家族的成员，最初在ＥＢ病毒转化的Ｂ细胞培养上清液中被发现，经反转录实时荧光定量ＰＣＲ证实。ＩＬ．２７主要由活化的单核细胞、单核细胞衍生的树突状细胞及巨噬细胞产生。ＥＢｌ３和ｐ２８的基因分别定位于１９ｐ１３．３和１６ｐｌｌ。ｐ２８不与ＥＢｌ３结合时并无生物学活性，在分离ＥＢｌ３和ｐ２８转化细胞表达研究中，证明了ＥＢｌ３可协同ｐ２８独立地发挥其抗病毒以及抗肿瘤作用【Ｉ州。ＩＬ．２７Ｒ也是异二聚体，主要由Ｔ细胞的细胞因子受体（ｗｓｘ．１／ＴＣＣＲ）１３硕士学位论文第四章讨论与ｇｐｌ３０共同组成【１７】，ＷＳＸ．１／ＴＣＣＲ属于Ｉ型细胞因子受体家族成员，１主１６３６个氨基酸组成。人和小鼠ＷＳＸ—Ｉ厂ｒＣＣＲ氨基酸序列有６２％的同源性。４．３．２ＩＬ．２７对Ｔｈｌ反应的调节作用ＩＬ．２７是ＩＬ．１２家族成员之一，能促进Ｔｈｌ型细胞生成，同时抑制Ｔｈ２型细胞因子产生和眦型细胞极化，在维持机体的免疫自稳中起着重要的作用。ＩＬ．２７可以促进辅助性Ｔ淋巴细胞的增值，也可以促进其向１１１ｌ细胞分化及产生ＩＦＮ－，ｒ，而在高度Ｔｈｌ极化的情况下，ＩＬ．２７的主要作用是限制Ｔｈｌ免疫反应的强度和持续时间，从而保护机体免受过度的免疫反应的损伤。研究表明ＩＬ．２７可通过多种机制促进Ｔｈｌ型免疫的发生，并将这种反应控制在一定的范围内。（１）ＩＬ．２７刺激ＮＫ细胞产生ＩＮＦ－ｖＮＫ细胞是固有免疫系统的一种细胞成分，它分泌的ＩＮＦ－７在Ｔｈｌ型免疫的发生中具有重要作用。Ｐｆｌａｎｚ等Ｉｌ８ｌ发现体外培养的人ＮＫ细胞受至ｌＪｌＬ．２或ＩＬ．１２束ｌＪ激时，仅产生少量的ＩＦＮ吖，此时加入ＩＬ．２７并不能使ＩＦＮ．Ｙ的增多。而在ＩＬ．２和ＩＬ－１２同时存在的情况下，外加的ＩＬ．２７，能显著增ｊＪＩ：ＩＮＫ细胞产生ＩＦＮ吖。这些研究表明，ＩＬ．２７诱导ＮＫ细胞产生ＩＦＮ吖必须以ＩＬ．２和ＩＬ．１２的同时存在为条件。ＩＬ．２７对ＮＫ细胞的这种作用可能是其促进Ｔｈｌ型免疫发生的机制之一。（２）ＩＬ．２７协同ＩＬ．１２诱导初始ＣＤ４＋Ｔ细胞向Ｔｈｌ细胞的分化体外实验表明，当ＩＬ．１２存在时，ＩＬ．２７可以剂量依赖性地与ＩＬ．１２协同作用诱导初始ＣＤ４＋Ｔ细胞向Ｔｈｌ细胞的分化和ＩＦＮ吖的产生１１９ｌ。信号转导途径的研究发现ＩＬ．２７可通过激活信号转导和转录激活因子ｌ（ＳＴＡＴｌ）诱导Ｔ－ｂｅｔ及ＩＬ．１２Ｒｐ２的表达【２０１。ＩＬ．１２是促进初始ＣＤ４＋Ｔ细胞向Ｔｈｌ细胞发育的关键细胞因子，它主要通过激活信号转导和转录激活因子４（ＳＴＡＴ４）促进初始ＣＤ４＋Ｔ细胞向Ｔｈｌ细胞分化。然而静息的初始ＣＤ４＋Ｔ细胞不表达ＩＬ．１２受体的ｐ２亚单位（ＩＬ．１２Ｒ１３２）。Ｔ－ｂｅｔ是在Ｔｈｌ细胞的发育过程中具有中心作用的转录因子。Ｔ－ｂｅｔ的一个重要功能就是诱导初始ＣＤ４＋Ｔ细胞ＩＬ．１２Ｒ１３２的表达使其获得对ＩＬ．１２的反应性。故ＩＬ．２７协同ＩＬ．１２促进初始ＣＤ４＋Ｔ细胞产生ＩＦＮ吖的机制被认为是：几．２７诱导ＩＬ．１２Ｒ１３２的表达，表达ＩＬ．１２Ｒ１８２的初始ＣＤ４＋Ｔ细胞即可ＩＬ．１２的作用下向１１１１细胞分化并分泌ＩＦＮ吖。（３）ＩＬ－２７可通过上调初始ＣＤ４＋Ｔ细胞ＩＣＡＭ．１的表达促进其向Ｔｈｌ细胞分化虽然大多数研究表明ＩＬ．２７的主要作用是协同ＩＬ．１２促进Ｔｈｌ细胞的分１４硕十学位论文第四章讨论化，Ｌｕｃａｓ掣２１】最近的研究发现，在没有ＩＬ．１２时，ＩＬ．２７本身即可上调初始ＣＤ４＋Ｔ细胞表皮细胞间粘附因子（ＩＣＡＭ）．１的表达，通过ＩＣＡＭ．１／ＬＦＡ．１（ＬＦＡ．１由抗原呈递细胞表达）的相互作用促进其向Ｔｈｌ细胞分化。ＩＬ．２７的这种作用通过ＳＴＡＴｌ介导，而不依赖于ＳＴＡＴ４，Ｔ－ｂｅｔ和ＩＦＮ吖。相反，ＩＬ．１２促进Ｔｈｌ分化主要由ＳＴＡＴ４介导而不依赖于ＩＣＡＭ．Ｉ／ＬＦＡ．１之间的相互作用。这些结果表明，ＩＬ．２７亦可通过与ＩＬ．１２不同的途径促进Ｔｈｌ分化。（４）ＩＬ．２７与其它Ｔｈｌ型细胞因子共同促进Ｔｈｌ型免疫的发生在决定Ｔｈｌ细胞功能性分化的因素中，细胞因子微环境的作用尤为重要。已知的主要的Ｔｈｌ型细胞因子有ＩＬ．２、ＩＬ．１２、ＩＬ．２３、ＩＬ．１８、ＩＮＦ—ｙ等。ＩＬ．１２在Ｔｌｌｌ细胞分化过程中起主导作用。ＩＬ．２３可选择性作用于记忆性Ｔｈｌ细胞而促进其增殖和ＩＦＮ吖的产生。而ＩＬ．１８可与ＩＬ．１２协同作用增加效应ＣＤ４＋Ｔ细胞ＩＮＦ－Ｙ的产生。ＩＦＮ吖由活化的Ｔｈｌ细胞分泌，它一方面是Ｔｈｌ型免疫的效应分子，可活化巨噬细胞，另一方面它也可以通过诱导Ｔｈｌ细胞产生Ｔ－ｂｅｔ而进一步放大Ｔｈ！型免疫反应。作为最新发现的参与调节Ｔｈｌ分化的细胞因子，ＩＬ．２７在感染早期通过多种机制启动初始ＣＤ４＋Ｔ细胞向Ｔｈｌ细胞分化。（５）ＩＬ．２７对Ｔｈｌ型免疫的负调控作用正如前面提到的，Ｔｈｌ细胞因子功能亢进将导致炎症的慢性迁移、器官特异性自身免疫病、急性排斥反应和接触性皮炎的发病或免疫病理损伤，因此，在正常状态下，Ｔｈｌ型免疫也是一个受到严格调控的过程。而ＩＬ．２７的另一个重要功能是对Ｔｈｌ型免疫反应起负反馈调控作用，以使机体在防御性免疫及过度的免疫反应引起的病理性损伤之间保持平衡状态。利用ＷＳＸ．１基因敲除小鼠所做的研究表明，ＩＬ．２７能够限制ｎ１型免疫反应的强度和持续时间。Ｖｉｌｌａｒｉｎｏ等【１６】发现，感染鼠弓形虫的ＩＬ．２７Ｒ－／－（ＩＬ．２７受体缺陷）小鼠在感染急性期ＣＤ４＋Ｔ、ＣＤ８＋Ｔ细胞分泌ＩＦＮ－，／ｊｌ－．常，可以明显控制寄生虫复制，但是后期却不能下调免疫强度，成为致死性炎性反应，这是由于Ｔ细胞高度增殖，引起的免疫病理损伤仍然存在，小鼠不能耐受导致死亡的直接原因。ＩＬ．２７另一个重要的免疫抑制机制是直接或间接抑制促炎性细胞因子，特别是ＩＬ．２、ＩＬ．１７和ＩＬ．６【１７】，结核感染主要是引起Ｔｈｌ型细胞免疫反应，ＩＬ．２７Ｒ－／．小鼠在感染结核晚期产生大量促炎性细胞因子和广泛的炎性反应，从而加速了死亡【１７】。这些研究说明ＩＬ－２７对过度的Ｔｈｌ型免疫具有抑制作用。体外实验发现ＷＳＸ．１４（ｗＳＸ．１硕士学位论文第四章讨论缺陷）Ｔｈｌ细胞与正常Ｔｈｌ细胞具有更强的增殖反应，提示ＩＬ．２７是通过抑制Ｔｈｌ细胞的增殖而控制Ｔ１１ｌ型免疫的强度【２５１。最近的研究表明，ＩＬ．２７不仅可通过在活化的Ｔｈｌ细胞中激活ＳＴＡＴｌ而抑制其ＩＬ一２的分泌，还可抑￥１ＪＩＬ．２介导的增殖反应【２６１。这些为ＩＬ一２７如何抑制１１１ｌ型免疫反应这个问题提供了一种解释。４．３．３ＩＬ－２７与Ｔｈ２型免疫的关系ＩＬ．２７可促进Ｔｈｌ型细胞生成，同时抑制ｎ１２型细胞因子产生和Ｔｈ２型细胞极化１２７１，但其分子机制和影响Ｔｈ２型细胞极化的原因仍然不很清楚，可能与ＩＬ．２７抑制转录因子ＧＡＴＡ结合蛋Ｅｔ３（ＧＡＴＡ．３）和ＩＬ．２７协ＨＩＬ．１２产生ＩＦＮ吖通过ＳＴＡＴｌ途径诱导表达Ｔ－ｂｅｔ有关。Ｙｏｓｈｉｍｏｔｏ等【６】在关于过敏性哮喘小鼠模型中，证实了ＩＬ．２７可下调ＧＡＴＡ．３，并上调Ｔ．ｂｅｔ。ＧＡＴＡ．３是Ｔｌｌ２型细胞分化及Ｔｈｌ型和Ｔｈ２型细胞平衡的关键调节因子，属于ＧＡＴＡ转录因子家族，可结合进化上高度保守的锌指结构的ＷＧＡＴＡＲ（Ｗ＝Ａ／Ｔ；Ｒ＝Ａ／Ｇ）ＤＮＡ序列，在Ｔｈ２型细胞分化过程中，表达迅速上调，在Ｔｈｌ型细胞分化过程中下调，促进幼稚的ＣＤ４＋Ｔ细胞进入，Ｔｈｌ或Ｔｈ２型细胞是适应性免疫发展过程中重要的因素。Ｔｈ２型细胞产生ＩＬ４、ＩＬ．５和ＩＬ．１３，结合体液免疫诱导过敏性炎性反应。ＩＬ．４激活ＳＴＡＴ６以及转录因子ＧＡＴＡ．３的高度表达是诱导Ｔｈ２型细胞极化的必不可少的因素。Ａｒｔｉｓ等网研究感染鞭虫的ＩＬ２７Ｒ－／－ｄ、鼠，证明ＴＩＬ．２７抑￥０Ｔｈ２型细胞因子的产生。Ｍｉｙａｚａｋｉ等［２９１应用重型哮喘的ＩＬ２７Ｉ“小鼠，对气道高反应性以及肺部嗜酸性粒细胞浸润过程中针对抗原的反应做了详细的研究，结果发现，ＷＳＸ．１缺陷小鼠增加嗜酸性粒细胞的浸润导致肺部炎性反应加重，并且增＝｜ＪｌｌＩｇＥ产生，还能够通过独立的Ｔ－ｂｅｔ表达途径增加ＩＦＮ吖产生，卵清蛋白（ＯＶＡ）刺激后的ＷＳＸ．１缺陷小鼠使用乙酰胆碱激发气道反应比未处理的野生小鼠明显增强。因此，ＩＬ．２７在Ｔｈ２型细胞相关的疾病中起着举足轻重的正向作用。４．４ＩＬ－２７与哮喘的关系众所周知，哮喘与变应性鼻炎属于“同一个气道，同一种疾病”，两者都是Ｉ型超敏反应，其主要发病机制都是Ｔｈｌ／Ｔｈ２反应平衡失调。目前，ＩＬ．２７与哮喘的关系研究在国内外有所报道，Ｃｈ勰等【５ｌ检测了韩国哮喘患者ＩＬ．２７ｐ２８基因的５个１６硕士学位论文第四章讨论外显子和边界内含子序列（包括启动子区），发现在翻译起始点上游第９６４位点的Ａ／Ｇ转换型ＳＮＰｓ（基因频率Ａ＞Ｇ）与哮喘易感性最相关，说明了ＩＬ．２７ｐ２８与哮喘的遗传易感性紧密相关。Ｙｅｓｈｉｍｏｔｏ等１６】研究证明了用ＩＬ．２７鼻腔给药途径能有效缓解由卵清蛋白致敏引起气道高反应的动物模型，提示ＩＬ．２７抑制Ｔｌｌ２型细胞的生成能使Ｔｈ２型细胞极化，并提出了ＩＬ．２７有可能成为治疗哮喘的一种新途径。这些研究能够很好地说明ＩＬ．２７与哮喘的紧密关系，并且可以在特有的阶段起到对哮喘患者的保护和治疗作用。４．５ＩＬ．２７在变应性鼻炎中的应用前景目前，ＩＬ．２７与变应性鼻炎的关系国内外报道不多。潘刚强等【３０】证实过敏性鼻炎患者组ＩＦＮ吖、ＩＬ．２７较对照组均显著降低，表明过敏性鼻炎存在着Ｔｈｌ／Ｔｈ２反应失衡，主要是Ｔｈｌ反应降低，Ｔｈ２反应亢进。ＩＬ．１２治疗变应性鼻炎的研究已取得一定进展，而ＩＬ．２７治疗变应性鼻炎的研究却未见报道。本研究结果表明，免疫治疗后症状和体征记分改善的患者，ＩＬ．１２和ＩＬ．２７的表达水平均高于未经治疗的患者，且两者的表达水平有一定正相关性，提示ＩＬ．２７与ＩＬ．１２一样，可能是治疗变应性鼻炎的新靶点。１７硕士学位论文第五章结论第五章结论１．变应性鼻炎患者血清中ＩＬ．１２和ＩＬ．２７水平显著低于正常人，表明ＩＬ．２７和ＩＬ．１２在变应性鼻炎的发病机制中起作用。２．经免疫治疗症状和体征获得改善的变应性鼻炎患者，血清中ＩＬ．１２和ＩＬ一２７水平显著高于未经治疗的患者，表明ＩＬ．１２和ＩＬ．２７在变应性鼻炎免疫治疗中可能发挥免疫调节作用。３．ＩＬ一２７与ＩＬ．１２在变应性鼻炎患者血清中的表达水平有一定正相关性，提示ＩＬ一２７可能在变应性鼻炎的发病机制中与ＩＬ．１２发挥相似的作用，ＩＬ．２７有可能作为治疗变应性鼻炎的新靶点。１８硕七学位论文参考文献参考文献【ｌ】ＲｏｍａｇｎａｎｉＳ．Ｔｈｅｒｏｌｅｏｆｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅｓｉｎａｌｌｅｒｇｉｃｄｉｓｅａｓｅ［Ｊ］．ＡｌｌｅｒｇｙＣｌｉｎＩｍｍｕｎｏｌ，２０００，１０５：３９９－４０８．【２】董震，余翠萍．变应性鼻炎免疫治疗进展．中华耳鼻咽喉科杂志【Ｊ】，２０００，３５（４）：３０６－３０９．【３】周兵，韩德民，王彤，等．白细胞介素１２基因治疗小鼠变应性鼻炎的实验研究［Ｊ】．中华耳鼻咽喉头颈外科杂志，２００５，４０（６）：４４４—４４８．【４】ＨａｎＤＭ，ＺｈｏｕＢ，ＷａｎｇｔｏａｂｒｏｇａｔｅＴ，ｅｔａ１．ＩｎｔｒａｎａｓａｌａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｏｆＥｐｓｔｅｉｎ－－Ｂａｒｒｒｈｉｎｉｔｉｓ［Ｊ］．ｖｉｒｕｓ／ｌｉｐｏｐｌｅｘｅｏｓｉｎｏｐｈｉｌｌｉａｉｎｍｕｒｉｎｅｍｏｄｅｌｏｆａｌｌｅｒｇｉｃＣｈｉｎＭｅｄＪ（Ｅｎ９１），２００６．１１９（１２）：９９１－９９７．【５】ＣｈａｅＳＣ，ＬｉＣＳ，ＫｉｍＫＭ，ｅｔａ１．Ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎｏｆｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍｓｉｎｈｕｍａｎａｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ－２７ａｎｄｔｈｅｉｒａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ、析ｔＩｌａｓｔｈｍａｉｎＫｏｒｅａｎｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ［Ｊ］．ＨｕｍｃｌａｓｓｓｗｉｔｃｈｉｎｇＧｅｎｅｔ，２００７，５２（４）：３５５—３６１．【６】ＹｅｓｈｉｍｏｔｏＴ．ＯｋａｄａＫ，ＭｏｒｉｓｈｉｍａＮ，ｅｌａ１．ＩｎｄｕｃｔｉｏｎｏｆＩｇＧ２ａｍＢｃｅｌｌｓｂｙＩＬ·２７［Ｊ］．１ｍｍｕｎ０１．２００４，１７３（４）：２４７９—－２４８５．【７】中华耳鼻咽喉头颈外科杂志编委会鼻科组，中华医学会耳鼻咽喉头颈外科学分会鼻科学组．变应性鼻炎诊断和治疗指南（２００９年，武夷山）．中华耳鼻咽喉头颈外科杂志，２００９，４４：９７７．９７８．【８】龚非力．医学免疫学【Ｍ】．第２版．北京：科学出版社，２００４：３０２—３０３．【９】ＤｕｒｈａｍＳＲ，ＹｉｎｇＳ，ＶａｍｅｙＶＡ，ｅｔａ１．ＣｙｔｏｋｉｎｅｍｅｓｓｅｎｇｅｒＲＮＡｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎＩＬ－４，ｆｏｒＩＬ－３，ＩＬ·５，ａｎｄｇｒａｎｕｌｏｃｙｔｅ／ｍａｃｒｏｐｈａｇｅ－ｃｏｌｏｎｙ－ｓｔｉｍｕｌａｔｉｎｇｆａｃｔｏｒｉｎｔｈｅｎａｓａｌｍｕｃｏｓａａｆｔｅｒｌｏｃａｌａｌｌｅｒｇｅｎｐｒｏｖｏｃａｔｉｏｎ：ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐｔｏｔｉｓｓｕｅｅｏｓｉｎｏｐｈｉｌｉａ［Ｊ］．Ｉｍｍｕｎｏｌ，【１０】ＧｈａｆｆａｒＯ，ＬａｂｅｒｇｅＳ，１９９２，１４８：２３９０．２３９４．ＪａｃｏｂｓｏｎＭＲ，ｅｔａ１．ＩＬ·１３ｍＲＮＡａｎｄｉｍｍｕｎｏｒｅａｃｔｉｖｉｔｙｉｎａｌｌｅｒｇｅｎ－ｉｎｄｕｃｅｄｒｈｉｎｉｔｉｓ：ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎｗｉｔｈＩＬ·－４ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎａｎｄｍｏｄｕｌａｔｉｏｎｂｙｔｏｐｉｃａｌｇｌｕｃｏｃｏｒｔｉｃｏｉｄＢｉｏｌ，１９９７，１７：１７－２４．ｔｈｅｒａｐｙ［Ｊ］．ＡｍＪＲｅｓｐｉｒＣｅｌｌＭｏｌ【ｌｌ】ＫｌｅｉｎＪａｎＡ，ＤｉｊｋｓｔｒａＭＤ，ＢｏｋｓＳＳ，ｅｔａ１．ＩｎｃｒｅａｓｅｉｎＩＬ一８，ＩＬ·ｌＯ，ＩＬ－１３，１９硕士学位论文参考文献ａｎｄＲＡＮＴＥＳｍＲＮＡｌｅｖｅｌｓ（ｉｎｓｉｔｕｈｙｂｒｉｄｉｚａｔｉｏｎ）ｉｎｔｈｅｎａｓａｌｍｕｃｏｓａａｆｔｅｒｎａｓａｌａｌｌｅｒｇｅｎｐｒｏｖｏｃａｔｉｏｎ［Ｊ］．ＡｌｌｅｒｇｙＣｌｉｎＩｍｍｕｎｏｌ，１９９９，１０３：４４１－４５０．【１２】ＫｌｅｉｎｊａｎｉｎｔｒａｎａｓａｌＡ，ＨｏｌｍＡＦ，ＤｉｊｋｓｔｒａＭＤ，ｅｔａ１．ＰｒｅｖｅｎｔｉｖｅｔｒｅａｔｍｅｎｔｏｆｆｌｕｔｉｃａｓｏｎｅｐｒｏｐｉｏｎａｔｅｒｅｄｕｃｅｓｃｙｔｏｋｉｎｅｍＲＮＡｅｘｐｒｅｓｓｉｎｇｃｅｌｌｓａｂｅｆｏｒｅａｎｄｄｕｒｉｎｇｓｉｎｇｌｅｎａｓａｌａｌｌｅｒｇｅｎｐｒｏｖｏｃａｔｉｏｎ［Ｊ］．ＣｌｉｎＥｘｐＡｌｌｅｒｇｙ，２０００，３０：１４７６－１４８５．【１３】ＥｒｉｎＥＭ，ＺａｃｈａｒａｓｉｅｗｉｃｚＡＳ，ＮｉｃｈｏｌｓｏｎＧＣ，ｅｔａ１．Ｔｏｐｉｃａｌｃｏｒｔｉｃｏｓｔｅｒｏｉｄｉｎｈｉｂｉｔｓｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ－４，－５ａｎｄ一１３ｉｎｎａｓａｌＥｘｐｓｅｃｒｅｔｉｏｎｓｆｏｌｌｏｗｉｎｇａｌｌｅｒｇｅｎｃｈａｌｌｅｎｇｅ［Ｊ］．Ｃｌｉｎ【１４】ＷｒｉｇｈｔＥＡｌｌｅｒｇｙ，２００５，３５：１６０８·１６１４．Ｐ，ＦｒｅｎｋｉｅｌＳ．ＥｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆＤ，ＣｈｒｉｓｔｏｄｏｕｌｏｐｅｕｌｏｓＩＬ－１２（ｂｅｔａｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ（ＩＬ）一１２（ｐ４０）ｍａｄｃｈｒｏｎｉｃ２）ｒｅｃｅｐｔｏｒｓｉｎａｌｌｅｒｇｉｃｒｈｉｎｉｔｉｓａｎｄｓｉｎｕｓｉｔｉｓ［Ｊ］．ＣｌｉｎＥｘｐＡｌｌｅｒｇｙ，１９９９，２９（１０）：１３２０—１３２５．【１５】吕梅，董震，杨占泉．自细胞介素－１２在变应性鼻炎鼻黏膜中的表达【Ｊ】．临床耳鼻咽喉科杂志．２００２，１６（８）：４２３—４２５．【１６】ＬａｒｏｕｓｓｅｒｉｅＦ，ＢａｒｄｅｌＥ，ＰｆｌａｎｚｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｉｎＥｐｓｔｅｉｎ··ＢａｒｒＳ，ｅｌａ１．Ａｎａｌｙｓｉｓｏｆｉｎｔｅｄｅｕｋｉｎ－２７（ＥＢｌ３／ｐ２８）ｖｉｒｕｓａｎｄｈｕｍａｎＴ··ｃｅｌｌｌｅｕｋｅｍｉａｖｉｒｕｓｔｙｐｅｌ－ａｓｓｏｃｉａｔｅｄｌｙｍｐｈｏｍａｓ：ｈｅｔｅｒｏｇｅｎｅｏｕｓｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆＥＢｌ３ｓｕｂｕｎｉｔｂｙｔｕｍｏｒａｌｃｅｌｌｓ［Ｊ］．ＡｍＪＰａｔｈｏｌ，２００５，１６６（４）：１２１７－１２２８．【１７】ＰｆｌａｎｚＳ．ＨｉｂｂｅｒｔＬ，ＭａｔｔｓｏｎＪ，ｅｌａ１．ＷＳＸ—ｌａｎｄｇｌｙｅｏｐｒｏｔｅｉｎ１３０ｃｏｎｓｔｉｔｕｔｅａｓｉｇｎａｌ—ｔｒａｎｓｄｕｃｉｎｇｒｅｅｅｐｔｏｒｆｏｒＩＬ－２７［Ｊ］．Ｉｍｍｕｎｏｌ，２００４．１７２（４）：２２２５—２２３１．ｈｅｔｅｒｏｄｉｍｅｒｉｃｃｙｔｏｋｉｎｅ【１８】ＰｆｌａｎｚＳ，ＴｉｍａｎｓＪＣ，ＣｈｅｕｎｇＪ，ｅｌ以．１Ｌ一２７，ａｃｏｍｐｏｓｅｄｏｆＥＢｌ３ａｎｄｐ２８ｐｒｏｔｅｉｎ，ｉｎｄｕｃｅｓｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎｏｆｎａｉ＇ｖｅＣＤ４＋Ｔｃｅｌｌｓ［Ｊ］．Ｉｍｍｕｎｉｔｙ，２００２，１６（６）：７７９－７９０．【１９】ＬｕｃａｓＳ，ＧｈｉｌａｒｄｉＮ，ＬｉＣＤ４＋ＴｃｅｌｌｓＪ，ｅｔａ１．ＩＬ一２７ｒｅｇｕｌａｔｅｓＩＬ－１２ｒｅｓｐｏｎｓｉｖｅｎｅｓｓｏｆｎａｉｖｅｔｈｒｏｕｇｈＳＴＡＴｌ－ｄｅｐｅｎｄｅｎｔａｎｄ—ｉｎｄｅｐｅｎｄｅｍｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ［Ｊ］．ＰｒｏｅＮａｔｌＡｃａｄＳｃｉ，２００３，１００（２５）：１５０４７—１５０５２．［２０】ＫａｍｉｙａＳ，ＯｗａｋｉＺＭｏｒｓｈｉｍａＮ，ｅｔＩＬ·２７－ｉｎｄｕｃｅｄａ１．ＡｎｎｏｔｉｎｄｉｓｐｅｎｓａｂｌｅｒｏｌｅｆｏｒＳＴＡＴＩｉｎｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎＴ－ｂｅｔｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｂｕｔｏｆ彻脚ｅＣＤ４＋Ｔｃｅｌｌｓ［Ｊ］．Ｉｍｍｕｎｏｌ，２００４，１７３（６）：３８７１－３８７７．【２ｌ】ＯｗａｋｉＴ，ＡｓａｋａｗａＭ，ＭｏｒｉｓｈｉｍａＮ，ｅｔａ１．ＡｒｏｌｅｆｏｒＩＬ一２７ｉｎｅａｒｌｙ２０ｒｅｇｕｌｍｉｏｎ硕士学位论文参考文献ｏｆＴｈｌＤｉｆｆｅｒｅｅｎｔｉａｔｉｏｎ［Ｊ］．Ｉｍｍｕｎｏｌ，２００５，１７５（４）：２１９１．２２００．Ｓ，ＨｉｍｅｎｏＫ，ＭｉｙａｚａｋｉＹｅｔｉｎｆｅｃｔｉｏｎｂｙ【２２】Ｈａｍａｎｏａ１．Ｗｓｘ一１ｉｓｒｅｑｕｉｒｅｄｆｏｒｒｅｓｉｓｔａｎｃｅｔｏＴｒｙｐａｎｏｓｏｍａｃｒｕｚｉｒｅｇｕｌａｔｉｏｎｏｆｐｒｏｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙｃｙｔｏｋｉｎｅｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ［Ｊ］．Ｉｍｍｕｎｉｔｙ，２００３，１９（５）：６５７－６６７．【２３】ＹａｍａｎａｋａＡ，ＨａｍａｎｏＳ，ＭｉｙａｚａｋｉＹｅｔｃｙｔｏｋｉｎｅｓｂｙａ１．ＨｙｐｅｒｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎｏｆｐｒｏｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙＷＳＸ－１一ｄｅｆｉｃｉｅｎｔＮＫＴｃｅｌｌｓｉｎｃｏｎｃａｎａｖａｌｉｎＡ－ｉｎｄｕｃｅｄｈｅｐａｔｉｔｉｓ［Ｊ］．Ｉｍｍｕｎｏｌ，２００４，１７２（６）：３５９０－３５９６［２４】ＨｏｌｓｈｅｒＣ，ＨｏｌｓｃｈｅｒＡ，ＲｕｃｋｅｄＤ，ｅｔａ１．ＴｈｅＩＬ．２７ｒｅｃｅｐｔｏｒｃｈａｉｎＷＳＸ．１ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｌｌｙｒｅｇｕｌａｔｅｓａｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌｉｍｍｕｎｉｔｙａｎｄｓｕｒｖｉｖａｌｄｕｒｉｎｇｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ［Ｊ］．Ｉｍｍｕｎｏｌ，２００５，１７４（６）：３５３４—３５４４．［２５】ＶｉｌｌａｒｉｎｏｓｕｐｐｒｅｓｓＡ，ＨｉｂｂｅａＴｃｅｌｌＬ，ＬｉｅｂｅｒｍａｎｈｙｐｅｒａｃｔｉｖｉｔｙＬ，ｅｌａ１．ＴｈｅＩＬ一２７Ｒ（ｗｓｘ－１）ｉｓｒｅｑｕｉｒｅｄｔｏ２００３，ｄｕｒｉｎｇｉｎｆｅｃｔｉｏｎ［Ｊ］．Ｉｍｍｕｎｉｔｙ，１９（５）：６４５·６５５．【２６】ＶｉｌｌａｒｉｎｏＡ，ＳｔｕｍｈｏｆｅｒＪ，ＳａｒｉｓＣ，ｅｌａ１．ＩＬ－２７ｌｉｍｉｔＩＬ一２ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎｄｕｒｉｎｇＴｈｌｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ［Ｊ］．ＪＩｍｍｕｎｏｌ，２００６，１７６（１）：２３７．２４７．【２７１ＹｅｓｈｉｍｏｔｏＴ，ＹａｓｕｄａＫ，ｅｌａ１．１Ｌ一２７ｓｕｐｐｒｅｓｓｅｓＴｈ２ｃｅｌｌｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔａｎｄＴｈ２ｃｙｔｏｋｉｎｅｓｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎｆｒｏｍｐｏｌａｒｉｚｅｄＴｈ２ｃｅｌｌｓ：ａｎｏｖｅｌｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｗａｙｆｏｒＴｈ２－ｍｅｄｉａｔｅｄａｌｌｅｒｇｉｃｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ［Ｊ］．ＪＩｒｎｍｕｎｏｌ，２００７，１７９（７）：４４１５－４４２３．【２８】ＡｒｔｉｓＤ，ＪｏｈｎｓｏｎＬＭ，ＪｏｙｅｅＫ，ｅｌａ１．Ｃｕｔｔｉｎｇｅｄｇｅ：ｅａｒｌｙＩＬ４ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎｇｏｖｅｒｎｓｔｈｅｒｅｑｕｉｒｅｍｅｎｔｆｏｒＩＬ·－２７··ＷＳＸ－１ｓｉｇｎａｌｉｎｇｉｎｔｈｅｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔＯｆｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅＴｈｌｃｙｔｏｋｉｎｅＩｍｍｕｎｏｌ，２００４，１ｒｅｓｐｏｎｓｅｓｆｏｌｌｏｗｉｎｇＬｅｉｓｈｍａｎｉａｍａｊｏｒｉｎｆｅｃｔｉｏｎ［Ｊ］．Ｊ７２（８）：４６７２—４６７５．［２９】ＭｉｙａｚａｋｉＹ，ＩｎｏｕｅＨ，ＭａｔｓｕｍｕｒａＭ，ｅｌａ１．ＥｘａｃｅｒｂａｔｉｏｎｏｆｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌｂｙａｕｇｍｅｎｔｅｄＴｈ２ｒｅｓｐｏｎｓｅｓｉｎａｌｌｅｒｇｉｃａｓｔｈｍａＷＳＸ—ｌ－ｄｅｆｉｃｉｅｎｔｍｉｃｅ［Ｊ］．ＪＩｍｍｕｎｏｌ，２００５，１７５（４）：２４０１－２４０７．【３０】潘刚强，袁岳沙，陈杰，等．Ｔｈｌ／Ｔｈ２细胞因子在过敏性鼻炎患者表达水平研究［Ｊ】．检验医学与临床，２０１０，２２（１１）：２４７２．２４７３．２１硕士学位论文综述综述ＩＬ．２７与变应性鼻炎的研究前景朱华兵综述曾强伍伟景审校变应性鼻炎（ａｌｌｅｒｇｉｃｒｈｉｎｉｔｉｓ，ＡＲ）是特应型个体接触致敏原后由ＩｇＥ介导的介质释放，并有多种免疫活性细胞和细胞因子等参与的鼻黏膜非感染性炎症反应性疾病，属于Ｉ型超敏反应，临床上以鼻塞、鼻痒、打喷嚏、流清涕为主要症状，其发病率约为１０％，－－，２５％，在全球有逐渐增加的趋势。变应性鼻炎对患者的学习、工作及生活造成了严重的影响，并极大地加重了社会经济负担，尤其让人担忧的是，变应性鼻炎还是哮喘发生的最重要的危险因素【ｌＪ。目前，变应性鼻炎的发病机制并不完全明了，近年Ｔｈｌ／Ｔｈ２平衡失调学说获得较广泛认同。该学说认为变应性鼻炎是一系列细胞间相互作用的结果，开始于抗原呈递细胞（ａｎｔｉｇｅｎｐｒｅｓｅｎｔｉｎｇｃｅｌｌ，ＡＰＣ）对变应原的摄取和加工处理，而后传递给辅助性Ｔ淋巴细胞（１１１细胞），使Ｔｈ细胞的分化向Ｔｈ２反应偏移，ＴｈＩＦＦｈ２反应平衡被打破，成为Ｔｈ２＞Ｔｈｌ反应，ｑｌａ２细胞及相关因子将诱导Ｂ细胞释放ＩｇＥ；当相同的变应原再次进入时，与ＩｇＥ结合，使肥大细胞脱颗粒，释放组胺、前列腺素和白三烯等炎性介质，引起毛细血管扩张及通透性增加、腺体分泌增加、嗜酸性粒细胞浸润等，由此引起变应性鼻炎的临床症状。近年来，人们发现白介素．２７（ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ２７，ＩＬ．２７）作为一种Ｔｈｌ型细胞因子具有广泛的免疫调节作用，既能促进Ｔｈｌ型细胞生成，同时可抑制啦型细胞因子产生和Ｔｈ２型细胞极化，在维持机体的免疫自稳中起着重要的作用。ＩＬ．２７对Ｔｈ２型相关疾病的转归起着重要的正向调节作用，这些都提示ＩＬ．２７可以逆转变应性鼻炎的Ｔｈｌ／Ｔｈ２失衡，ＩＬ．２７基因治疗变异性鼻炎可能是一种很有潜力的治疗方法［２，３１。１ＩＬ－２７及其受体ＩＬ－２７及其受体的结构１．１硕士学位论文综述ＩＬ．２７是２００２年Ｉ扫Ｐｌｆａｎ等在基因库中找到的一个新基因，用ＳＤＳ．ＰＡＧＥ电泳技术检测分离出基因的产物分子质量为２８ｋｕ，由此命名为ｐ２８，进一步的研究结果证实ｐ２８与ＥＢ病毒诱导基因３（Ｅｐｓｔｅｉｎ－Ｂａｒｒｖｉｒｕｓｉｎｄｕｃｅｄｇｅｎｅ３，ＥＢｌ３）形成的异二聚体，被命名为ＩＬ．２７，属于ＩＬ．１２家族。ＩＬ．１２家族成员包括ＩＬ．１２，ＩＬ．２３，ＩＬ．２７以及ＩＬ．３５，前三者７－－－者及其各自受体在结构上的相似性，使得它们在发挥调节ＮＫ细胞活性、Ｔ细胞增殖和细胞因子产生以及抗体类别转换等方面的功能相互重叠但又不完全相同。ＩＬ。２７由两条多肽链ＥＢｌ３和螺旋亚基ｐ２８（ＩＬ．１２、ｐ３５相关多肽）通过二硫键组成。ＥＢｌ３是一种分泌型糖蛋白，为造血因子受体家族的成员，最初在ＥＢ病毒转化的Ｂ细胞培养上清液中被发现。经反转录实时荧光定量ＰＣＲ证实。ＩＬ．２７主要由活化的单核细胞、单核细胞衍生的树突状细胞及巨噬细胞产生。ＥＢｌ３和ｐ２８的基因分别定位于１９ｐ１３．３和１６ｐｌｌ。ｐ２８不与ＥＢｌ３结合时并无生物学活性，在分离ＥＢｌ３和ｐ２８转化细胞表达研究中，证明］＂ＥＢｌ３可协Ｉ司ｐ２８独立地发挥其抗病毒以及抗肿瘤作用［４１。ＩＬ．２７Ｒ也是异二聚体，主要由Ｔ细胞的细胞因子受体（ｗｓｘ．１／ＴＣＣＲ）与ｇｐｌ３０共同组成【３】，ＷＳＸ．１／ＴＣＣＲ属于Ｉ型细胞因子受体家族成员，由６３６个氨基酸组成。人和小鼠ＷＳｘ－ｌ／ＴＣＣＲ氨基酸序列有６２％的同源性。１．２ＩＬ－２７的生物学活性及其调节ｇｐｌ３０分子是ＩＬ－６的信号转导链，也是ＩＬ—ｌｌ、白血病抑制因子（１ｅｕｋｅｍｉａｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙｆａｃｔｏｒ，ＬＩＦ）、睫状神经营养因子（ｃｉｌｉａｒｙｎｅｕｒｏｔｒｏｐｈｉｃｆａｃｔｏｒ，ＣＮＴＦ）和心肌营养素ｌ（ｃａｒｄｉｏｔｒｏｐｈｉｎ－１，ＣＴ．１）共用的受体和信号转导链，由９１８个氨基酸组成【６】。ＷＳＸ－１和ｇｐｌ３０均不能单独传递信号给ＩＬ·２７，它们组成的复合物是介导ＩＬ．２７生物学效应的必要受体形式，ＷＳＸ一１主要与ＩＬ．２７互相识别，ｇｐｌ３０主要影响Ｔ细胞作用的过程。ＷＳＸ．１和ｇｐｌ３０Ｊ丕共同表达于单核细胞、肥大细胞、树突状细胞、ＮＫＴ细胞、内皮细胞及朗格汉斯细胞【５】。ＷＳＸ．１主要表达于淋巴组织，有研究发现ＷＳＸ．１在初始的Ｔ细胞中表达较低，但在固有性效应细胞（ＮＫ及ＮＫＴ细胞）与适应性效应细胞（效应、调节和记忆性Ｔ细胞）中高水平表达【７１。ｇｐｌ３０广泛分布于各种组织细胞。ＩＬ．２７Ｒ在Ｔ细胞和ＮＫ细胞中表达水平最高。ＩＬ．２７与受体结合主要激活ＪＡ列ＳＴＡＴ信号转导途径。ＩＬ．２７在ＣＤ４＋和ＣＤ８＋Ｔ细胞中激活ＪＡＫＩ、ＪＡＫ２、ＴＹＫ２、ＳＴＡＴｌ．５，还可在Ｂ细胞中激活信号转导和转录激活因子ｌ硕士学位论文综述（ＳＴＡＴｌ），在单核细胞中激活ＳＴＡＴｌ和ＳＴＡＴ３，在肥大细胞中激活ＳＴＡＴ３［卯。由此可见，ＩＬ．２７ｆｌ皂在各种细胞中激活不同的ＪＡＫ／ＳＴＡＴ通路而引起特异的生物学效应，可以影响多种免疫效应性细胞，并与许多疾病的发生紧密相关。２ＩＬ．２７与细胞免疫ＩＬ．２７与Ｔｈｌ型免疫的关系ＩＬ．２７可以在Ｔ细胞分化早期通过Ｊ剐科ＳＴＡＴｓ途径活化Ｔ．ｂｅｔ促进ＣＤ４＋Ｔ细胞２．１向Ｔｈｌ型细胞分化，但不能诱导记忆性ＣＤ４＋Ｔ细胞增殖。目前已知ＩＬ．１２是Ｔｈｌ型细胞发育的关键细胞因子，而其发育的关键转录因子是Ｔ．ｂｅｔ。所以ＩＬ．２７可协同ＩＬ－１２显著刺激ＮＫ细胞促进初始Ｔ细胞产生ＩＦＮ吖，消除细胞内病原体，因为ＩＬｌ２的一个异二聚体ｐ４０和ｐ３５的亚基通过Ｔｈｌ型细胞激活ＳＴＡＴ４诱导ＩＦＮ吖产生，且这种作用可以不依赖于ＩＬ．１２活化ＳＴＡＴｌ、ＳＴＡＴ３途径。Ｏｗａｋｉ掣８】研究发现ＩＬ一２７可以通过活化ＳＴＡＴＩ途径诱导初始ＣＤ４＋Ｔ细胞高表达细胞间黏附分子（ｉｎｔｅｒｃｅｌｌｕｌａｒａｄｈｅｓｉｏｎｍｏｌｅｃｕｌｅ，ＩＣＡＭ）．１，同时介导ｐ３８ＭＡＰＫ通过ＩＣＡＭ．１／ＬＦＡ．１信号转导途径来促进Ｔｈｌ型细胞分化。ＩＬ．２７与其他Ｔｈｌ型细胞因子（ＩＬ．２３、ＩＬ．８、ＩＦＮ吖等）共同促进Ｔｈｌ型免疫。有研究结果表明，ＩＬ．２７Ｒ－／．（ＩＬ．２７受体缺陷）小鼠很容易受到利什曼原虫感染的重要原因就是ｎ１１型细胞功能受损【９】，研究人员发现ＥＢｌ３亚基缺陷小鼠对盲肠结扎术（ＣＬＰ）诱发的腹膜炎抵抗力明显增强，白细胞聚集，细菌清除能力和局部炎性反应控制能力增强，而野生型小鼠注射ＥＢｌ３亚基后这一优势受到抑制，利用可溶性ＩＬ．２７受体融合蛋白阻断ＩＬ．２７功能，可明显增力ｎＣＬＰ后小鼠的存活率【Ｉｏｌ，说明在强烈的极化刺激下（如寄生虫、细菌感染），ＩＬ．２７促进Ｔｈｌ型细胞反应的作用与它抑制效应Ｔ细胞增殖和产生细胞因子的作用相比是次要的。在由Ｔｈｌ型细胞反应介导的实验性自身免疫性脑脊髓膜炎和自身免疫性关节炎模型中，给予外源性ＩＬ．２７ｐ２８抗体可有效缓解疾病的进程【１１，１２１。在ＣＤ４＋Ｔ细胞完全活化后ＩＬ．２７可以通过活化ＳＴＡＴ３途径抑带ＩＪＣＤ４＋Ｔ细胞产生各种促炎性细胞因子，发挥抗炎作用。但是，ＩＬ．２７的抗炎机制目前仍不清楚，ＩＬ．２７是否只在初始阶段分化Ｔ细胞或是依赖完全极化的Ｔｈｌ型细胞来抑制炎性细胞因子的产生。硕士学位论文综述２．２ＩＬ一２７与＂Ｉ：ｈ２型免疫的关系１Ｌ．２７可促进Ｔｈｌ型细胞生成，同时抑制Ｔｈ２型细胞因子产生和Ｔｈ２型细胞极化【１３１，但其分子机制和影响Ｔｈ２型细胞极化的原因仍然不很清楚，可能与ＩＬ．２７抑制转录因子ＧＡＴＡ结合蛋白３（ＧＡＴＡ．３）和ＩＬ．２７协同ＩＬ．１２产生ＩＦＮ－７通过ＳＴＡＴｌ途径诱导表达Ｔ．ｂｅｔ有关。Ｙｏｓｈｉｍｏｔｏ等【１４】在关于过敏性哮喘小鼠模型中，证实了ＩＬ．２７可下调ＧＡＴＡ．３，并上调Ｔ．ｂｅｔ。ＧＡＴＡ．３是Ｔｈ２型细胞分化及Ｔｈｌ型和Ｔｈ２型细胞平衡的关键调节因子，属于ＧＡＴＡ转录因子家族，可结合进化上高度保守的锌指结构的ＷＧＡＴＡＲ（ｗ＝．Ａ厂ｒ；Ｒ－ＷＧ）ＤＮＡ序列，在Ｔｈ２型细胞分化过程中，表达迅速上调，在Ｔｈｌ型细胞分化过程中下调，促进幼稚的ＣＤ４＋细胞进入，Ｔｈｌ或Ｔｈ２型细胞是适应性免疫发展过程中重要的因素。Ｔｈ２型细胞产生ＩＬ４、ＩＬ．５和ＩＬ－１３，结合体液免疫诱导过敏性炎性反应。ＩＬ一４激活ＳＴＡＴ６以及转录因子ＧＡＴＡ．３的高度表达是诱导Ｔｈ２型细胞极化的必不可少的因素。Ａｒｔｉｓ等【９】研究感染鞭虫的ＩＬ２７Ｒ－／．小鼠，证明了ＩＬ．２７抑ＮＴｈ２型细胞因子的产生。Ｍｉｙａｚａｋｉ等［１５】应用重型哮喘的ＩＬ２７Ｒ－／．小鼠，对气道高反应性（ＡＨＲ）以及肺部嗜酸性粒细胞浸润过程中针对抗原的反应做了详细的研究，结果发现，ＷＳＸ．１缺陷小鼠增加嗜酸性粒细胞的浸润导致肺部炎性反应加重，并且增２口ＩｇＥ产生，还能够通过独立的Ｔ．ｂｅｔ表达途径增Ｊ￥１ＩＦＮｍ产生，卵清蛋Ｉ兰Ｉ（ＯＶＡ）＊ｔＪ激后的ＷＳＸ．１缺陷小鼠使用乙酰胆碱激发气道反应比未处理的野生小鼠明显增强。因此，ＩＬ．２７在Ｔｈ２型细胞相关的疾病中起着举足轻重的正向作用。２．３ＩＬ－２７与免疫抑制反应的关系正如前面提到的，Ｔｈｌ细胞因子功能亢进将导致炎症的慢性迁移、器官特异性自身免疫病、急性排斥反应和接触性皮炎的发病或免疫病理损伤。而ＩＬ．２７的另一个重要功能是对Ｔｈｌ型免疫反应起负反馈调控作用，以使机体在防御性免疫及过度的免疫反应引起的病理性损伤之间保持平衡状态。利用ＷＳＸ．１基因敲除小鼠所做的研究表明，ＩＬ．２７能够限制Ｔｈｌ型免疫反应的强度和持续时间。Ｖｉｌｌａｒｉｎｏ等【ｌ６】发现，感染鼠弓形虫的ＩＬ．２７Ｒ－／．小鼠在感染急性期ＣＤ４＋Ｔ、ＣＤ８＋Ｔ细胞分泌ＩＦＮ吖正常，可以明显控制寄生虫复制，但是后期却不能下调免疫强度，成为致死性炎性反应，这是由于Ｔ细胞高度增殖，引起的免疫病理损伤仍然存在，小鼠硕士学位论文综述不能耐受导致死亡的直接原因。ＩＬ．２７另一个重要的免疫抑制机制是直接或间接抑制促炎性细胞因子，特别是ＩＬ．２、ＩＬ一１７和ＩＬ．６【１７１，结核感染主要是引起Ｔｈｌ型细胞免疫反应，ＩＬ．２７Ｒ－／－小鼠在感染结核晚期产生大量促炎性细胞因子和广泛的炎性反应，从而加速了死亡【１７１。这些研究说明ＩＬ．２７对过度的Ｔｈｌ型免疫具有抑制作用。体外实验发现ＷＳＸ．１－／－Ｔｈｌ细胞与正常Ｚｈｌ细胞具有更强的增殖反应，提示ＩＬ．２７是通过抑制Ｔｈｌ细胞的增殖而控制Ｔｈｌ型免疫的强度【２５】。最近的研究表明，ＩＬ．２７不仅可通过在活化的Ｔｈｌ细胞中激活ＳＴＡＴｌ而抑制其ＩＬ．２的分泌，还可抑ｆｌ扣ＪＩＬ．２介导的增殖反应【１６１。这为ＩＬ．２７如何抑制１１１１型免疫反应这个问题提供了一种解释。２．４ＩＬ．２７与其他免疫细胞的关系ＩＬ．２７与其他免疫细胞也有联系，如ＮＫ细胞、巨噬细胞、肥大细胞等。ＩＬ．２７可协同ＩＬ．１２促进ＮＫ细胞产生ＩＦＮ．丫，促进肥大细胞产生ＩＦＮ．ｒ和ＩＬ．１，促进单核细胞产生ＩＬ．１、ＩＬ．１２、ＩＬ．１８和ＴＮＦ等炎性细胞因子，ＩＬ．２７还能通过抑制活化的巨噬细胞膜表面ＩＬ．１２／２３ｐ４０的表达来抑制巨噬细胞的活性。ＣＤ４＋Ｔ、ＣＤ８＋Ｔ调节性Ｔ细胞和记忆Ｔ细胞、Ｂ细胞、静止的ＮＫ细胞、ＮＫＴ细胞、巨噬细胞和肥大细胞也表达ＩＬ．２７受体，当受体缺失时，炎性细胞因子激活、产生增多【１４】。这就说明了ＩＬ．２７与许多免疫细胞有着密切的联系。３ＩＬ．２７与哮喘的关系众所周知，哮喘与变应性鼻炎属于“同一个气道，同一种疾病”，两者都是Ｉ型超敏反应，其主要发病机制都是Ｔｈｌ／Ｔｈ２反应平衡失调。目前，几．２７与哮喘的关系研究在国内外有所报道，Ｃｈａｅ等【．７】检测了韩国哮喘患者ＩＬ．２７ｐ２８基因的５个外显子和边界内含子序列（包括启动子区），发现在翻译起始点上游第９６４位点的Ａ／Ｇ转换型ＳＮＰｓ（基因频率Ａ＞Ｇ）与哮喘易感性最相关，说明了ＩＬ．２７ｐ２８与哮喘的遗传易感性紧密相关。Ｙｅｓｈｉｍｏｔｏ等研究证明了用ＩＬ一２７鼻腔给药途径能有效缓解由卵清蛋白致敏引起气道高反应的动物模型１１４ｌ，ＩＬ－２７抑制Ｔｈ２型细胞的生成能使Ｔｈ２型细胞极化，并提出了ＩＬ．２７有可能成为治疗哮喘的一种新途径。这些研究能够很好地说明ＩＬ．２７与哮喘的紧密关系，并且可以在特有的阶段起到对哮喘患者硕士学位论文综述的保护和治疗作用。４ＩＬ．２７与变应性鼻炎的关系变应性鼻炎是典型的Ｉ型变态反应性疾病，它是指特应型个体接触致敏原后，ＩｇＥ抗体参与的由多种免疫活性细胞和细胞因子共同作用的鼻黏膜的慢性炎症性反应。目前，变应性鼻炎的发病机制并不完全明了，比较公认是Ｔｈｌ／Ｔｈ２平衡失调学说，该学说认为Ｔ辅助细胞向Ｔｈ２方向偏移引起了抗原特异性抗体反应，导致ｌｇＥ大量升高，引起肥大细胞脱颗粒等连锁反应。目前，Ｔｈ眦失衡与疾病关系的研究是当前医学热点课题，而在变应性鼻炎的研究中，主要着眼于以下两点：一是研究已知治疗方法在治疗变应性鼻炎中是如何调节Ｔｈｌ／Ｔｈ２失衡的：二是基于纠正Ｔｈｌ／Ｔｈ２失衡为出发点，研究治疗变应性鼻炎的新药物。这两方面研究共同的核心部分，就是使Ｔｈ２反应减轻，或者使Ｔｈｌ反应增强，或者是使Ｔｈ２反应减轻和Ｔｈｌ反应增强结合起来，从而纠正Ｔｈｌ／Ｔｈ２失衡，达到治疗变应性鼻炎的目的。ＩＬ．２７以其上调Ｔｈｌ反应并抑制Ｔｈ２反应的特点可以纠正变应性鼻炎中的Ｔｈｌ／Ｔｈ２失衡，故而有可能成为治疗变应性鼻炎的新靶点。参考文献【ｌ】ＢａｔｔｅｎＭ，ＬｉＪ，ＹｉＳ，ｅｌａ１．Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ２７ｌｉｍｉｔｓａｕｔｏｉｍｍｕｎｅｅｎｃｅｐｈａｌｏｍｙｅｌｉｔｉｓｂｙｓｕｐｐｒｅｓｓｉｎｇｔｈｅｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔｏｆｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ１７－ｐｒｏｄｕｃｉｎｇＴｃｅｌｌｓ［Ｊ］．ＮａｔＩｒｎｍｕｎｏｌ，２００６，７（９）：９２９·９３６．【２】ＲｏｍａｇｎａｎｉＳ．Ｔｈｅｒｏｌｅｏｆｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅｓｉｎａｌｌｅｒｇｉｃｄｉｓｅａｓｅ［Ｊ］．ＡｌｌｅｒｇｙＣｌｉｎＩｍｍｕｎｏｌ，２０００，１０５：３９９－４０８．【３】董震，余翠萍．变应性鼻炎免疫治疗进展【Ｊ】．中华耳鼻咽喉科杂志，２０００，３５（４）：３０６－３０９．【４】ＬａｒｏｕｓｓｅｒｉｅＦ，ＢａｒｒｅｌＥ，ＰｆｌａｎｚＳ，ｅｌａ１．Ａｎａｌｙｓｉｓｏｆｉｎｔｅｌｅｕｋｉｎ－２７（ＥＢｌ３／ｐ２８）ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｉｎＥｐｓｔｅｉｎ—ＢａｒｒｖｉｒｕｓａｎｄｈｕｍａｎＴ－ｃｅｌｌｌｅｕｋｅｍｉａｖｉｒｕｓ２７硕士学位论文综述ｔｙｐｅ１－ａｓｓｏｃｉａｔｅｄｌｙｍｐｈｏｍａｓ：ｈｅｔｅｒｏｇｅｎｅｏｕｓｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆＥＢｌ３ｓｕｂｕｎｉｔｂｙＪｔｕｍｏｒａｌｃｅｌｌｓ［Ｊ］．ＡｍＰａｔｈｏｌ，２００５，１６６（４）：１２１７—１２２８．１３０ｃｏｎｓｔｉｔｕｔｅａ【５】ＰｆｌａｎｚＳ，ＨｉｂｂｅｒｔＬ，ＭａｔｔｓｏｎＪ，ｅｌａ１．ＷＳＸ－１ａｎｄｇｌｙｃｏｐｒｏｔｅｉｎｓｉｇｎａｌ－ｔｒａｎｓｄｕｃｉｎｇｒｅｃｅｐｔｏｒｆｏｒＩＬ·２７［Ｊ］．Ｉｒｎｍｕｎｏｌ，２００４，１７２（４）：２２２５—２２３１．【６】ＳｃｈｅｌｌｅｒＪ，ＳｃｈｕｓｔｅｒＢ，ＨｏｌｓｅｈｅｒＣ，ｅｔａ１．ＮｏｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎｏｆＩＬ一２７ｓｉｇｎａｌｉｎｇｂｙｓｏｌｕｂｌｅｇｐｌ３０．ＢｉｏｃｈｅｍＢｉｏｐｈｙｓＲｅｓＣｏｍｍｕｎ［Ｊ］．２００５，３２６（４）：７２４－７２８．【７】ＶｉｌｌａｒｉｎｏＡＶ，ＬａｒｋｉｎＪ３ｒｄ，ＳａｒｉｓＣＪ，ｅｌａ１．ＰｏｓｉｔｉｖｅａｎｄｎｅｇａｔｉｖｅｒｅｇｕｌａｔｉｏｎｏｆｔｈｅＩＬ－２７ｒｅｃｅｐｔｏｒｄｕｒｉｎｇｌｙｍｐｈｏｉｄｃｅｌｌ７６８４．７６９１．ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ［Ｊ］．Ｉｒｒｍａｕｎｏｌ，２００５，１７４（１２）：［８】ＯｗａｋｉｏｆＴｈｌＴ，ＡｓａｋａｗａＭ，ＭｏｒｉｓｈｉｍａＮ，ｅｔａ１．ＡｒｏｌｅｆｏｒＩＬ－２７ｉｎｅａｒｌｙｒｅｇｕｌａｔｉｏｎｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ［Ｊ］．Ｉｍｒｎｕｎｏｌ，２００５，１７５（４）：２１９１－２２００．ＬＭ，ＪｏｙｃｅＫ，ｅｔａ１．Ｃｕｔｔｉｎｇｅｄｇｅ：ｅａｒｌｙＩＬ．４ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ【９】ＡｒｔｉｓＤ，ＪｏｈｎｓｏｎｇｏｖｅｒｎｓｔｈｅｒｅｑｕｉｒｅｍｅｎｔｆｏｒＩＬ－－２７··ＷＳＸ·－１ｓｉｇｎａｌｉｎｇｉｎｔｈｅｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔｏｆＴｈｌｃｙｔｏｋｉｎｅｒｅｓｐｏｎｓｅｓｆｏｌｌｏｗｉｎｇｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅｌｅｉｓｈｍａｎｉａｍａｊｏｒｉｎｆｅｃｔｉｏｎ［Ｊ］．Ｉｍｍｕｎｏｌ，２００４，１７２（８）：４６７２－４６７５．Ｉ，ＧａｌｌｅＰＲ，ｅｔａ１．Ｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎｆｒｏｍｌｅｔｈａｌｓｅｐｔｉｃｐｅｒｉｔｏｎｉｔｉｓｂｙ【１０】ＷｉｒｔｚＳ，Ｔｕｂｂｅｎｅｕｔｒａｌｉｚｉｎｇｔｈｅｂｉｏｌｏｇｉｃａｌｆｕｎｃｔｉｏｎｏｆｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ２７［Ｊ］．ＥｘｐＭｅｄ，２００６，２０３（８）：１８７５－１８８１．【１１】ＧｏｌｄｂｅｒｇＲ，Ｗｉｌｄｂａｕｍａｄｊｕｖａｎｔ－ｉｎｄｕｃｅｄＧ，ＺｏｈａｒＹ，ｅｔａ１．Ｓｕｐｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆｏｎｇｏｉｎｇａｒｔｈｒｉｔｉｓｂｙｎｅｕｔｒａｌｉｚｉｎｇｔｈｅｆｕｎｃｔｉｏｎｏｆｔｈｅｐ２８ｓｕｂｕｎｉｔｏｆ１７８．ＩＬ－２７［Ｊ］．Ｉｍｍｕｎｏｌ，２００４，１７３（２）：１１７１－１【１２】ＧｏｌｄｂｅｒｇＲ，ＺｏｈａｒＹ，ＷｉｌｄｂａｎｍＧ，ｅｔａ１．Ｓｕｐｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆｏｎｇｏｉｎｇｂｙｎｅｕｔｒａｌｉｚｉｎｇｔｈｅｆｕｎｃｔｉｏｎｏｆｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌａｕｔｏｉｍｍｕｎｅｅｎｃｅｐｈａｌｏｍｙｅｌｉｔｉｓｔｈｅｐ２８ｓｕｂｕｎｉｔｏｆｌＬ－２７［Ｊ］．Ｉｒｍｎｕｎｏｌ，２００４，１７３（１０）：６４６５－６４７１．【１３】ＹｅｓｈｉｍｏｔｏＴ，ＹａｓｕｄａＫ，ｅｔａ１．ＩＬ一２７ｓｕｐｐｒｅｓｓｅｓＴｈ２ｃｅｌｌｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔａｎｄＴｈ２ｃｙｔｏｋｉｎｅｓｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎｆｒｏｍｐｏｌａｒｉｚｅｄＴｈ２ｃｅｌｌｓ：ａｎｏｖｅｌｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｗａｙｆｏｒＴｈ２－ｍｅｄｉａｔｅｄ４４１５—¨２３．ａｌｌｅｒｇｉｃｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ［Ｊ］．Ｉｍｍｕｎｏｌ，２００７，１７９（７）：［１４】ＹｅｓｈｉｍｏｔｏＴ，ＯｋａｄａＫ，ＭｏｒｉｓｈｉｍａＮ，ｅｔａ１．ＩｎｄｕｃｔｉｏｎｏｆＩｇＧ２ａｃｌａｓｓ硕士学佗论文综述ｓｗｉｔｃｈｉｎｇｉｎＢｃｅｌｌｓｂｙＩＬ－２７［Ｊ】．Ｉｍｍｕｎｄ，２００４，１７３（４）：２４７９·２４８５．【１５】ＭｉｙａｚａｋｉａｌｌｅｒｇｉｃＹ，ＩｎｏｕｅＨ，ＭａｔｓｕｍｕｒａＭ，ｅｔａ１．ＥｘａｃｅｒｂａｔｉｏｎｏｆｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌａｕｇｍｅｎｔｅｄＴｈ２ｒｅｓｐｏｎｓｅｓａｓｔｈｍａｂｙｉｎＷＳＸ··１·－ｄｅｆｉｃｉｅｎｔｍｉｃｅ［Ｊ］．Ｉｍｍｕｎｏｌ，２００５，１７５（４）：２４０４·２４０７．【１６】ＶｉｌｈｒｉｎｏＡＶ，ＳｔｕｍｈｏｆｅｒＪＳ，ＳａｒｉｓＣＪ，ｅｔａ１．ＩＬ－２７ｌｉｍｉｔｓ１Ｌ－２ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎｄｕｒｉｎｇＴｈｌｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ［Ｊ］．Ｉｍｍｕｎｏｌ，２００６，１７６（１），２３７－２４７．ＷＳＸ·１ｄｕｒｉｎｇ【１７】ＨｏｌｓｃｈｅｒＣ，ＨｏｌｓｃｈｅｒＡ，ＲｃｋｅｄＤ，ｅｌａ１．ＴｈｅＩＬ－２７ｒｅｃｅｐｔｏｒｃｈａｉｎｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｌｌｙｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌｒｅｇｕｌａｔｅｓａｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌｉｍｍｕｎｉｔｙａｎｄｓｕｒｖｉｖａｌｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ［Ｊ】．Ｉｍｍｕｎｏｌ，２００５，１７４（６），３５３４－３５４４．硕士学位论文致谢致谢值此毕业论文完成之际，首先衷心感谢我的导师曾强教授三年来对我学习上的谆谆教导和生活上的亲切关怀，衷心感谢伍伟景教授在论文选题、实验设计和论文写作等方面的悉心指导和严格要求！你们正直高尚的品格、渊博的学识、严谨务实的治学态度、孜孜不倦的探索精神深深地感染和激励了我，让我终身受用无穷！感谢湘雅二医院耳鼻喉科谢鼎华教授、杨新明教授、任基浩教授、曾益慈教授、肖自安教授、郭运凯教授、李友忠教授，贺湘波副教授、彭安全副教授、唐青来副教授、殷团芳副教授、杨曙副教授、王树辉副教授，胡鹏师兄、葛圣雷师兄、朱纲华师兄、汪芹师姐等在我求学期间给予我临床学习上的指导和生活中的关心与帮助，我将永远铭记在心！感谢岳阳市一人民医院耳鼻喉科杨滨主任、鲁勇兰护士长、张青松老师、王纯老师、李珞老师、程学良老师和黄晓红老师等给予我的指导、关心和照顾！感谢全体护士姐妹在我学习期间的帮助和关心！感谢各位师兄、师姐及同学朋友们的支持与帮助！感谢我的父母和家人一直以来对我无微不至的关爱！你们无私的付出和深切的企盼是我克服各种困难的动力，是你们的爱在激励着我奋勇向前！最后，再次向所有陪我一路走来的老师、同学和朋友们致以最诚挚的谢意！谢谢！变应性鼻炎患者血清IL-12和IL-27的表达水平及其意义初探

作者：

学位授予单位：

朱华兵中南大学

1. 方建林 TLR2、TLR3和TLR4在变应性鼻炎大鼠鼻黏膜组织中的表达[学位论文]20112. 赵冲 鼻腔黏膜淋巴系统引流障碍在鼻息肉发病机制中的作用[学位论文]20103. 郭小艳 布地奈德预防应用对变应性鲁炎大鼠模型IL-4、IL-5的影响[学位论文]20104. 陈倩 嗜酸氧化亚铁硫杆菌中铁氧还蛋白铁硫族组装机理的研究[学位论文]2011

5. 张静霞 湘江株洲段典型重金属污染区底微生物群落结构多样性及其生物浸出的研究[学位论文]20116. 李丛 无线传感器网络中基于节点协作的目标跟踪算法研究[学位论文]20117. 陈祖尧 TNF-α、MMP-9在鼻息肉嗜酸性粒细胞浸润过程中的作用[学位论文]20108. 黄欣 冷藏链中易腐食品冷藏运输品质安全与能耗分析[学位论文]20119. 苏明 基于运输合理化理论的多式联运方案决策研究[学位论文]2011

10. 李强 鼻内镜下高能量聚焦超声阻断鼻腔自主神经治疗变应性鼻炎的相关神经解剖学研究[学位论文]2010

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