２０１０年７月第４卷第ｌ３期Ｃｈｉｎ Ｊ Ｍｏｄ Ｄｒａｇ Ａｐｐｌ，Ｊｕ１ ２０１０，Ｖｏ１．４，Ｎｏ．１３ ・ｌ５・ 高效液相色谱法测定香连片中盐酸小檗碱 含量 黄玲王明霞 【摘要】 目的建立香连片的盐酸小檗碱含量的测定方法。方法采用高效液相色谱法对方中的 盐酸小檗碱进行含量测定，采用ＯＤＳ色谱柱（２５０ ｍｍ×４．６ ｍｍ，５ ｍ），柱温为室温，流动相为每１００ ｍｌ 加十二烷基磺酸钠０．１ ｇ的乙腈 ．１％磷酸溶液（４９：５１），检测波长为２６５ ｎｍ，流速：１ ｍｌ／ｍｉｎ。结果 盐酸小檗碱进样量在１．９５～１３．０ ｇ范围内线性良好，ｒ＝０．９９９５，平均回收率为９８．８４％（ｎ：５），ＲＳＤ＝ １．４７％。结论试验结果表明本法简便快速，重现性好，结果准确可靠，可以作为香连片中盐酸小檗碱 含量测定的方法。 【关键词】高效液相色谱法；香连片；盐酸小檗碱；含量测定 Ｃｏｎｔｅｎｔ ｏｆ Ｂｅｒｂｅｒｉｎｅ Ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ ｉｎ Ｘｉａｎｇｌｉａｎ Ｔａｂｌｅｔ ｂｙ ＨＰＬＣ ＨＵＡＮＧ Ｌｉｎｇ，ＷＡＮＧ Ｍｉｎｇ—ｘｉａ．Ｔｈｅ Ｗｏｍａｎ ａｎｄ Ｃｈｉｌｄ Ｈｅａｌｔｈ Ｈｏｓｐｉｔａｌ ｏｆＴｈｅ ｃｅｎｔｒｅ ｆｏＪｉｎｉｎｇ ｉｆｎｉｎｇ Ｓｈａｎｄｏｎｇ，２７２１００，Ｃｈｉｎａ 【Ａｂｓｔｒａｃｔ】 Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ Ｔｏ ｅｓｔａｂｌｉｓｈ ｔｈｅ ｍｅｔｈｏｄ ｔｏ ｄｅｔｅｒｍｉｎｅ ｔｈｅ ｃｏｎｔｅｎｔ ｏｆ Ｂｅｒｂｅｒｉｎｅ Ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ ｉｎ Ｘｉａｎｇｌｉａｎ Ｔａｂｌｅｔ．Ｍｅｔｈｏｄｓ Ｔｈｅ ｃｏｎｔｅｎｔ ｏｆ Ｂｅｒｂｅｒｉｎｅ Ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ ｉｎ Ｘｉａｎｇｌｉａｎ Ｔａｂｌｅｔ ｗａｓ ｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄ ｂｙ ＨＰＬＣ，ｕｓｉｎｇ ＯＤＳ Ｃ１８ ｃｏｌｕｍｎ（２５０ ｍｍ×４．６ ｍｍ，５ Ｉｘｍ）ａｔ ２６５ ｎｍ ｏｆ ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ｗａｖｅｌｅｎｇｔｈ，ａｎｄ ａｔ ２５￣Ｃ； ｔｈｅ ｍｏｂｉｌｅ ｐｈａｓｅ ｗａｓ Ａｃｅｔｏｎｉｔｒｉｌｅ－０．１％Ｐｈｏｓｐｈａｔｅ ａｃｉｄ（４９：５ １）ｗｉｔｈ １．０ ｓ／Ｌ Ｓｏｄｉｕｍ Ｄｏｄｅｃｙｌ Ｓｕｌｆａｔｅ；Ｔｈｅ ｌｆｏｗ ｒａｔｅ ｗａｓ １．０ ｍｌ／ｍｉｎ．Ｒｅｓｕｌｔｓ Ｔｈｅ ｌｉｎｅａｒ ｒａｎｇｅｓ ｏｆ Ｂｅｒｂｅｒｉｎｅ Ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ ｗｅｒｅ １．９５—１３．Ｏ ｇ，ｒ： ０．９９９５，ｔｈｅ ａｖｅｒａｇｅ ｒｅｃｏｖｅｒｙ ｗａｓ ９８．８４％（ｎ＝５），ａｎｄ ＲＳＤ ｗａｓ １．４７％．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｉｎｄｉｃａｔｅｄ ｔｈａｔ ｔｈｅ ｍｅｔｈｏｄ ｉｓ ａ ｓｉｍｐｌｅ，ｑｕｉｃｋ，ｗｅｌｌ ｒｅｐｅａｔａｂｌｅ，ｃｏｒｒｅｃｔ ａｎｄ ｒｅｌｉａｂｌｅ ｗａｙ ｔｏ ｄｅｔｅｒｍｉｎｅ ｔｈｅ ｃｏｎｔｅｎｔ ｏｆ Ｂｅｒｂｅｒ・ ｉｎｅ Ｈｙｄｒｏｅｈｌｏｒｉｄｅ ｉｎ Ｘｉａｎｇｌｉａｎ Ｔａｂｌｅｔ，ｗｉｔｈ ｗｅｌｌ ｒｅｐｅａｔｂａｉｌｉｔｙ ａｎｄ ｃｏｒｒｅｃｔ ｒｅｓｕｌｔｓ． 【Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ】ＨＰＬＣ ｍｅｔｈｏｄ；Ｘｉａｎｇｌｉａｎ Ｔａｂｌｅｔ；Ｂｅｒｂｅｒｉｎｅ Ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ；Ｃｏｎｔｅｎｔ ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ 香连片…是由《中国药典》（２００５年版）一部收载的传统 精密称取细粉适量（约相当于盐酸小檗碱６０ ｍｇ），置具塞锥 中成药香连丸经改变剂型而得。组方由中药黄连，木香组 形瓶中，加盐酸一甲醇（１：１００）１００ ｍｌ，密塞，精密称定重量，超 成。具有清热燥湿，行气止痛功效。用于湿热痢疾，里急后 声处理２Ｏ ａｒｉｎ、３０ ｒａｉｎ、４０ ｍｉｎ，放冷，精密称定，用甲醇补足 重，腹痛泄泻；菌痢，肠炎。中国药典２００５版对香连片中盐 减失重量，摇匀，滤过，精密量取滤液５．０ ｍｌ置５０ ｍｌ量瓶 酸小檗碱的含量测定采用薄层扫描法。为改进制剂质量控 中．用甲醇稀释至刻度，用微孔滤膜（Ｏ．４５ｔｚｍ）滤过，取续滤 制标准，笔者建立了高效液相色谱法测定香连片中盐酸小檗 液，即得．比较三次不同时间的回收率，２０ ｒａｉｎ＜３０ ｍｉｎ＝４０ 碱含量方法。利用超声波提取法提取供试样品，优选提取时 ｍｉｎ，样品供试液的制备以超声处理３０ ｒａｉｎ为宜。 间，本方法操作简便易行，结果准确可靠，可用于香连片的质 ２．４线性关系考察取２．２项下对照品溶液，分别精密吸 量控制。 取３、５、１０、１５、２０ ｌ进样分析，测定峰面积，以峰面积值（Ａ） １仪器与试药Ａｇｉｌｅｎｔ １２００型高效液相色谱仪；ＣＰ２２５Ｄ型 为纵坐标、进样量（Ｃ）为横坐标绘制标准曲线，回归方程Ａ 电子分析天平；ＫＱ－４ＯＯＤＢ超声波清洗器（昆山市超声仪器有 ＝４８１．９２Ｃ一１２．４３，ｒ＝０．９９９５。结果表明盐酸小檗碱进样量 限公司）；盐酸小檗碱对照品（购于中国药品生物制品检定 在１．９５～１３．０ ｇ范围内与峰面积线性关系良好。 所）；乙腈为色谱纯，水为重蒸馏水；香连片（湖北某制药有限 ２．５精密度试验取同一批样品供试品溶液１０ ｌ，连续进 公司生产，批号：０８０３１８、０８０５１４、０８０８２２）；其他试剂（分析 样５次，测定盐酸小檗碱的峰面积。结果ＲＳＤ＝１．９２％（ｎ＝ 纯）。 ５），表明精密度良好。 ２方法与结果 ２．６稳定性试验取同一份样品供试品溶液，于０，２，４，６， ２．１色谱条件及系统适用性试验 固定相为十八烷基键 ８，１０，１２ ｈ时，测定盐酸小檗碱峰面积。计算ＲＳＤ＝１．８７％ 合硅胶，色谱柱：ＯＤＳ（２５０ ｍｍ×４．６ ｍｍ，５ ｍ）；流动相：每 （ｎ＝７），表明供试品溶液在１２ ｈ内稳定。 １００ ｍｌ加十二烷基磺酸钠０．１ ｇ的乙腈 ．１％磷酸溶液（４９： ２．７重现性试验取香连片（批号：０８０５１４），按供试品溶液 ５１）；，检测波长：２６５ｎｍ；柱温：室温；流速：１ ｍｌ／ｍｉｎ；进样量： 的制备方法制备５份供试品溶液分别测定盐酸小檗碱含量。 ｌＯ ｌ；理论塔板数按盐酸小檗碱峰计应不低于４０００。 结果盐酸小檗碱平均含量为２２．３４ ｍｇ／片，ＲＳＤ：２．１３％（ｎ ２．２对照品溶液的制备精密称取在ＩＯ０￣Ｃ干燥５ ｈ的盐 ＝５），表明方法重现性良好。 酸小檗碱对照品适量，加甲醇制成每１ ｍｌ含０．６５ ｍｇ的溶 ２．８加样回收率试验考察取已知含量的样品约０．２５ ｇ， 液，即得。 加入盐酸小檗碱对照品溶液（ｅ＝０６５ ｍｇ／ｍ１）９ ｍｌ，按供试品 ２．３样品供试液的制备 取本品２０片，精密称定，研细， 溶液制备操作，进样测定含量，计算回收率，平均回收率（％） ＝９８．８４，ＲＳＤ（％）＝１．４７，测定结果见表１。结果表明：本 作者单位：２７２１ ００济宁市中区妇幼保健院 方法回收率良好。 ・１６・ 生！ 筮 卷第】 期Ｃｈｉｎ Ｊ Ｍｏｄ Ｄｒａｇ ＡｐｐｌＪｕｌ ２０１０。Ｖｏ１．４。Ｎｏ．１３ ，酸性染料比色法测定硫酸奈替米星注射液 的含量 吴福祥候志坚张夙萍 依据奈替米 【摘要】 目的建立以酸性染料比色法测定硫酸奈替米星注射液含量的方法。方法ｎｍ的波长处测定吸光度，并计算含量。结果星与酸性染料溴甲酚紫（ＢＣＰ）在ｐＨ６．８的磷酸盐缓冲液中反应生成的有色离子对的光谱特征，于４２８ 奈替米星在２７．９－９３．０￣ｇ／ｍｌ的范围内与吸光度呈良好 的线性关系（ｒ＝Ｏ．９ ９９７），平均回收率９９．４６％（ＲＳＤ＝０．６６％）。结论本法快速、简便，结果准确可靠。 【关键词】 酸性染料比色法；硫酸奈替米星；澳甲酚紫；含量测定 Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ Ｎｅｔｉｌｍｉｃｉｎ Ｓｕｌｆａｔｅ Ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ ｂｙ Ａｃｉｄ ｄｙｅ ｃｏｌｏｒｉｍｅｔｒｙ ＷＵ Ｆｕ—ｘｉａｎｇ，ＨＯＵ Ｚｈｉ－ｊｉａｎ， ＺＨＡＮＧ Ｓｕ－ｐｉｎｇ．Ｄｉｎｇｘｉ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｆｏｒ Ｄｒｕｇ Ｃｏｎｔｒｏｌ，Ｇａｎｓｕ，Ｄｉｎｇｘｉ ７４３０００，Ｃｈｉｎａ 【Ａｂｓｔｒａｃｔ】Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ Ｔｏ ｅｓｔａｂｌｉｓｈ ａ ｍｅｔｈｏｄ ｆｏｒ ｃｏｎｔｅｎｔ ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ ｐｒｉｎｃｉｐａｌ ａｇｅｎｔｓ ｉｎ Ｎｅｔｉｌｍｉｃｉｎ Ｓｕｌｆａｔｅ Ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ ｂｙ Ａｃｉｄ ｄｙｅ ｅｏｌｏｒｉｍｅｔｒｙ．Ｍｅｔｈｏｄｓ Ｏｎ ｔｈｅ ｂａｓｉｓ ｏｆ ｔｈｅ ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｉｒｃ ｆｅａｔｕｒｅｓ ｏｆ ｉｏｎ ｐａｉｒ ｅｏｍ— ｐｏｕｎｄ ｐｒｏｄｕｃｅｄ ｉｎ ｔｈｅ ｒｅａｃｔｉｏｎ ｂｅｔｗｅｅｎ Ｎｅｔｉｌｍｉｃｉｎ Ｓｕｌｆａｔｅ Ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ ａｎｄ Ｂｒｏｍｏｃｒｅｓｏｌ Ｐｕｒｐｌｅ ｉｎ ｂｕｆｆｅｒ ｓｏｌｕｔｉｏｎ ｐＨ ６．８，ａｂｓｏｒｂａｎｃｅ ｗａｓ ｄｅｔｅｃｔｅｄ ａｔ ｔｈｅ ｗａｖｅｌｅｎｇｔｈ ｏｆ ４２８ｎｍ ａｎｄ ｃｏｎｔｅｎｔ ｗａｓ ｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄ．Ｒｅｓｕｌｔｓ Ｔｈｅ ｄｅｔｅｃ— ｔｅｄ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ ｏｆ Ｎｅｔｉｌｍｉｃｉｎ Ｓｕｌｆａｔｅ Ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ ｓｈｏｗｅｄ ｇｏｏｄ ｌｉｎｅｓｒ ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐ ｗｉｔｈ ｉｔｓ ａｂｓｏｒｂａｎｃｅ（ｒ＝０．９ ９９７）ｗｉｔｈｉｎ ｔｈｅ ｒａｎｇｅ ｏｆ ２７．９～９３．０ ｇ／ｍ１．Ｔｈｅ ａｖｅｒａｇｅ ｒｅｃｏｖｅｒｙ ｗａｓ ９９．４６％（ＲＳＤ＝０．６６％）．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ Ｔｈｅ ｅｓｔａｂｌｉｓｈｅｄ ｍｅｔｈｏｄ ｉｓ ｒａｐｉｄ，ｓｉｍｐｌｅ ａｎｄ ａｃｃｕｒｓｔｅ． 【Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ】 Ａｃｉｄ ｄｙｅ ｃｏｌｏｒｉｍｃｔｒｙ；Ｎｅｔｉｌｍｉｃｉｎ Ｓｕｌｆａｔｅ Ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ；Ｂｒｏｍｏｃｒｅｓｏｌ Ｐｕｒｐｌｅ；Ｃｏｎｔｅｎｔ ｄｅｔｅｒｍｉ． ｎａｔｉｏｎ 作者单位：７４３０００甘肃省定西市药品检验所 ２．９样品含量测定 取３批（分别为０８０３１８、０８０５１４、 分充分接触，有利于有效成分向提取溶剂转移，提高提取效 率，该方法操作简单，副产品较少。 本试验采用超声波提取供试样品，比较了超声２０、３０、４０ ０８０８２２批次）样品，分别按供试品溶液制备方法制备，进样 １０ ｌ，按上述色谱条件测定，按外标法计算样品中盐酸小檗 碱的含量，结果见表２。 表２不同批号中盐酸小檗碱含量测定结果（ｎ＝５） 批号 盐酸小檗碱的含量（ｍｒ，／片） ２３．０５ ｍｉｎ不同时间盐酸小檗碱的提取率，结果３０ ｍｉｎ提取的得率 与４０ ｍｉｎ的相同，因此确定提取时间为３０ ｍｉｎ。由于盐酸小 檗碱属碱性较强的季胺型类生物碱，用普通流动相，色谱图 会产生严重拖尾。本文采用离子对色谱条件，并能较好地解 决色谱峰拖尾现象。 参考文献 ［１］ 国家药典委员会．中国药典２００５年版一部．北京：化学工业出 版社，２００５：５２２． ２２．３４ ２１．９６ ３讨论 近年来采用超声波作为一种新技术在提取中草药有效 成分方面，应用已日趋广泛。超声波是指振动频率大于 ２０ＫＨＺ，在自然环境中无法听到和感受到的一种弹性机械振 动波。它具有空化效应，热效应，机械搅拌，强化扩散，乳化， 凝聚，机械粉碎等作用。超声波提取法的原理是利用其空化 ［２］ 张芳．高效液相色谱法测定黄柏八味胶囊中盐酸小檗碱含量． 中国药业，２００８，１７（１７）：２８． ［３］吴建龙，简炎林．高效液相色谱法测定香连片中小檗碱的含 量．广东药学，２００４，１４（４）：１４． 效应和强化扩散所产生的弹性波，给媒质质点以很大的速度 和加速度，将植物体快速穿透，使溶剂能和植物中的有效成
