分子生物学期末考试试题
一、名词解释
1、反式作用因子:能直接或间接地识别或结合各类顺式作用元件核心序列,参与调控靶基因转录效率的蛋白质。 2、基因家族:
3、C值矛盾:C值是指真核生物单倍体的DNA含量,一般的,真核生物的进化程度越高,C值越大,但在一些两栖类生物中,其C值却比哺乳动物大的现象。原因是它含有大量的重复序列,而且功能DNA序列大多被不编码蛋白质的非功能DNA所隔开。
4、核型: 指一个物种所特有的染色体数目和每一条染色体所特有的形态特征。 5、RNA editing:转录后的RNA在编码区发生碱基的突变、加入或丢失等现象。 二、判断:
1、真核生物所有的mRNA都有polyA结构。 ( X )
组蛋白的mRNA没有
2、由于密码子存在摇摆性,使得一种tRNA分子常常能够识别一种以上同一种氨基酸的密码子。 ( √ )
3、大肠杆菌的连接酶以ATP作为能量来源。( X )
以NAD作为能量来源
4、tRNA只在蛋白质合成中起作用。( X )
tRNA还有其它的生物学功能,如可作为逆转录酶的引物 5、DNA聚合酶和RNA聚合酶的催化反应都需要引物。( X )
RNA聚合酶的催化反应不需要引物
6、真核生物蛋白质合成的起始氨基酸是甲酰甲硫氨酸 ( X )
真核生物蛋白质合成的起始氨基酸是甲硫氨酸 7、质粒不能在宿主细胞中独立自主地进行复制 ( X )
质粒具有复制起始原点,能在宿主细胞中独立自主地进行复制
8、RNA因为不含有DNA基因组,所以根据分子遗传的中心法则,它必须先进行反转录,才能复制和增殖。( X )
不一定,有的RNA病毒可直接进行RNA复制和翻译 9、细菌的RNA聚合酶全酶由核心酶和ρ因子组成。( X )
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细菌的RNA聚合酶全酶由核心酶和σ因子组成
10、核小体在复制时组蛋白八聚体以全保留的方式传递给子代。( √ ) 11、色氨酸操纵子中含有衰减子序列( √ )
12、SOS框是所有din基因(SOS基因)的操纵子都含有的20bp的lexA结合位点。( √ ) 三、填空:
1、原核生物的启动子的四个保守区域为 转录起始点 、 -10区 、 -35区 、 -10区与-35区的距离 。
2、根据对DNA序列和蛋白质因子的要求,可以把重组分为 同源重组 、 位点专一性重组/特异位点重组 、 转座重组 、异常重组 四类。
3、研究启动子功能的主要方法是 启动子的突变 ,研究酶与启动子间识别与结合的方法有 足迹法 和 碱基修饰法 。
4、真核生物中反式作用因子的DNA结合结构域有 螺旋-转角-螺旋(HTH) 、碱性-螺旋-环-螺旋(bHLH) 、锌指(zinc finger) 、 碱性-亮氨酸拉链(bZIP)。 5、根据 DNA复性动力学,DNA序列可以分成哪四种类型? 单一序列 、轻度重复序列、 中度重复序列、 高度重复序列 四、 选择题(10分,每题1分)
1、在真核基因表达调控中,( B )调控元件能促进转录的速率。 A、衰减子 B、增强子 C、repressor D、TATA Box 2、核基因mRNA、 的内元拼接点序列为( D )。
A、AG…GU B、GA…UG C、UG…GA D、GU…AG 3、下列何种因子不会诱变DNA( D )
A、亚硝酸 B、 UV C、丫啶橙 D、饱和脂肪乳剂 4、RNA聚合酶1的功能是( C )
A 转录tRNA和5sRNA基因; B转录蛋白质基因和部分snRNA基因; C 只转录rRNA基因; D转录多种基因
5、如果一段DNA产生了+1的译码突变,可以加以校正的是( D ) A 突变型氨酰tRNA合成酶 B 有突变型反密码子的tRNA C 有切割一个核苷酸的酶 D 有四个碱基长的反密码子的tRNA 6、参与重组修复的酶系统中,具有交换DNA链活性的是( D )
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A DNA聚合酶I B RecB蛋白 C RecC蛋白 D RecA蛋白 7、原核RNA pol 识别的启动子位于:( A )
A、 转录起始点的上游; B、 转录起始点的下游; C、 转录终点的下游; D、 无一定位置;
8、在研究原核翻译过程中,可用不同的抑制剂研究翻译诸阶段,其中链霉素可抑制:( C ) A、 起始 B、 延长 C、 肽基有P位移至A位 D、 核糖体移位 9、在什么情况下,乳糖操纵子的转录活性最高( A ) A 高乳糖,低葡萄糖 B 高乳糖,高葡萄糖
C 低乳糖,低葡萄糖 D低乳糖,高葡萄糖
10、设密码子为5’XYZ 3’,反密码子为5’ABC 3’,则处于摆动位置上的碱基为( C ) A X-C B Y-B C Z-A 五、简答:
1.叙述由一段DNA序列形成多种蛋白产物的机制。
答:由一段DNA形成多种蛋白产物的可能机制有:阅读框不同、抗终止作用、可变剪切和RNA编辑。
重叠基因在фX174中最早发现,两个邻近的基因以一种巧妙的方式发生重叠,转录出来的mRNA以不同的阅读框阅读并被表达,产生两种以上的蛋白产物。在λ噬菌体中有不同时期表达的操纵子,如左向早期操纵子可以转录出两种mRNA,这是由于依赖于ρ因子的终止作用以及早期基因编码的抗终止蛋白的抗终止作用造成的。抗终止蛋白与RNA聚合酶结合后修饰了酶的构象,使其不再识别弱终止子,从而使一段DNA可以转录出多种mRNA,从而产生两种以上的蛋白产物。
真核生物的hnRNA含有内含子,通过剪接可将其出去形成Mrna,但有的高等真核细胞存在可变剪接,即来自一个基因的RNA,其某个内含子的5‘供体在不同的条件下和不同内含子的3’受体进行剪接,从而将来自一个基因的mRNA前体剪接产生多种mRNA,翻译出不同的蛋白质。另外,在真核生物中存在RNA编辑,将mRNA在转录后进行插入、缺失或核苷酸的替换,改变DNA 模板的遗传信息,从而翻译出氨基酸序列不同的多种蛋白质。 1、 各种二核苷酸对的排列顺序不同,对双螺旋结构的影响不同。 (1) 请问那种的Tm最低?
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答:的Tm值最低。
(2) 含这种二核苷酸的序列有那些,为什么?(7分)
答:含有A/T的主要有复制起始点、原核生物启动子的-10区、真核生物启动子的TATA框,此外,还有生物体选择以UAA作为最有效的终止密码子。
DNA在复制和转录时要在起始原点和启动子区形成起始复合物,复制起始点、原核生物启动子的-10区、真核生物启动子的TATA框富含AT对,二者之间有两条氢键,在此处易于解开双链,容易形成起始复合物,使复制和转录过程顺利进行。生物体选择以UAA作为最有效的终止密码子,因为在64的密码子中,假使UAA具有和它配对的反密码子,所形成的产物在生理条件下也是不稳定的,有利于肽链的释放,而且UAA 很少发生无义抑制突变,有利于肽链的正常终止。 3、详述大肠杆菌色氨酸操纵子的调控机理。(12分)
答:大肠杆菌色氨酸操纵子的转录受阻遏和衰减两种机制的控制,前者通过阻遏蛋白和操纵基因的作用控制转录的起始,后者通过前导序列形成特殊的空间结构控制转录起始后是否进行下去。 1)色氨酸操纵子的可阻遏系统:
在阻遏系统中,起负调控的调节基因的产物是一个无活性的阻遏蛋白,色氨酸是辅阻遏物;当色氨酸不足时,阻遏蛋白无活性,不能和操纵基因结合,色氨酸操纵子能够转录;当色氨酸充足时,阻遏蛋白和它结合而被激活,从而结合到操纵基因上,而色氨酸操纵子的操纵基因位于启动基因内,因此,活性阻遏物的结合排斥了RNA聚合酶的结合,从而抑制了结构基因的表达。 2)色氨酸操纵子的衰减调控
在色氨酸操纵子的操纵基因和第一个结构基因之间有一段前导序列L,在前导序列上游部分有一个核糖体结合位点,后面是以起始密码AUG开头的14个氨基酸的编码区,编码区有两个紧密相连的色氨酸密码子,后面是一个终止密码子UGA,在开放阅读框下游有一个不依赖ρ因子的终止子,是一段富含G/C的回文序列,可以形成发夹结构,因此可以在此处终止转录。另外前导序列包含4个能进行碱基互补配对的片断1区、2区、3区和4区。它们能以1、2和3、4或2、3的方式进行配对,从而使前导序列形成二级结构的变化。在细菌中,翻译与转录偶连,一旦RNA聚合酶转录出trp mRNA中的前导肽编码区,核糖体便立即结合上去翻译这一序列。当细胞中缺乏色氨酸时,Trp-tRNATrp的浓度很低,核糖体翻译前导肽至两个连续的色氨酸密码子处就陷入停顿,这时核糖体只占据1区,由RNA聚合酶转录的2区和3区便可配对,4区游离在外,这样就不能形成终止子结构,RNA聚合酶就可以一直转录下去,最后完成trp全部结构基因的转录,得
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到完整的mRNA分子。当细胞中存在色氨酸时,就有一定浓度的Trp-tRNATrp,核糖体便能顺利通过两个连续的色氨酸密码子而翻译出整个前导肽,直到前导肽序列后面的终止密码子UGA处停止。此时,核糖体占据了1区和2区,结果3区和4区配对,形成转录终止子结构,使RNA聚合酶终止转录。实现衰减调控的关键在于时间和空间上的 巧妙安排。在空间上,两个色氨酸密码子的位置很重要,不可随意更改;在时间上,核糖体停顿于两个色氨酸密码子上时,序列4应当还未转录出来。
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